專利名稱：一種苜蓿雜交方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種雜交方法。
背景技術(shù)：
苜蓿是一種理 想的飼用植物，同時(shí)也是一種良好的綠肥作物。苜蓿以“牧草之王”著稱，不僅產(chǎn)量高，而且草質(zhì)優(yōu)良，各種畜禽均喜食。因此，培育優(yōu)良的苜蓿新品種對增產(chǎn)優(yōu)質(zhì)飼草發(fā)展畜牧業(yè)和提高土壤肥力均具有重要的意義。有關(guān)培育牧草新品種的方法很多，但有性雜交仍然是培育苜蓿新品種的有效方法之一，而了解苜蓿開花的生物學(xué)習(xí)性，正確掌握雜交技術(shù)，則又是雜交能否獲得成功的關(guān)鍵。苜蓿花器小、結(jié)構(gòu)特殊，人工雜交很困難，獲得的結(jié)實(shí)率低，去雄方法和授粉時(shí)間，都影響著苜蓿雜交的結(jié)實(shí)率。現(xiàn)有技術(shù)為去雄后即套袋隔離，再過一天或二天后揭開套袋進(jìn)行授粉，最后再套袋隔離任其雜交受精結(jié)實(shí)，但是反復(fù)套袋可能對柱頭造成損傷，苜蓿雜交的結(jié)實(shí)率在30%左右。因此確定最佳授粉時(shí)間是提高苜蓿雜交的結(jié)實(shí)率的關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是要解決現(xiàn)有苜蓿雜交方法獲得的苜蓿結(jié)實(shí)率低的問題，提供了一種苜蓿雜交方法。本發(fā)明的一種苜蓿雜交方法，是按以下步驟進(jìn)行的一、確定母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄去除步驟一中留下的小花的花粉；四、選取父本苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當(dāng)天對步驟一處理后的母本植株進(jìn)行授粉；五、授粉后套袋并掛上標(biāo)簽做好記錄。本發(fā)明在去雄當(dāng)天進(jìn)行授粉，減少了反復(fù)套袋對柱頭造成的損傷，并確定了授粉的最佳時(shí)間段，由此提高了苜蓿雜交的結(jié)實(shí)率，結(jié)實(shí)率最高為74. 07%，平均結(jié)實(shí)率為45. 98%。


圖I是首猜花期不意圖；圖2是試驗(yàn)I中對照組人工去雄示意圖；圖3是試驗(yàn)I中對照組的授粉示意圖；圖4是試驗(yàn)I中對照組的套袋示意圖。
具體實(shí)施例方式具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式中的一種苜蓿雜交方法，是按以下步驟進(jìn)行的一、確定母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄去除步驟一中留下的小花的花粉；四、選取父本苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當(dāng)天對步驟一處理后的母本植株進(jìn)行授粉；五、授粉后套袋并掛上標(biāo)簽做好記錄。本實(shí)施方式在去雄當(dāng)天進(jìn)行授粉，減少了反復(fù)套袋對柱頭造成的損傷，并確定了授粉的最佳時(shí)間段，由此提高了苜蓿雜交的結(jié)實(shí)率，結(jié)實(shí)率最高為74. 07%，平均結(jié)實(shí)率為45. 98%。
具體實(shí)施方式
二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是步驟四中在去雄當(dāng)天的上午十點(diǎn)到十二點(diǎn)進(jìn)行授粉。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一或二不同的是步驟四中在去雄當(dāng)天的下午兩點(diǎn)到三點(diǎn)進(jìn)行授粉。通過以下試驗(yàn)驗(yàn)證本發(fā)明的有益效果試驗(yàn)I :試驗(yàn)分為試驗(yàn)組和對照組。 花期的選擇按苜?；ɡ俚陌l(fā)育狀態(tài)將苜蓿花分為六個(gè)時(shí)期(見圖1)，其中，I期為整個(gè)花序聚在一起，各小花尚未分離時(shí)；11期為各小花分離，花瓣為花萼所包裹；ΙΠ期為花瓣已在花萼裂片間出現(xiàn)，但花瓣長度尚未超過萼片2mm ； IV期為花瓣長度已超過花萼2mm，但龍骨瓣仍被旗瓣所包裹…期為龍骨瓣已經(jīng)旗瓣腹面出現(xiàn)，旗瓣尚未向上翻轉(zhuǎn)；VI期為小花開放，旗瓣向上翻轉(zhuǎn)，龍骨瓣已由翼瓣之間露出。利用離體萌發(fā)法對苜蓿不同花期花粉生活力進(jìn)行測定，結(jié)果表明苜蓿I期到III期花，花粉均沒有生活力；從IV期開始，花粉粒具有生活力。IV期 VI期花粉粒的平均生活力為21%、32.期花粉粒開始逐漸成熟，VI期則完全成熟。因此苜蓿雜交育種中，應(yīng)選擇III期即花瓣長度不超過花萼2mm的小花進(jìn)行處理，此時(shí)花粉生活力為0，可避免在去雄過程中由于花粉粘到柱頭，發(fā)生自交現(xiàn)象，保證了雜交結(jié)實(shí)的真實(shí)性。去雄方法的選擇去雄方法分為人工去雄、溫湯去雄和化學(xué)去雄三種方法。溫湯處理0s、lmin、2min時(shí)，苜?；ǚ劬猩盍Γ謩e為46. 6%,47. 1%,45. 7% ;處理3min以上生活力為O。完全晾干后，花粉恢復(fù)一部分生活力，為34.9%?；瘜W(xué)去雄時(shí)，苜?；ǚ墼?5%乙醇處理30s下，花粉即已失去生活力；且花干后，生活力并不恢復(fù)。因此，溫湯去雄的時(shí)間應(yīng)為3min以上，化學(xué)去雄的時(shí)間為30s即可。分別運(yùn)用三種方法去雄，人工輔助授粉后套袋，雜交結(jié)實(shí)率分別為39.33 %、5. 33%、11. 33%，人工去雄所得的結(jié)實(shí)率明顯高于溫湯去雄和化學(xué)去雄兩種方法；去雄后不授粉直接套袋，雜交結(jié)實(shí)率分別為0、3. 67%、0，說明人工去雄法和化學(xué)去雄法能有效干凈的去處母本的花粉生活力，在不授粉的情況下沒有種子產(chǎn)生，證明運(yùn)用這兩種方法去雄后雜交所得的種子為真雜交種；用溫湯去雄后不授粉，直接套袋，發(fā)現(xiàn)仍有3. 67%的雜交結(jié)實(shí)率。這可能與水分全部蒸發(fā)后，一部分的花粉生活力恢復(fù)有關(guān)。操作時(shí)，恢復(fù)生活力的花粉沾到柱頭上，造成自交結(jié)實(shí)，證明運(yùn)用溫湯去雄法去雄后雜交所得的種子可能為自交種，也可能為雜交種，此法不適合。因此在苜蓿雜交育種中，人工去雄和化學(xué)去雄兩種去雄方法均可保證得到真實(shí)的雜交種子?；瘜W(xué)去雄法簡易方便，但雜交結(jié)實(shí)率比人工去雄法要低，這可能是化學(xué)藥劑對雌蕊柱頭生活力產(chǎn)生了一定的影響。因此，最適合的去雄方法為人工去雄法。試驗(yàn)組的苜蓿雜交方法，是按以下步驟進(jìn)行的一、確定肇東苜蓿為母本，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄用尖頭鑷子去除步驟一中留下的小花的花粉(見圖2);四、選取父本W(wǎng)L323HQ苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當(dāng)天8:00 17:00每I小時(shí)對步驟一處理后的母本植株的一個(gè)花絮進(jìn)行授粉(每I小時(shí)處理不同花絮)(見圖3);五、授粉后套袋并掛上標(biāo)簽做好記錄(見圖4)。對照組I的苜蓿雜交方法，是按以下步驟進(jìn)行的一、確定肇東苜蓿為母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄用尖頭鑷子去除步驟一中留下的小花的花粉；四、選取父本W(wǎng)L323HQ苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當(dāng)天8:00 17:00每I小時(shí)對步驟一處理后的母本植株的一個(gè)花絮進(jìn)行授粉(每I小時(shí)處理不同花絮)；五、授粉后套袋并掛上標(biāo)簽做好記錄。對照組2的苜蓿雜交方法，是按以下步驟進(jìn)行的一、確定肇東苜蓿為母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄用尖頭鑷子去除步驟一中留下的小花的花粉；四、選取父本W(wǎng)L323HQ苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當(dāng)天8:00 17:00每I小時(shí)對步驟一處理后的母本植株的一個(gè)花絮
進(jìn)行授粉(每I小時(shí)處理不同花絮)；五、授粉后套袋并掛上標(biāo)簽做好記錄。對試驗(yàn)組、對照組I和對照組2的結(jié)實(shí)率進(jìn)行測定，結(jié)果如表I所示，由表I可知，試驗(yàn)組的平均結(jié)實(shí)率要高于對照組I和對照組2，其中試驗(yàn)組在10:00 12:00和14:00 15:00這兩個(gè)時(shí)間段進(jìn)行授粉后結(jié)實(shí)率最高。表I結(jié)實(shí)率對照表
權(quán)利要求
1.ー種苜蓿雜交方法，其特征在于苜蓿雜交方法是按以下步驟進(jìn)行的一、確定母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；ニ、人工去雄去除步驟一中留下的小花的花粉；四、選取父本苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當(dāng)天對步驟一處理后的母本植株進(jìn)行授粉；五、授粉后套袋并掛上標(biāo)簽做好記錄。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種苜蓿雜交方法，其特征在于步驟四中在去雄當(dāng)天的上午十點(diǎn)到十二點(diǎn)進(jìn)行授粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種苜蓿雜交方法，其特征在于步驟四中在去雄當(dāng)天的下午兩點(diǎn)到三點(diǎn)進(jìn)行授粉。
全文摘要
一種苜蓿雜交方法，它涉及一種雜交方法。本發(fā)明是要解決現(xiàn)有苜蓿雜交方法獲得的苜蓿結(jié)實(shí)率低的問題。雜交方法為一、確定母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄去除留下的小花的花粉；四、選取父本苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當(dāng)天對母本進(jìn)行授粉；五、授粉后套袋并掛上標(biāo)簽做好記錄。本方法提高了苜蓿雜交的結(jié)實(shí)率，結(jié)實(shí)率最高為74.07％，平均結(jié)實(shí)率為45.98％。本發(fā)明應(yīng)用于苜蓿領(lǐng)域。
文檔編號A01H1/02GK102835307SQ201210369200
公開日2012年12月26日 申請日期2012年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月28日
發(fā)明者韓貴清, 劉鳳歧, 張?jiān)聦W(xué), 唐鳳蘭, 劉杰淋, 韓微波, 朱瑞芬 申請人:黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院草業(yè)研究所