專利名稱：一種誘導黃瓜抗根結線蟲的制劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種誘導黃瓜抗根結線蟲的制劑及其制備方法。
背景技術：
由根結線蟲(Meoidogyne spp.)引起的黃瓜根結線蟲病是一種世界性病害,病害發(fā)生時，一般每年造成10%_15%的經(jīng)濟損失，發(fā)病嚴重時經(jīng)濟損失可達30%_40%，甚至絕產(chǎn)。近年來大棚黃瓜的迅猛發(fā)展，重茬種植現(xiàn)象普遍，使得土壤中根結線蟲日益累積，為害逐年加重。對于黃瓜根結線蟲的防治，目前主要依賴于化學殺蟲劑，但其只能短期內控制線蟲的數(shù)量，同時還存在污染環(huán)境、農(nóng)產(chǎn)品殘留超標和抗藥性等弊端。因此，急需開發(fā)安全、有效的無公害生物農(nóng)藥來控制黃瓜根結線蟲的危害，同時大幅度降低化學殺蟲劑的使用量。殼聚糖是一種由幾丁質通過脫乙?；a(chǎn)的半合成衍生物。近年來發(fā)現(xiàn)殼聚糖 的水解產(chǎn)物-殼寡糖(特別是聚合度在20以下的部分)具有誘導植物產(chǎn)生免疫力、防治病蟲害、促進生長和增產(chǎn)的效果，已引起國內外科技界的高度重視，認為其具有極高的研究價值和應用價值。但現(xiàn)有的殼寡糖對植物寄生線蟲病的防治效果與化學殺蟲劑相比仍有較大差距，存在誘導強度不高的問題，從而限制了殼寡糖在黃瓜根結線蟲病防治上的應用。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種可在不使用化學殺蟲劑前提下能有效地控制黃瓜根結線蟲病的誘抗劑，以能夠誘導黃瓜產(chǎn)生對根結線蟲病抗性的殼寡糖和水楊酸鈉為激發(fā)子，進行合理的混配，互為補充，能最大限度地提高殼寡糖的誘導免疫活性、克服單用的不足，可使黃瓜獲得對根結線蟲病的持久抗性，解決了黃瓜根結線蟲無公害防治的問題，同時不會造成對土壤環(huán)境的污染。本發(fā)明的上述目的可通過以下技術方案得以實現(xiàn)。本發(fā)明的一種誘導黃瓜抗根結線蟲的制劑，它是由殼寡糖溶液和水楊酸鈉配制而成，其中殼寡糖和水楊酸鈉的重量比例為10 100 :1 10。本發(fā)明制劑的制備方法如下
I、殼聚糖酶發(fā)酵液的制備以下列成分及按重量百分比配制液體培養(yǎng)基殼聚糖0. 5%-2%、酵母提取物0. 01-0. 1%、NH4Cl O. 05-0. 2%、葡萄糖0. 05-0. 2%、KH2PO4
O.05-0. 2%、MgSO4 · 7H20 0. 05-0. 2%、MnSO4 :0. 05-0. 2%、其余為水，pH 自然，121°C滅菌 30分鐘，按3%-10%接種量接種產(chǎn)殼聚糖酶的擬青霉屬真菌iPaecilomyces sp.),在28°C條件下培養(yǎng)2天，板框過濾發(fā)酵液，濾液為殼聚糖酶發(fā)酵液；
2、殼寡糖溶液的制備以1%_3%的冰乙酸溶液為溶劑，配制3%-8%的殼聚糖溶液100L,攪拌下加入殼聚糖酶發(fā)酵液1-4L，在40°C _60°C下攪拌反應2_5h，板框過濾得殼寡糖溶液，其中殼寡糖的平均分子量為2000-10000 ；
3、取步驟(2)殼寡糖溶液O.6-0. 8L，與濃度為O. 25%的水楊酸鈉溶液O. 2-0. 4L攪拌混合均勻，得到誘導黃瓜抗根結線蟲的制劑。
本發(fā)明的制劑為天然來源的，對動物和農(nóng)作物無毒性的分子量范圍為2000-10000
的殼寡糖和無植物毒性的水楊酸鈉的農(nóng)用組合物，具有促進黃瓜根的生長，生態(tài)修復土壤，防治黃瓜根結線蟲作用。
具體實施例方式下面將通過實施例對本發(fā)明作進一步地說明。其制備方法如下
I、殼聚糖酶發(fā)酵液的制備以下列成分及按重量百分比配制液體培養(yǎng)基殼聚糖15g、酵母提取物0. 5g、NH4Cl 1. 5g、葡萄糖:1. 0g、KH2P04 :1. 0g、MgS04 · 7H20 :0. 5g、MnS04 0.5g、水980g，pH自然，121°C滅菌30分鐘，按3%_10%接種量接種產(chǎn)殼聚糖酶的擬青霉屬真菌iPaecilomyces sp.)，在28°C條件下培養(yǎng)2天，板框過濾發(fā)酵液,濾液為殼聚糖酶發(fā)酵液；
2、殼寡糖溶液的制備以I. 5%的冰乙酸溶液為溶劑，配制濃度為4%的殼聚糖溶液100L，攪拌下加入殼聚糖酶發(fā)酵液2L，50°C下攪拌反應3h，板框過濾得殼寡糖溶液，殼寡糖溶液中含有少量NH4C1、KH2P04、MgSO4和MnSO4物質，這些物質對植物生長無害而有益，這些物質不需要分離；
3、誘導黃瓜抗根結線蟲的制劑的制備取上述殼寡糖溶液O. 6L，與濃度為O. 25%的水楊酸鈉溶液O. 4L攪拌混合均勻，即得到誘導黃瓜抗根結線蟲的制劑。為了說明本發(fā)明的效果，并對黃瓜根結線蟲的誘抗效果進行了對照檢測
選擇河北科技師范學院生命科技學院農(nóng)場根結線蟲發(fā)病嚴重的蔬菜溫室大棚，種植黃
瓜品種為大葉三(遼寧省新民市金明蔬菜種子站生產(chǎn))。實驗采用隨機區(qū)組試驗，共設三個區(qū)組，每個區(qū)組設4個小區(qū)(處理)，每個小區(qū)的面積為20平方米。在黃瓜移栽7天后，將供試藥劑采用灌根處理的方法，試驗期間采用常規(guī)方法進行黃瓜管理。施藥后60天，挖出黃瓜的根，統(tǒng)計各處理各重復中各級(0-10級)病株數(shù)目，計算病情指數(shù)及防治效果，結果見下表。結果表明，使用本發(fā)明的制劑后對黃瓜上的根結線蟲有一定程度的誘抗效果，與空白對照相比能夠顯著降低根結線蟲的危害，防治效果與目前生產(chǎn)上常規(guī)藥劑阿維菌素相當。根結線蟲分級調查指標0級代表沒有根結；I級代表1-10%的根上有根結；2級代表11-20%的根上有根結；3級代表21-30%的根上有根結；4級代表31-40%的根上有根結；5級代表41-50%的根上有根結；6級代表51-60%的根上有根結；7級代表61-80%的根上有根結；8級代表71-80%的根上有根結；9級代表81-90%的根上有根結；10級代表91-100%的根上有根結。病情指數(shù)=IOOX Σ (各級病株數(shù)X各級代表值)/調查總株數(shù)X最高代表值； 誘抗效果=100%X (空白對照的病情指數(shù)-處理后的病情指數(shù))/空白對照的病情指
數(shù)；
各處理及藥劑如下
處理I :不施任何藥劑(空白對照)
處理2 :本實施例的制劑I :500倍稀釋，每株用200ml ；
處理3 :本實施例的制劑I :1000倍稀釋，每株用200ml ；
處理4 :1. 8%阿維菌素乳油I 1000倍稀釋，每株用200ml ；處理I病情指數(shù)I防治效果(％)
處理I (空白對照)_92.7 + 3.1 —_
^Ell 2 (本實施例制劑 I :500)23. 4±4. 3 74. 8
3 (本實施例制劑 I :1000) 32. 3 ±2. 6 65. 2 M 4 (對照藥劑阿維菌素)|26·0±4·8 |71.9
注表中數(shù)值為各重復的平均值。
權利要求
1.一種誘導黃瓜抗根結線蟲的制劑，其特征是由殼寡糖溶液和水楊酸鈉配制而成，其中殼寡糖和水楊酸鈉的重量比例為10 100 :1 10。
2.根據(jù)權利要求I所述的誘導黃瓜抗根結線蟲的制劑，其特征是，其中，水楊酸鈉濃度為 O. 05% O. 1%。
3.一種用于權利要求I的制備方法，其制備方法是 (O殼聚糖酶發(fā)酵液的制備以下列成分及按重量百分比配制液體培養(yǎng)基殼聚糖0. 5%-2%、酵母提取物0. 01-0. 1%、NH4Cl O. 05-0. 2%、葡萄糖0. 05-0. 2%、KH2PO4 O.05-0. 2%、MgSO4 · 7H20 0. 05-0. 2%、MnSO4 :0. 05-0. 2%、其余為水，pH 自然，121°C滅菌 30分鐘，按3%-10%接種量接種產(chǎn)殼聚糖酶的擬青霉屬真菌，在28°C條件下培養(yǎng)2天，板框過濾 發(fā)酵液，濾液為殼聚糖酶發(fā)酵液； (2)殼寡糖溶液的制備以1%_3%的冰乙酸溶液為溶劑，配制3%-8%的殼聚糖溶液100L,攪拌下加入殼聚糖酶發(fā)酵液1-4L，在40°C _60°C下攪拌反應2_5h，板框過濾得殼寡糖溶液； (3)取步驟(2)殼寡糖溶液O. 6-0. 8L，與濃度為O. 25%的水楊酸鈉溶液O. 2-0. 4L攪拌混合均勻，得到誘導黃瓜抗根結線蟲的制劑。
全文摘要
一種誘導黃瓜抗根結線蟲的制劑，其特征是由殼寡糖溶液和水楊酸鈉配制而成，其中殼寡糖和水楊酸鈉的重量比例為10～1001～10。制備時以殼聚糖、酵母提取物、NH4Cl、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4·7H2O、MnSO4、水為培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)能生產(chǎn)殼聚糖酶的真菌，制備含有殼聚糖酶的發(fā)酵液，用此發(fā)酵液酶解殼聚糖獲得殼寡糖溶液，再與水楊酸鈉配制而成。本發(fā)明的制劑用于防治黃瓜根結線蟲，防治效果可達50%-70%，同時還能促進黃瓜根的生長，對土壤的生態(tài)修復具有顯著的作用。
文檔編號A01N43/16GK102870780SQ20121035816
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月25日 優(yōu)先權日2012年9月25日
發(fā)明者史鳳玉, 朱英波 申請人:河北科技師范學院