專利名稱：一種多元復(fù)合微生物菌肥及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種多元復(fù)合微生物菌肥及其制備方法。
背景技術(shù)：
糧食生產(chǎn)是人類生存中至關(guān)重要的大事，而糧食危機(jī)是人類社會(huì)正面臨的五大危機(jī)之一。因此，如何解決這一迫在眉睫的大事就顯得尤為重要了。為了滿足農(nóng)作物生存、生產(chǎn)所需的氮、磷等營養(yǎng)元素，工業(yè)化肥一直被認(rèn)為是實(shí)現(xiàn)這一目的主要途徑。然而，隨著化肥使用量的不斷增大，其負(fù)面影響日益明顯，如成本高、對非再生能源消耗大，污染空氣、土壤及水質(zhì)、危害農(nóng)牧業(yè)等食品安全、破壞土壤結(jié)構(gòu)及微生物區(qū)系及多樣性等。植物根際促生菌(Plantgrowth-promoting rhizobacteria, PGPR)指生存于植物 根際、根表，并能直接或間接地促進(jìn)或調(diào)節(jié)植物生長的微生物。由于植物根系可分泌大量的糖類、氨基酸、激素和維生素，所以根際/根表中的細(xì)菌數(shù)總是高于土壤中缺乏根系區(qū)域的細(xì)菌數(shù)，常常要高許多倍。這就為我們利用這些根際促生菌來提高農(nóng)作物產(chǎn)量，進(jìn)而解決糧食危機(jī)提供了豐富的微生物種質(zhì)資源，同時(shí)也為研究PGPR的促生機(jī)制提供了大量的實(shí)驗(yàn)材料。PGPR在提高作物固氮能力、改善土壤環(huán)境、調(diào)節(jié)植物生長、促進(jìn)植物抗病抗逆能力，改善作物品質(zhì)提高產(chǎn)量等各方面有重要的意義。本發(fā)明的目的在于采用由作物根際的一些可溶磷、固氮、產(chǎn)IAA以及拮抗一些作物病原菌的組成的微生物復(fù)合肥料，在為作物提供一定量的磷、氮和IAA等有益元素和物質(zhì)外，同時(shí)能補(bǔ)充土壤中的有益微生物。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于在菌肥中加入磷灰石補(bǔ)充磷，使得菌肥無論是在儲存，還是施入土壤后都能及時(shí)補(bǔ)充大量的磷素，使溶磷菌能充分發(fā)揮作用，并且成本低易于工業(yè)化。培養(yǎng)基也可以同菌體一起使用，加入培養(yǎng)基可使有益微生物在儲存和施入土壤后都有較充足的營養(yǎng)成分，使細(xì)菌在數(shù)量上能不斷增加，以增加肥效。長期使用可改善土壤結(jié)構(gòu)，同時(shí)可促生、防病。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種新型多元復(fù)合微生物菌肥的制備方法，該方法通過加入由一些可溶磷、固氮、產(chǎn)IAA以及拮抗一些病原菌的植物根際有益活性菌群組成。一種多元復(fù)合微生物菌肥的制備方法，將4種微生物菌株在各自的液體培養(yǎng)基培養(yǎng)24h，待其活菌數(shù)量達(dá)到IO9個(gè)后，將培養(yǎng)的各菌株培養(yǎng)物按如下體積百分比例混合解憐菌(Bacillusmegaterium, CGMCC No. 4296)30% ；固氮菌(Azotobacterbei jerinckii, DSM No. 373)30% ；產(chǎn)IAA 菌(Paenibacillus po lymyxa, CGMCC No. 3044) 20% ；措抗病原菌(Paracoccussphaerophysae, ACCC 05413T) 20% ；混合以后的混合液，按照混合液總體積的百分比例計(jì)，在上述復(fù)合菌株中分別加入5%的產(chǎn)IAA培養(yǎng)基、5%的解磷菌Pikovskaya’ s培養(yǎng)基、5%的固氮菌Ashby培養(yǎng)基和5%的拮抗病原菌PDA培養(yǎng)基,混合后的活菌數(shù)大于或等于2X IO9,其生產(chǎn)的最適溫度為26-28°C, pH7. 0-7. 2。所述的方法，所述的培養(yǎng)基為(I)解磷菌 Pikovskaya’ s 培養(yǎng)基葡萄糖 10. 0g, (NH4)2SO4 O. 5g, NaCl O. 3g,MgSO4 · 7H20 O. 3g, KCl 0. 3g, FeSO4 · 7H20 0. 03g, MnSO4 · 4H20 0. 03g, Ca3(PO4)2 5. Og, dH20IOOOmL, pH7. 0 ；(2)固氮菌 Ashby 培養(yǎng)基=KH2PO4 0. 2g, MgSO4 · 7H20 0. 2g, NaCl 0. 2g,甘露醇10. Og, CaSO4 · 7H20 0. lg, dH20 IOOOmL, pH7. 0 ；(3)產(chǎn) IAA 培養(yǎng)基(NH4)2SO4 6. 6g, KH2PO4 6. 8g, MgSO4 · 7H20 0. 6g, K2HPO4 8. 7g葡萄糖 10. Og, L-Trp 0. 5g, dH20 IOOOmL, pH7. 0 ； (4)拮抗病原菌PDA培養(yǎng)基馬鈴薯200g，葡萄糖20g，dH20 IOOOmL, pH自然。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明的肥料由多種植物根際有益菌組成，將本發(fā)明制備的菌肥施用到土壤中以后，增加了土壤N、P、K的轉(zhuǎn)化，有效解決土壤板結(jié)，改善土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)，增加有益微生物含量和土壤有效氮、磷和有機(jī)質(zhì)含量，防止土壤酸化、鹽潰化；微生物通過代謝作用產(chǎn)生的IAA可以刺激作物的生長，具有明顯的增產(chǎn)作用；同時(shí)加入的抗病菌可以明顯拮抗一些病原菌，從而減少了植物病害的發(fā)生，并具有一定的抗病、促生和防倒伏能力，是生產(chǎn)有機(jī)農(nóng)產(chǎn)品的有效肥料。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。實(shí)施例I :菌肥的具體配制方法本發(fā)明所涉及的4種微生物菌株來源如下解憐菌(Bacillusmegaterium, CGMCC No. 4296)；固氮菌(Azotobacterbei jerinckii, DSM No. 373)；產(chǎn)IAA 菌(Paenibacillus po lymyxa, CGMCC No. 3044)；抗病菌(Paracoccussphaerophysae, ACCC 05413T)；各類菌株培養(yǎng)基具體配方如下(I)解磷菌 Pikovskaya’ s 培養(yǎng)基葡萄糖 10. 0g, (NH4)2SO4 0. 5g, NaCl 0. 3g,MgSO4 · 7H20 0. 3g, KCl 0. 3g, FeSO4 · 7H20 0. 03g, MnSO4 · 4H20 0. 03g, Ca3(PO4)2 5. Og, dH20IOOOmL, pH7. 0 ；(2)固氮菌 Ashby 培養(yǎng)基=KH2PO4 0. 2g, MgSO4 · 7H20 0. 2g, NaCl 0. 2g,甘露醇
10.Og, CaSO4 · 7H20 0. lg, dH20 IOOOmL, pH7. 0 ；(3)產(chǎn) IAA 培養(yǎng)基(NH4) 2S04 6 . 6g，KH2PO4 6. 8g，MgSO4 · 7H20 0. 6g，K2HP048. 7g 葡萄糖 10. Og, L-Trp 0. 5g, dH20 IOOOmL, pH7. 0 ；(4)拮抗病原菌PDA培養(yǎng)基馬鈴薯200g，葡萄糖20g，dH20 IOOOmL, pH自然。將上述4種微生物菌株在各自的液體培養(yǎng)基培養(yǎng)24h (解磷菌用Pikovskaya’s培養(yǎng)基；固氮菌用Ashby培養(yǎng)基；產(chǎn)IAA菌用產(chǎn)IAA培養(yǎng)基；拮抗病原菌用PDA培養(yǎng)基)，待其活菌數(shù)量達(dá)到IO9個(gè)后，將培養(yǎng)的各菌株培養(yǎng)物按如下體積百分比例混合解憐菌(Bacillusmegaterium, CGMCC No. 4296)30%固氮菌(Azotobacterbei jerinckii, DSM No. 373)30%產(chǎn)IAA 菌(Paenibacillus po lymyxa, CGMCC No. 3044) 20%措抗病原菌(Paracoccussphaerophysae, ACCC 05413T) 20%混合以后的混合液，按照混合液總體積的百分比例計(jì)，在上述復(fù)合菌株中分別加入5%的產(chǎn)IAA培養(yǎng)基、5%的Pikovskaya’s培養(yǎng)基、5%的Ashby培養(yǎng)基和5%的PDA培養(yǎng) 基，混合后的活菌數(shù)大于或等于2 X 109，其生產(chǎn)的最適溫度為26-28°C，pH7. 0-7. 2。選擇地力、管理、長勢一致的地塊，其面積為200m2。對照噴施清水，處理和對照小區(qū)間設(shè)置保護(hù)行，小區(qū)采用長方形，隨即排列，重復(fù)4次，每個(gè)重復(fù)30m2，并實(shí)行單灌單排。用水將新型多元復(fù)合微生物菌肥按照體積倍數(shù)稀釋300倍，制成復(fù)合微生物菌肥稀釋液，將玉米種子(當(dāng)?shù)刂髟院屯茝V品種)與該稀釋液按照10 I的重量比接種，并混拌均勻，或按種子微生物菌肥為10 I的重量比噴濕玉米種子，待玉米種子陰干后播種，也可以按每畝施用30kg稀釋液的用量將稀釋液均勻噴施在玉米葉片上，苗期每隔10天噴施I次，連續(xù)噴2次，處理33d后，對玉米的促生效果在株高、根長、莖長和莖平均直徑、生物量(鮮重和干重)方面與不施菌肥而噴灑清水的對照相比較，分別增加了 22. 96%,44. 78%,56. 35%,49. 54%,56. 54%和 47. 07%。具體結(jié)果見表 I。
表I田間小區(qū)試驗(yàn)中各試驗(yàn)組及對照組玉米的形態(tài)學(xué)參數(shù)
權(quán)利要求
1.一種多兀復(fù)合微生物菌肥的制備方法,其特征在于，將4種微生物菌株在各自的液體培養(yǎng)基培養(yǎng)24h，待其活菌數(shù)量達(dá)到IO9個(gè)后，將培養(yǎng)的各菌株培養(yǎng)物按如下體積百分比例混合 解憐菌(Bacillus megaterium, CGMCC No. 4296)30% ； 固氮菌(Azotobacter bei jerinckii, DSM No. 373)30% ； 產(chǎn) IAA 菌(Paenibacillus polymyxa, CGMCC No. 3044)20% ； 措抗病原菌(Paracoccus sphaerophysae, ACCC 05413T) 20% ； 混合后的混合液，按照混合液總體積的百分比例計(jì)，在上述復(fù)合菌株中分別加入5%的產(chǎn)IAA培養(yǎng)基、5%的解磷菌Pikovskaya’ s培養(yǎng)基、5%的固氮菌Ashby培養(yǎng)基和5%的拮抗病原菌PDA培養(yǎng)基，混合后的活菌數(shù)大于或等于2X109，其生產(chǎn)的最適溫度為26-28°C，ρΗ7· 0-7. 2。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基為 (1)解磷菌Pikovskaya’ s 培養(yǎng)基葡萄糖 10. Og, (NH4)2SO4 O. 5g, NaCl O. 3g,MgSO4 · 7H20 O. 3g, KCl 0. 3g, FeSO4 · 7H20 0. 03g, MnSO4 · 4H20 0. 03g, Ca3(PO4)2 5. Og, dH20IOOOmL, pH7. 0 ；(2)固氮菌Ashby 培養(yǎng)基=KH2PO4 0. 2g, MgSO4 · 7H20 0. 2g, NaCl 0. 2g，甘露醇 10. Og,CaSO4 · 7H20 0. lg, dH20 IOOOmL, pH7. 0 ；(3)產(chǎn)IAA 培養(yǎng)基(NH4)2SO4 6. 6g，KH2PO4 6. 8g，MgSO4 · 7H20 0. 6g，K2HPO4 8. 7g 葡萄糖 10. Og, L-Trp 0. 5g, dH20 IOOOmL, pH7. 0 ； (4)拮抗病原菌PDA培養(yǎng)基馬鈴薯200g，葡萄糖20g，dH20IOOOmL, pH自然。
3.按照權(quán)利要求I所述方法制備的多元復(fù)合微生物菌肥。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種多元復(fù)合微生物菌肥及其制備方法，將4種微生物菌株在各自的液體培養(yǎng)基培養(yǎng)24h，待其活菌數(shù)量達(dá)到109個(gè)后，將培養(yǎng)的各菌株培養(yǎng)物按如下體積百分比例混合解磷菌(Bacillus megaterium，CGMCC No.4296)30％；固氮菌(Azotobacter beijerinckii，DSM No.373)30％；產(chǎn)IAA菌(Paenibacillus polymyxa，CGMCC No.3044)20％；拮抗病原菌(Paracoccus sphaerophysae，ACCC 05413T)20％；混合后的混合液，按照混合液總體積的百分比例計(jì)，在上述復(fù)合菌株中分別加入5％的產(chǎn)IAA培養(yǎng)基、5％的解磷菌Pikovskaya’s培養(yǎng)基、5％的固氮菌Ashby培養(yǎng)基和5％的拮抗病原菌PDA培養(yǎng)基，混合后的活菌數(shù)大于或等于2×109，其生產(chǎn)的最適溫度為26-28℃，pH7.0-7.2。除了能為植物體提供一些可利用的有效氮、磷和IAA外，還能補(bǔ)充植物根際、根圍和根表中的有益微生物數(shù)量，從而達(dá)到高效促生、防病功效。
文檔編號C05G3/00GK102826895SQ20121026960
公開日2012年12月19日 申請日期2012年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月1日
發(fā)明者鄧振山, 李軍 申請人:鄧振山, 李軍