專利名稱：藥用猴頭菌菌絲體液體深層發(fā)酵培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微生物培育技術(shù)領(lǐng)域，尤其是藥用猴頭菌菌絲體的培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
猴頭菌，是因?yàn)槠渥訉?shí)體形狀酷似小猴子的頭而得名，是一種兼有食用和藥用價(jià)值的名貴食用菌，性平、味甘，能利五臟、助消化，滋補(bǔ)、抗癌，治療神經(jīng)衰弱，用于治療消化不良、胃潰瘍、食道癌、胃癌、十二指腸癌、噴門癌等消化系統(tǒng)的疾病與腫瘤。目前猴頭菌已成功應(yīng)用于現(xiàn)有產(chǎn)品中，如市售的猴頭健胃靈膠囊，其中猴頭菌是該產(chǎn)品的主要成份。
目前猴頭菌的生產(chǎn)途徑主要有三種1、人工栽培，優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單易行，成本低；缺點(diǎn)是栽培周期長(zhǎng)，約3個(gè)月；2、固體發(fā)酵，用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)猴頭菌菌絲體，以獲得次生代謝產(chǎn)物，其優(yōu)點(diǎn)是培養(yǎng)基簡(jiǎn)單且來(lái)源廣泛，價(jià)格便宜；發(fā)酵過(guò)程一般不需要嚴(yán)格的無(wú)菌操作；培養(yǎng)過(guò)程供氧和溫度可采用直接空氣強(qiáng)制通風(fēng)來(lái)控制；發(fā)酵殘?jiān)奶幚砗?jiǎn)單，直接作為飼料或肥料；缺點(diǎn)是培養(yǎng)基水分活度低，培養(yǎng)基不均勻且不易攪拌，菌體的生長(zhǎng)、對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的分泌都不均勻，使得發(fā)酵參數(shù)的監(jiān)測(cè)和控制困難，因此連續(xù)操作和自動(dòng)化很困難；微生物呼吸和代謝所產(chǎn)生的熱量的溫度控制非常困難；采用固態(tài)培養(yǎng)大多基于經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù)和操作經(jīng)驗(yàn)，易污染雜菌；3、液體深層發(fā)酵，以獲得最佳操作條件在較短時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)大量的菌絲體和代謝產(chǎn)物，優(yōu)點(diǎn)是可以進(jìn)行工業(yè)化連續(xù)生產(chǎn)，培養(yǎng)原料來(lái)源廣泛，通過(guò)控制發(fā)酵裝置達(dá)到最佳培養(yǎng)條件，以獲取周期短效率高；缺點(diǎn)是周期還是較長(zhǎng)，且菌絲體的生產(chǎn)量低，難以形成大規(guī)模應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提出一種藥用猴頭菌菌絲體液體深層發(fā)酵培養(yǎng)方法，該方法能生產(chǎn)出質(zhì)量更好的藥用猴頭菌菌絲體，方法更為完善。為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案一種藥用猴頭菌菌絲體的培養(yǎng)方法，包括以下步驟下述物質(zhì)的百分?jǐn)?shù)均為重量百分?jǐn)?shù)，(I).菌種的優(yōu)化篩選及子實(shí)體分離采選中條山原始森林中的野生猴頭菇中生長(zhǎng)強(qiáng)壯、發(fā)育良好、沒(méi)有病蟲(chóng)害、種子沒(méi)散落的子實(shí)體；在接種室100級(jí)以上超凈工作臺(tái)內(nèi)，將猴頭菇子實(shí)體浸入75%的酒精中消毒I 2分鐘，取出后用蒸餾水沖洗干凈，再用消毒紗布擦干，將子實(shí)體放在培養(yǎng)皿上，用鐘形罩或類似用具覆蓋，室溫保持在20°C，使子實(shí)體緩慢生長(zhǎng)，過(guò)2 3天后，種子即散出來(lái)，落入培養(yǎng)皿中，然后用鑷子蘸取落下的種子，用劃線法接種于試管的斜面上培養(yǎng)，在22 25°C下培養(yǎng)4 5天種子即會(huì)萌發(fā)，待菌絲基本長(zhǎng)滿斜面時(shí)，選擇色白、基內(nèi)菌絲發(fā)達(dá)粗壯，菌束明顯的即優(yōu)良菌種，置入搖床瓶接種備用；培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基組成如下麥芽糖I ~ 3%
蛋白胨1~3%
瓊脂2 ~ 3. 5%
硫酸慶大霉素I ~ 3%
碳酸轉(zhuǎn)I ~ 3%
黃豆粉2 ~ 5%
玉米棒I ~ 3%
木屑I ~ 3%
甘草藥渣5~10%
延胡索藥渣5~10%
棉籽殼2 ~ 5%加入余量的水，pH值6 7. 5，118 121°C滅菌25 30分鐘；(2).菌種的培養(yǎng)2. I配制培養(yǎng)基
玉米粉5-10%
黃豆粉3 ~ 5%
葡萄糖O. 5 - 1%
硫酸鎂O. 01 ~ O. 05%
磷酸ニ氫鉀O. 01 ~ O. 05%
蛋白胨O. 5~1%
麥芽糖I ~ 3%
硫酸慶大霉素I ~ 3%加入余量的水，pH為6 7. 5，118 121°C滅菌28 32分鐘；2. 2接種前，接種ロ應(yīng)先用常規(guī)方法消毒，即用75%酒精浸泡過(guò)的脫脂棉球擦試，后開(kāi)啟臭氧發(fā)生器，使其出風(fēng)ロ始終對(duì)著接種ロ，在接種ロ周圍形成ー個(gè)局部無(wú)菌區(qū)，然后用消過(guò)毒的無(wú)毒橡膠管套于接種管口上，將經(jīng)過(guò)孢子分離的搖床瓶菌種接入罐內(nèi)，接種量為9% 11%，全部過(guò)程均在無(wú)菌條件下進(jìn)行，接種后開(kāi)攪拌機(jī)，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，恒溫25°C，培養(yǎng)3 4天；鏡檢菌絲呈樹(shù)枝狀，無(wú)雜菌，外觀有白球狀；(3).液體深層培養(yǎng)
3. I種子罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成
土豆浸取液10-15%
紅糖3 ~ 5%
玉米漿I ~ 3%
豆?jié){I ~ 3%
硫酸鎂0.05~1%
嶙酸二氫鉀O. 05 ~ 1%
硫酸慶大霉素I ~ 3%
碳酸釣I ~ 3%加入余量的水，118 121°C滅菌28 32分鐘；將步驟(2)培養(yǎng)好的菌種接種至種子罐，25 27°C，培養(yǎng)3 4天，至結(jié)果為①·鏡檢菌絲呈樹(shù)枝狀，無(wú)雜菌；②.外觀液體中有較多白球狀粒；3. 2 二級(jí)罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成
麩皮5~10%
谷糠I ~ 3%
玉米面I ~ 3% 甘草藥渣1~3%
延胡索藥渣 1~3%
玉米棒I ~ 3%
稀軒殼I ~ 3%
木屑2~5%加入余量的水，118 121°C滅菌28 32分鐘，將步驟3. 2培養(yǎng)好的菌種接種至二級(jí)罐，25 27°C，培養(yǎng)2 3天；3. 3三級(jí)罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成麩皮 10-20%
谷糠 5-10%
玉米面 2 ~ 5%
黃豆粉 2 ~ 5%
甘草藥渣2~5%
棉籽殼 I ~ 5% 加入余量的水，118 121°C滅菌28 32分鐘，將步驟3. 3培養(yǎng)好的菌種接種至三級(jí)罐，25 27°C培養(yǎng)3 4天，至培養(yǎng)液呈棕色，充滿菌絲，pH值4. 5左右，殘?zhí)荗. 2%左右，即得到猴頭菌絲體。優(yōu)選的，三級(jí)罐得到的猴頭菌絲體，用8 10米的噴霧干燥塔，118 121°C噴霧干燥，得猴頭菌粉。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明選用由中條山原始森林中的野生猴頭菇經(jīng)多年優(yōu)化改良而培養(yǎng)成的特殊藥用白猴菌種，采用液體深層發(fā)酵培養(yǎng)方法。本發(fā)明采用全封閉液體深層發(fā)酵技術(shù)培養(yǎng)猴頭菌絲，與傳統(tǒng)人工固體培養(yǎng)法相比，不但實(shí)現(xiàn)了猴頭菌絲的生產(chǎn)由手工培養(yǎng)向標(biāo)準(zhǔn)化、工業(yè)化生產(chǎn)的突破，而且生產(chǎn)周期由傳統(tǒng)培養(yǎng)方法的52天縮短為14天，節(jié)能降耗30%，生產(chǎn)成本降低70%。以此方法生產(chǎn)的猴頭菌除含多糖多肽外，尚還含有五種異“ β -D-葡聚糖”，同葡萄糖、甘露醇和半乳糖等多種糖類結(jié)合，免疫活性高，有一定的抗癌作用，含有維生素Α、維生素Ε、維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B12、維生素C等七種維生素，含有纖維素酶、半纖維素酶、淀粉酶、愈創(chuàng)木酚酶和多酚氧化酶等活性纖維素酶，并含有亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、賴氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、精氨酸、丙氨酸、天門冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、脯氨酸、酪氨酸、甘氨酸、絲氨酸等18種氨基酸及人體必需的微量元素等，其中藥用價(jià)值較大的胱氨酸、組氨酸、精氨酸含量較多，氨基酸鑒別6 7個(gè)點(diǎn)、蛋白含量16. 65%，分別是其它猴頭菌的3倍和I. 8倍。通過(guò)紅外光譜檢測(cè)還證實(shí)，除含有羥基氨化合物外，還含有一種一般猴頭中沒(méi)有的特殊抗癌有機(jī)酸。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述，本部分的描述僅是示范性和解釋性，不應(yīng)對(duì)本發(fā)明的保護(hù)范圍有任何的限制作用。實(shí)施例I一種藥用猴頭菌菌絲體液體深層發(fā)酵培養(yǎng)方法，包括以下步驟下述物質(zhì)的百分?jǐn)?shù)均為重量百分?jǐn)?shù)，(I).菌種的優(yōu)化篩選及子實(shí)體分離采選中條山原始森林中的野生猴頭菇中生長(zhǎng)強(qiáng)壯、發(fā)育良好、沒(méi)有病蟲(chóng)害、種子沒(méi)散落的子實(shí)體；在接種室100級(jí)以上超凈工作臺(tái)內(nèi)，將猴頭菇子實(shí)體浸入75%的酒精中消毒2分鐘，取出后用蒸餾水沖洗干凈，再用消毒紗布擦干，將子實(shí)體放在培養(yǎng)皿上，用鐘形罩或類似用具覆蓋，室溫保持在20°C，使子實(shí)體緩慢生長(zhǎng)，過(guò)2天后，種子即散出來(lái)，落入培養(yǎng)皿中，然后用鑷子蘸取落下的種子，用劃線法接種于試管的斜面上培養(yǎng)，在25°C下培養(yǎng)4天種子即會(huì)萌發(fā)，待菌絲基本長(zhǎng)滿斜面時(shí)，選擇色白、基內(nèi)菌絲發(fā)達(dá)粗壯，菌束明顯的即優(yōu)良菌種，置入搖床瓶接種備用；培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基組成如下
麥芽糖1%
蛋白胨1%
瓊脂2%
硫酸慶大霉素1%
碳酸鈣1%
黃豆粉2%
玉米棒1%
木屑1%
甘草藥渣5%
棉籽殼2%加入余量的水，pH自然，121°C滅菌30分鐘；(2).菌種的培養(yǎng)2. I配制培養(yǎng)基
玉米粉(60目)5%
黃豆粉(60目)3%
葡萄糖0.5%
硫酸鎂O. 01%
磷酸ニ氫鉀O. 01%
蛋白胨O. 5%
麥芽糖1%
硫酸慶大霉素1%加入余量的水，pH自然，121°C滅菌30分鐘；
2. 2接種前，接種ロ應(yīng)先用常規(guī)方法消毒，即用75%酒精浸泡過(guò)的脫脂棉球擦試，后開(kāi)啟臭氧發(fā)生器，使其出風(fēng)ロ始終對(duì)著接種ロ，在接種ロ周圍形成ー個(gè)局部無(wú)菌區(qū)，然后用消過(guò)毒的無(wú)毒橡膠管套于接種管口上，將經(jīng)過(guò)孢子分離的搖床瓶菌種接入罐內(nèi)，接種量為10%，全部過(guò)程均在無(wú)菌條件下進(jìn)行，接種后開(kāi)攪拌機(jī)，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，恒溫25°C，培養(yǎng)4天；鏡檢菌絲呈樹(shù)枝狀，無(wú)雜菌，外觀有白球狀；(3).液體深層培養(yǎng)3. I種子罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成
土豆浸取液 10%
紅糖 3%
玉米漿 1%
豆?jié){ 1%
硫酸鎂 0.05%
璘酸ニ氫鉀 O. 05%
疏酸慶大霉素 1%
碳酸Φ51%加入余量的水，121°C滅菌30分鐘；將步驟(2)培養(yǎng)好的菌種接種至種子罐，26°C培養(yǎng)3天，至結(jié)果為①.鏡檢菌絲呈樹(shù)枝狀，無(wú)雜菌；②.外觀液體中有較多白球狀粒；3. 2 ニ級(jí)罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成
麩皮 5% (60目)
谷糠 1% (60目)
玉米面 1% (60目)
甘草藥渣 1%
延胡索藥渣1%
玉米棒 1%
棉籽殼 1%
木屑Th
加入余量的水，121 °C滅菌30分鐘，將步驟3. 2培養(yǎng)好的菌種接種至二級(jí)罐，27°C，
培養(yǎng)2天；3. 3三級(jí)罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成
麩皮 10% (60目)
谷糠 5% (60目)
玉米面 η 黃豆粉 Th 甘草藥渣2%
棉籽殼 2%加入余量的水，121°C滅菌30分鐘，將步驟3. 3培養(yǎng)好的菌種接種至三級(jí)罐，25°C培養(yǎng)4天，至培養(yǎng)液呈棕色，充滿菌絲，pH值4. 5左右，殘?zhí)荗. 2%左右，即得到猴頭菌絲體。三級(jí)罐得到的猴頭菌絲體，用10米的噴霧干燥塔，120°C噴霧干燥，得猴頭菌粉。實(shí)施例2一種藥用猴頭菌菌絲體液體深層發(fā)酵培養(yǎng)方法，包括以下步驟下述物質(zhì)的百分?jǐn)?shù)均為重量百分?jǐn)?shù)，(I).菌種的優(yōu)化篩選及子實(shí)體分離采選中條山原始森林中的野生猴頭菇中生長(zhǎng)強(qiáng)壯、發(fā)育良好、沒(méi)有病蟲(chóng)害、種子沒(méi)散落的子實(shí)體；在接種室100級(jí)以上超凈工作臺(tái)內(nèi)，將猴頭菇子實(shí)體浸入75%的酒精中消毒I分鐘，取出后用蒸餾水沖洗干凈，再用消毒紗布擦干，將子實(shí)體放在培養(yǎng)皿上，用鐘形罩或類似用具覆蓋，室溫保持在20°C，使子實(shí)體緩慢生長(zhǎng)，過(guò)3天后，種子即散出來(lái)，落入培養(yǎng)皿中，然后用鑷子蘸取落下的種子，用劃線法接種于試管的斜面上培養(yǎng)，在22°C下培養(yǎng)5天種子即會(huì)萌發(fā)，待菌絲基本長(zhǎng)滿斜面時(shí)，選擇色白、基內(nèi)菌絲發(fā)達(dá)粗壯，菌束明顯的即優(yōu)良菌種，置入搖床瓶接種備用；培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基組成如下麥芽糖1%
蛋白胨3%
瓊脂2%
硫酸慶大霉素3%
碳酸鈣1%
黃豆粉5%
玉米棒1%
木屑3%
甘草藥渣5%
延胡索藥渣10%
棉籽殼2%加入余量的水，pH值7. 5，118°C滅菌30分鐘；(2).菌種的培養(yǎng)2. I配制培養(yǎng)基
玉米粉5%
黃豆粉5%
葡萄糖0.5%
硫酸鎂O. 05%
磷酸ニ氫鉀O. 01%
蛋白胨1%
麥芽糖1%
硫酸慶大霉素3%加入余量的水，pH為6，121°C滅菌28分鐘；2. 2接種前，接種ロ應(yīng)先用常規(guī)方法消毒，即用75%酒精浸泡過(guò)的脫脂棉球擦試，
后開(kāi)啟臭氧發(fā)生器，使其出風(fēng)ロ始終對(duì)著接種ロ，在接種ロ周圍形成ー個(gè)局部無(wú)菌區(qū)，然后
用消過(guò)毒的無(wú)毒橡膠管套于接種管口上，將經(jīng)過(guò)孢子分離的搖床瓶菌種接入罐內(nèi)，接種量
為11 %，全部過(guò)程均在無(wú)菌條件下進(jìn)行，接種后開(kāi)攪拌機(jī)，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，恒溫25°C，
培養(yǎng)3天；鏡檢菌絲呈樹(shù)枝狀，無(wú)雜菌，外觀有白球狀；(3).液體深層培養(yǎng)
3. I種子罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成
土豆浸取液10%
紅糖5%
玉米漿1%
豆?jié){3%
硫酸鎂0.05% 嶙酸二氫鉀1%
硫酸慶大霉素1%
碳酸鈣3%加入余量的水，118°C滅菌32分鐘；將步驟(2)培養(yǎng)好的菌種接種至種子罐，27°C，培養(yǎng)3天，至結(jié)果為①.鏡檢菌絲呈樹(shù)枝狀，無(wú)雜菌；②.外觀液體中有較多白球狀粒；3. 2 二級(jí)罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成
麩皮10%
谷糠1%
玉米面3%
甘草藥渣1%
延胡索藥渣 3%
玉米棒1%
棉籽殼3%
木屑2%加入余量的水，121°C滅菌28分鐘，將步驟3. 2培養(yǎng)好的菌種接種至二級(jí)罐，25°C，
培養(yǎng)3天；3. 3三級(jí)罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成麩皮 10%
谷糠 10%
玉米面 2%
黃豆粉 5%
甘草藥渣2%
棉籽殼 5%加入余量的水，118°C滅菌32分鐘，將步驟3. 3培養(yǎng)好的菌種接種至三級(jí)罐，26°C 培養(yǎng)3天，至培養(yǎng)液呈棕色，充滿菌絲，pH值4. 5左右，殘?zhí)荗. 2%左右，即得到猴頭菌絲體。實(shí)施例3ー種藥用猴頭菌菌絲體液體深層發(fā)酵培養(yǎng)方法，包括以下步驟下述物質(zhì)的百分?jǐn)?shù)均為重量百分?jǐn)?shù)，(I).菌種的優(yōu)化篩選及子實(shí)體分離采選中條山原始森林中的野生猴頭菇中生長(zhǎng)強(qiáng)壯、發(fā)育良好、沒(méi)有病蟲(chóng)害、種子沒(méi)散落的子實(shí)體；在接種室100級(jí)以上超凈工作臺(tái)內(nèi)，將猴頭菇子實(shí)體浸入75%的酒精中消毒2分鐘，取出后用蒸餾水沖洗干凈，再用消毒紗布擦干，將子實(shí)體放在培養(yǎng)皿上，用鐘形罩或類似用具覆蓋，室溫保持在20°C，使子實(shí)體緩慢生長(zhǎng)，過(guò)2天后，種子即散出來(lái)，落入培養(yǎng)皿中，然后用鑷子蘸取落下的種子，用劃線法接種于試管的斜面上培養(yǎng)，在25°C下培養(yǎng)4天種子即會(huì)萌發(fā)，待菌絲基本長(zhǎng)滿斜面時(shí)，選擇色白、基內(nèi)菌絲發(fā)達(dá)粗壯，菌束明顯的即優(yōu)良菌種，置入搖床瓶接種備用；培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基組成如下麥芽糖3%
蛋白胨1%
瓊脂3.5%
硫酸慶大霉素1%
碳酸鈣3%
黃豆粉2%
玉米棒3%
木屑1%
甘草藥渣10%
延胡索藥渣5%
棉籽殼5%加入余量的水，pH值6，121°C滅菌25分鐘；(2).菌種的培養(yǎng)2. I配制培養(yǎng)基
玉米粉10%
黃豆粉3%
葡萄糖1%
硫酸鎂O. 01%
磷酸二氫鉀O. 05%
蛋白胨0.5%
麥芽糖3%
硫酸慶大霉素1%加入余量的水，pH為7.5，121°C滅菌28分鐘；2. 2接種前，接種口應(yīng)先用常規(guī)方法消毒，即用75%酒精浸泡過(guò)的脫脂棉球擦試，
后開(kāi)啟臭氧發(fā)生器，使其出風(fēng)口始終對(duì)著接種口，在接種口周圍形成一個(gè)局部無(wú)菌區(qū)，然后
用消過(guò)毒的無(wú)毒橡膠管套于接種管口上，將經(jīng)過(guò)孢子分離的搖床瓶菌種接入罐內(nèi)，接種量
為9%，全部過(guò)程均在無(wú)菌條件下進(jìn)行，接種后開(kāi)攪拌機(jī)，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，恒溫25°C， 培養(yǎng)4天；鏡檢菌絲呈樹(shù)枝狀，無(wú)雜菌，外觀有白球狀；(3).液體深層培養(yǎng)
3.1種子罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成
土豆浸取液 15%
紅糖 3%
玉米漿 3%
豆?jié){ 1%
硫酸鎂 1%
磷酸ニ氫鉀 O. 05%
硫酸慶大霉素 3%
碳脧釣1%加入余量的水，121°C滅菌28分鐘；將步驟(2)培養(yǎng)好的菌種接種至種子罐，25°C，培養(yǎng)4天，至結(jié)果為①.鏡檢菌絲呈樹(shù)枝狀，無(wú)雜菌；②.外觀液體中有較多白球狀粒；3. 2 ニ級(jí)罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成
麩皮5%
谷糠3%
玉米面1%
甘草藥渣3%
延胡索藥渣 1%
玉米棒3%
棉籽殼1%
木屑5%加入余量的水，118°C滅菌32分，將步驟3. 2培養(yǎng)好的菌種接種至ニ級(jí)罐，27°C，培養(yǎng)2天；3. 3三級(jí)罐培養(yǎng)培養(yǎng)基為如下組成麩皮 20%
谷糠 5%
玉米面 5%
黃豆粉 2%
甘草藥渣5%
棉籽殼 2%加入余量的水，121°C滅菌28分鐘，將步驟3. 3培養(yǎng)好的菌種接種至三級(jí)罐，25°C 培養(yǎng)4天，至培養(yǎng)液呈棕色，充滿菌絲，pH值4. 5左右，殘?zhí)荗. 2%左右，即得到猴頭菌絲體。上述實(shí)施例2和實(shí)施例3所制得的猴頭菌絲體，同樣可采用如實(shí)施例I所述的干燥方式得到猴頭菌粉。檢測(cè)上述實(shí)施例I至實(shí)施例3得到的猴頭菌絲體，結(jié)果與一般食用猴頭菌相比，除含多糖多肽外，尚還含有五種異“ β -D-葡聚糖”，同葡萄糖、甘露醇和半乳糖等多種糖類結(jié)合，免疫活性高，有一定的抗癌作用，含有維生素Α、維生素Ε、維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B12、維生素C等七種維生素，含有纖維素酶、半纖維素酶、淀粉酶、愈創(chuàng)木酚酶和多酚氧化酶等活性纖維素酶，并含有亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、賴氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、精氨酸、丙氨酸、天門冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、脯氨酸、酪氨酸、甘氨酸、絲氨酸等18種氨基酸及人體必需的微量元素等，其中藥用價(jià)值較大的胱氨酸、組氨酸、精氨酸含量較多，氨基酸鑒別6 7個(gè)點(diǎn)、蛋白含量16. 65%，分別是其它猴頭菌的3倍和I. 8倍。通過(guò)紅外光譜檢測(cè)還證實(shí)，除含有羥基氨化合物外，還含有一種一般猴頭中沒(méi)有的特殊抗癌有機(jī)酸。同時(shí)上述各實(shí)施例的生產(chǎn)周期為14±2天，遠(yuǎn)比傳統(tǒng)培養(yǎng)方法的52天的周期短，節(jié)能降耗30%，生產(chǎn)成本降低70%。以上僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種藥用猴頭菌菌絲體液體深層發(fā)酵培養(yǎng)方法，包括以下步驟下述物質(zhì)的百分?jǐn)?shù)均為重量百分?jǐn)?shù)， (1).菌種的優(yōu)化篩選及子實(shí)體分離 采選中條山原始森林中的野生猴頭菇中生長(zhǎng)強(qiáng)壯、發(fā)育良好、沒(méi)有病蟲(chóng)害、種子沒(méi)散落的子實(shí)體； 在接種室100級(jí)以上超凈工作臺(tái)內(nèi)，將猴頭菇子實(shí)體浸入75%的酒精中消毒I 2分鐘，取出后用蒸餾水沖洗干凈，再用消毒紗布擦干，將子實(shí)體放在培養(yǎng)皿上，用鐘形罩或類似用具覆蓋，室溫保持在20°C，使子實(shí)體緩慢生長(zhǎng)，過(guò)2 3天后，種子即散出來(lái)，落入培養(yǎng)皿中，然后用鑷子蘸取落下的種子，用劃線法接種于試管的斜面上培養(yǎng)，在22 25°C下培養(yǎng)4 5天種子即會(huì)萌發(fā)，待菌絲基本長(zhǎng)滿斜面時(shí)，選擇色白、基內(nèi)菌絲發(fā)達(dá)粗壯，菌束明顯的即優(yōu)良菌種，置入搖床瓶接種備用； 培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基組成如下
2.如權(quán)利要求1所述培養(yǎng)方法，其特征在于三級(jí)罐得到的猴頭菌絲體，用8 10米的噴霧干燥塔，118 121°C噴霧干燥，得猴頭菌粉。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種藥用猴頭菌菌絲體液體深層發(fā)酵培養(yǎng)方法，得到的猴頭菌絲體，結(jié)果與一般食用猴頭菌相比，除含多糖多肽外，尚含五種抗癌物質(zhì)、七種維生素、三種活性纖維素酶、18種氨基酸及人體必需的微量元素等，其中藥用價(jià)值較大的胱氨酸、組氨酸、精氨酸含量較多，氨基酸鑒別6～7個(gè)點(diǎn)、蛋白含量16.65％，分別是其它猴頭菌的3倍和1.8倍。紅外光譜還證實(shí)，除含有羥基氨化合物外，還含有一種一般猴頭中沒(méi)有的特殊抗癌有機(jī)酸。與傳統(tǒng)人工固體培養(yǎng)法相比，不但實(shí)現(xiàn)了猴頭菌絲的生產(chǎn)由手工培養(yǎng)向標(biāo)準(zhǔn)化、工業(yè)化生產(chǎn)的突破，而且生產(chǎn)周期由傳統(tǒng)培養(yǎng)方法的52天縮短為14天，節(jié)能降耗30％，生產(chǎn)成本降低70％。
文檔編號(hào)C05G3/00GK102835251SQ20121033284
公開(kāi)日2012年12月26日 申請(qǐng)日期2012年9月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月11日
發(fā)明者史長(zhǎng)山, 姜存敏, 潘志明, 王俊俊 申請(qǐng)人:史長(zhǎng)山