青天葵球莖組培快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種青天葵球莖組培快速繁殖方法，涉及生物工程【技術(shù)領(lǐng)域】，本發(fā)明通過下述方案得以實(shí)現(xiàn)：以青天葵球莖為外植體，經(jīng)消毒處理后，對(duì)球莖進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng)，通過培養(yǎng)獲得根狀莖；然后對(duì)根狀莖進(jìn)行增殖培養(yǎng)，形成大量根狀莖；再對(duì)根狀莖進(jìn)行球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)，可以形成大量球莖種源，該方法可以提高青天葵的球莖繁殖速度和增殖倍數(shù)，有利于青天葵球莖工廠化生產(chǎn)。
【專利說明】青天葵球莖組培快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥用青天葵的球莖培養(yǎng)方法，尤其涉及一種青天葵球莖組培快速繁殖方法。
【背景技術(shù)】
[0002]青天葵是是一種名貴中藥，主要分布在廣東、廣西、四川和云南等地，是廣東地產(chǎn)“南藥”之一，其藥用部分為葉片或全株，近年來，由于市場(chǎng)價(jià)格較好，人們亂采亂挖，多是連葉帶球莖采挖加工，野生資源瀕臨枯竭，近年來，青天葵人工栽培一是采樣傳統(tǒng)球莖進(jìn)行人工繁殖，但由于青天葵每株每年只繁殖I~2個(gè)球莖，每個(gè)球莖只能發(fā)育成一株完整植株，不僅繁殖率低，而且周期較長，二是利用組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)青天葵種苗進(jìn)行繁殖，但種苗繁殖技術(shù)還不成熟，繁殖系數(shù)低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為了克服現(xiàn)有青天葵種苗繁殖方法上的不足，本發(fā)明提供一種青天葵球莖組培快速繁殖方法，該方法可以提高青天葵的球莖繁殖速度和增殖倍數(shù)，有利于青天葵球莖工廠化生產(chǎn)。
[0004]本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:以青天葵球莖為外植體，經(jīng)消毒處理后，對(duì)球莖進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng)，通過培養(yǎng)獲得根狀莖；然后對(duì)根狀莖進(jìn)行增殖培養(yǎng)，形成大量根狀莖；再對(duì)根狀莖進(jìn)行球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)，可以形成大量球莖種源。
[0005]外植體選取與消毒:選取生長健壯無病蟲的球莖，先用洗衣粉浸泡，用牙刷將球莖上的泥土洗刷干凈，然后用75%的酒精浸泡30s后置于0.1 %的升汞溶液中消毒10~15min,再用無菌水沖洗5~6次。
[0006]萌發(fā)培養(yǎng):將球莖接種到萌發(fā)培養(yǎng)基上，萌發(fā)培養(yǎng)基為MS+BA2.0~4.0毫克/升+ΝΑΑ0.5~1.0毫克/升+ΚΤ0.5~1.0毫克/升+LH(水解乳蛋白)1.0克/升+蔗糖30克/升，萌發(fā)培養(yǎng)基PH5.8~6.2，培養(yǎng)溫度25~27°C，光照強(qiáng)度1500~2000Lx，每天光照12小時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間30~45天，誘導(dǎo)出根狀莖。
[0007]根狀莖增殖培養(yǎng):將根狀莖接種到增殖培養(yǎng)基上，增殖培養(yǎng)基為MS+BA2.0~4.0毫克/升+NAA2.0~4.0毫克/升+GA3 2.0~4.0毫克/升+10~20%椰子汁+蔗糖30克/升，增殖培養(yǎng)基PH5.8~6.2，培養(yǎng)溫度25~27°C，光照強(qiáng)度1500~2000Lx，每天光照12小時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間30~45天，獲得大量根狀莖。
[0008]球莖誘導(dǎo)培養(yǎng):將根狀莖接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1/2MS+BA0.1~0.5毫克+ΝΑΑ0.1~0.5毫克/升+10~20 %椰子汁+0.1 %炭，增殖培養(yǎng)基pH5.8~6.2，培養(yǎng)溫度25~27°C，黑暗培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間50~60天，獲得大量球莖種源，直接用于栽培生產(chǎn)即可。
[0009]本發(fā)明的有益效果是，可提高青天葵種苗繁殖速度和增值倍數(shù)，縮短種苗繁殖周期，有利于進(jìn)行工廠化生產(chǎn)?！揪唧w實(shí)施方式】
[0010]選取生長健壯無病蟲的球莖為外植體，具體方法包括下述步驟:(I)外植體選取與消毒:選取生長健壯無病蟲的球莖，先用洗衣粉浸泡，用牙刷將球莖上的泥土洗刷干凈，然后用75%的酒精浸泡30s后置于0.1 %的升汞溶液中消毒10~15min，再用無菌水沖洗5~6次；(2)萌發(fā)培養(yǎng):將球莖接種到萌發(fā)培養(yǎng)基上，萌發(fā)培養(yǎng)基為MS+BA2.0~4.0毫克/升+ΝΑΑ0.5~1.0毫克/升+ΚΤ0.5~1.0毫克+LH(水解乳蛋白)1.0克/升+蔗糖30克/升，萌發(fā)培養(yǎng)基PH5.8~6.2，培養(yǎng)溫度25~27°C，光照強(qiáng)度1500~2000Lx，每天光照12小時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間30~45天，誘導(dǎo)出根狀莖；(3)根狀莖增殖培養(yǎng):將根狀莖接種到增殖培養(yǎng)基上，增殖培養(yǎng)基為MS+BA2.0~4.0毫克/升+NAA2.0~4.0毫克/升+GA3 2.0~4.0毫克/升+10~20 %椰子汁+蔗糖30克/升，增殖培養(yǎng)基pH5.8~6.2，培養(yǎng)溫度25~27°C，光照強(qiáng)度1500~2000Lx，每天光照12小時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間30~45天，獲得大量根狀莖；(4)球莖誘導(dǎo)培養(yǎng):將根狀莖接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1/2MS+BA0.1~0.5毫克+ΝΑΑ0.1~0.5毫克/升+10~20%椰子汁+0.1 %炭，增殖培養(yǎng)基ρΗ5.8~6.2，培養(yǎng)溫度25~27°C，黑暗培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間50~60天，獲得大量球莖種源。
【權(quán)利要求】
1.一種青天葵球莖組培快速繁殖方法，其特征是:以青天葵球莖為外植體，經(jīng)消毒處理后，對(duì)球莖進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng)，通過培養(yǎng)獲得根狀莖；然后對(duì)根狀莖進(jìn)行增殖培養(yǎng)，形成大量根狀莖；再對(duì)根狀莖進(jìn)行球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)，可以形成大量球莖種源；具體步驟如下: (1)外植體選取與消毒:選取生長健壯無病蟲的球莖，先用洗衣粉浸泡，用牙刷將球莖上的泥土洗刷干凈，然后用75%的酒精浸泡30s后置于0.1 %的升汞溶液中消毒10~15min,再用無菌水沖洗5~6次； (2)萌發(fā)培養(yǎng):將球莖接種到萌發(fā)培養(yǎng)基上，萌發(fā)培養(yǎng)基為MS+BA2.0~4.0毫克/升+ΝΑΑ0.5~1.0毫克/升+ΚΤ0.5~1.0毫克+LH(水解乳蛋白)1.0克/升+蔗糖30克/升，萌發(fā)培養(yǎng)基PH5.8~6.2，培養(yǎng)溫度25~27°C，光照強(qiáng)度1500~2000Lx，每天光照12小時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間30~45天，誘導(dǎo)出根狀莖； (3)根狀莖增殖培養(yǎng):將根狀莖接種到增殖培養(yǎng)基上，增殖培養(yǎng)基為MS+BA2.0~4.0毫克/升+NAA2.0~4.0毫克/升+GA3 2.0~4.0毫克/升+10~20%椰子汁+蔗糖30克/升，增殖培養(yǎng)基PH5.8~6.2，培養(yǎng)溫度25~27°C，光照強(qiáng)度1500~2000Lx，每天光照12小時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間30~45天，獲得大量根狀莖； (4)球莖誘導(dǎo)培養(yǎng):將根 狀莖接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1/2MS+BA0.1~0.5毫克+ΝΑΑ0.1~0.5毫克/升+10~20 %椰子汁+0.1 %炭，增殖培養(yǎng)基pH5.8~6.2，培養(yǎng)溫度25~27°C，黑暗培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間50~60天，獲得大量球莖種源。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103535275SQ201210266184
【公開日】2014年1月29日 申請(qǐng)日期:2012年7月15日 優(yōu)先權(quán)日:2012年7月15日
【發(fā)明者】李守嶺, 白燕冰, 高燕 申請(qǐng)人:云南省德宏熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所