專利名稱：歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種歐美雜種山楊組培苗生根方法。
背景技術(shù)：
歐美雜種山楊(Populustremula XP. tremuloides)是歐洲山楊(P. tremula)和北美山楊(P. tremuloides)的雜交種,具有生長(zhǎng)快、耐寒、耐貧瘠、樹形高大、適應(yīng)性強(qiáng)等特點(diǎn)，是溫寒帶山地造林的優(yōu)良樹種。此外，該雜種材質(zhì)較軟，細(xì)密，潔白，樹干端直，是造紙、 膠合板、刨花板等工業(yè)的優(yōu)質(zhì)原料。
研究表明在芬蘭，歐美山楊雜種適于山地造林，平原造林長(zhǎng)勢(shì)更好，而且其輪伐期和生長(zhǎng)速度都快于一般的山地針闊葉造林樹種。而我國北方很多地區(qū)的氣候環(huán)境要好于芬蘭，土壤肥沃，溫度高，日照長(zhǎng)，生長(zhǎng)期也長(zhǎng)，直接采用弓I進(jìn)優(yōu)良山楊雜種無性系造林，其生長(zhǎng)量更加顯著。因此，該樹種適于在我國黑龍江南部、吉林、遼寧以及華北地區(qū)種植。目前作為優(yōu)良用材樹種被許多國家廣泛引進(jìn)。中國于2000和2001年，由東北林業(yè)大學(xué)林木遺傳育種學(xué)科從芬蘭引進(jìn)歐美山楊雜種優(yōu)良無性系50個(gè)，通過組培和扦插的方法進(jìn)行大量繁殖并上山造林，目的是豐富中國的森林資源，為林業(yè)及林產(chǎn)工業(yè)帶來更大的生態(tài)和經(jīng)濟(jì)效益。
但在歐美雜種山楊無性繁殖的技術(shù)實(shí)施過程中，面臨著培養(yǎng)基成本高、生產(chǎn)周期長(zhǎng)，組培苗移栽成活率低等問題，其中以移栽不易成活的問題最為嚴(yán)重，導(dǎo)致成苗率低，育苗成本增加，嚴(yán)重影響了歐美雜種山楊大面積的推廣種植。因此，如何提高歐美雜種山楊組培苗移栽成活率以及縮短育苗周期已經(jīng)成為當(dāng)務(wù)之急。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是要解決現(xiàn)有歐美雜種山楊組織培養(yǎng)過程中存在培養(yǎng)成本高、生產(chǎn)周期長(zhǎng)，組培苗移栽成活率低的問題，提供一種歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根的方法。
本發(fā)明歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根的方法，包括以下步驟
一、將寬為17 20cm，高為10 12cm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機(jī)塑封，制作成生根培養(yǎng)袋；
二、將泥炭土和沙按體積比I 2 I混合，然后于121°C進(jìn)行高溫滅菌1.5 2 小時(shí)，得培養(yǎng)料，然后將培養(yǎng)料分裝于生根培養(yǎng)袋中，每個(gè)生根培養(yǎng)袋中培養(yǎng)料的裝入量為培養(yǎng)袋體積的1/3 ；
三、將培養(yǎng)袋中的培養(yǎng)料挖穴，穴規(guī)格為寬I. 5 2cm，深I(lǐng). 5cm，穴與穴之間間隔 2cm，然后用生根培養(yǎng)液將每個(gè)穴潤(rùn)濕，每個(gè)穴內(nèi)生根培養(yǎng)液的用量為3 5mL ;
四、將I. 5 3cm的歐美雜種山楊組培苗從培養(yǎng)基中取出，將組培苗根部的愈傷組織切除，取切除愈傷組織后的單棵組培苗栽入培養(yǎng)袋的穴中，然后將培養(yǎng)袋頂部用封口機(jī)封好，置于溫室大棚內(nèi)培養(yǎng)，光照為散射光，棚內(nèi)溫度控制在23 28°C之間，空氣相對(duì)濕度保持在60 % 70%，培養(yǎng)5 7天后，將培養(yǎng)袋頂部劃開，敞口后再培養(yǎng)8 10天，即得歐美雜種山楊生根苗；步驟三中所述的生根培養(yǎng)液為含有O. 3mg/L NAA的WPM培養(yǎng)基或含有 O. 3mg/L NAA 和 O. 05mg/L IAA 的 WPM 培養(yǎng)基。
本發(fā)明方法的優(yōu)點(diǎn)如下
I.生產(chǎn)成本低本發(fā)明方法直接將無根組培苗栽入泥炭土和沙的混合基質(zhì)中讓其生根，利用自然光照，無需人工管理，不但減少了試管內(nèi)生根需要無菌操作的工時(shí)與能源耗費(fèi)，也減少了一次培養(yǎng)基制作的材料能源與工時(shí)耗費(fèi)，可大大降低生產(chǎn)成本；
傳統(tǒng)的生根方式是在試管內(nèi)進(jìn)行(即瓶?jī)?nèi)生根)，其生產(chǎn)成本高，主要表現(xiàn)在設(shè)備投資大，用電量大和培養(yǎng)基成本高等方面。而且大批量生產(chǎn)過程中，往往因操作失誤而導(dǎo)致污染。國內(nèi)外的組織培養(yǎng)室都是全封閉的，靠人工光照和空調(diào)來滿足試管苗對(duì)光照和溫度的要求，這種培養(yǎng)室的耗電量大，電費(fèi)約占整個(gè)成本的50%，并且培養(yǎng)基中的瓊脂不僅用量大而且價(jià)格很高。本發(fā)明方法的生產(chǎn)成本相比于以往技術(shù)有顯著 降低，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
2.育苗周期短采用本發(fā)明組培苗瓶外袋生根方法，無需經(jīng)過煉苗過程，將試管苗生根和馴化有機(jī)地結(jié)合起來，簡(jiǎn)化了培養(yǎng)程序，有效地縮短了育苗周期，歐美雜種山楊無根組培苗生長(zhǎng)15-20天即可生根，移栽。
常規(guī)的組培苗生根都是在瓶?jī)?nèi)進(jìn)行，移栽前需要經(jīng)過煉苗過程，其周期長(zhǎng)，程序復(fù)雜。本發(fā)明方法在移栽過程中不需要煉苗，育苗時(shí)間縮短了一半。
3.移栽成活率高本發(fā)明采用瓶外袋生根方法代替?zhèn)鹘y(tǒng)的組培苗瓶?jī)?nèi)生根技術(shù)， 避免了根系附著的瓊脂造成的污染腐爛，而且瓶外袋生根方法在生根過程中已經(jīng)逐步適應(yīng)了外界環(huán)境，抗逆能力強(qiáng)。此外，采用本方法生根苗可以連同基質(zhì)一起移栽，不需要緩苗過程，沒有根系損傷，相當(dāng)于容器育苗，移栽成活率可達(dá)80% -95%。
移栽成活率是檢驗(yàn)組培是否成功的關(guān)鍵，也是檢驗(yàn)組培能否進(jìn)行工廠化的關(guān)鍵。 試管無根苗瓶?jī)?nèi)生根和瓶外移栽是兩個(gè)單獨(dú)過程，其生根率和移栽成活率是需要累計(jì)連續(xù)計(jì)算的。而瓶外生根率是將生根和移栽合二為一。因此，本發(fā)明方法試管苗瓶外袋生根的移栽成活率比瓶?jī)?nèi)生根后移栽成活率有顯著地提高。
總之，本發(fā)明歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法具有操作簡(jiǎn)單，育苗周期短，生產(chǎn)成本低，移栽成活率高，可工廠化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。


圖I為具體實(shí)施方式
七步驟四中將組培苗根部的愈傷組織切除的照片；圖2為具體實(shí)施方式
七步驟四中取切除愈傷組織后的單棵組培苗栽入培養(yǎng)袋的穴中的照片；圖3為具體實(shí)施方式
七步驟四中將培養(yǎng)袋頂部用封口機(jī)封好的照片；圖4為具體實(shí)施方式
七獲得的歐美雜種山楊生根苗照片。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式
，還包括各具體實(shí)施方式
間的任意組合。
具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根的方法，包括以下步驟
一、將寬為17 20cm，高為10 12cm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機(jī)塑封，制作成生根培養(yǎng)袋；
二、將泥炭土和沙按體積比I 2 I混合，然后于121°C進(jìn)行高溫滅菌1.5 2 小時(shí)，得培養(yǎng)料，然后將培養(yǎng)料分裝于生根培養(yǎng)袋中，每個(gè)生根培養(yǎng)袋中培養(yǎng)料的裝入量為培養(yǎng)袋體積的1/3 ；
三、將培養(yǎng)袋中的培養(yǎng)料挖穴，穴規(guī)格為寬I. 5 2cm，深I(lǐng). 5cm，穴與穴之間間隔 2cm，然后用生根培養(yǎng)液將每個(gè)穴潤(rùn)濕，每個(gè)穴內(nèi)生根培養(yǎng)液的用量為3 5mL ;
四、將I. 5 3cm的歐美雜種山楊組培苗從培養(yǎng)基中取出，將組培苗根部的愈傷組織切除，取切除愈傷組織后的單棵組培苗栽入培養(yǎng)袋的穴中，然后將培養(yǎng)袋頂部用封口機(jī)封好，置于溫室大棚內(nèi)培養(yǎng)，光照為散射光，棚內(nèi)溫度控制在23 28°C之間，空氣相對(duì)濕度保持在60 % 70%，培養(yǎng)5 7天后，將培養(yǎng)袋頂部劃開，敞口后再培養(yǎng)8 10天，即得歐美雜種山楊生根苗；步驟三中所述的生根培養(yǎng)液為含有O. 3mg/L NAA的WPM培養(yǎng)基或含有 O. 3mg/L NAA 和 O. 05mg/L IAA 的 WPM 培養(yǎng)基。
本實(shí)施方式所述歐美雜種山楊引自芬蘭林業(yè)科學(xué)院。
所述歐美雜種山楊組培苗為利用外植體，通過植物組織培養(yǎng)的方法，分生出的新的歐美雜種山楊植株個(gè)體。
具體實(shí)施方式
二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是步驟一中將寬為 18cm，高為Ilcm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機(jī)塑封。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一或二不同的是步驟二中將泥炭土和沙按體積比I : I混合。其它與具體實(shí)施方式
一或二相同。
具體實(shí)施方式
四本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一或二不同的是步驟二中將泥炭土和沙按體積比2 I混合。其它與具體實(shí)施方式
一或二相同。
具體實(shí)施方式
五本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至四之一不同的是步驟三中每個(gè)穴內(nèi)生根培養(yǎng)液的用量為4mL。其它與具體實(shí)施方式
一四之一相同。
具體實(shí)施方式
六本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至五之一不同的是步驟四中棚內(nèi)溫度控制在25°C,空氣相對(duì)濕度保持在65%。其它與具體實(shí)施方式
一至五之一相同。
具體實(shí)施方式
七本實(shí)施方式歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根的方法，包括以下步驟
一、將寬為17 20cm，高為10 12cm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機(jī)塑封，制作成生根培養(yǎng)袋；
二、將泥炭土和沙按體積比I : I混合，然后于121 °C進(jìn)行高溫滅菌2小時(shí)，得培養(yǎng)料，然后將培養(yǎng)料分裝于生根培養(yǎng)袋中，每個(gè)生根培養(yǎng)袋中培養(yǎng)料的裝入量為培養(yǎng)袋體積的 1/3 ；
三、將培養(yǎng)袋中的培養(yǎng)料挖穴，穴規(guī)格為寬I. 5cm，深I(lǐng). 5cm，穴與穴之間間隔2cm， 然后用生根培養(yǎng)液將每個(gè)穴潤(rùn)濕，每個(gè)穴內(nèi)生根培養(yǎng)液的用量為4mL ；
四、將2cm的歐美雜種山楊組培苗從培養(yǎng)基中取出，將組培苗根部的愈傷組織切除(如圖I所示)，取切除愈傷組織后的單棵組培苗栽入培養(yǎng)袋的穴中(如圖2所示)，然后將培養(yǎng)袋頂部用封口機(jī)封好(如圖3所示)，置于溫室大棚內(nèi)培養(yǎng)，光照為散射光，棚內(nèi)溫度控制在25 °C，空氣相對(duì)濕度保持在65%，培養(yǎng)6天后，將培養(yǎng)袋頂部劃開，敞口后再培養(yǎng) 9天，即得歐美雜種山楊生根苗。
步驟三中所述的生根培養(yǎng)液為含有O. 3mg/L NAA的WPM培養(yǎng)基或含有O. 3mg/LNAA 和O. 05mg/L IAA的WPM培養(yǎng)基。
所述WPM培養(yǎng)基的具體組成成分如下
權(quán)利要求
1.歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根的方法，包括以下步驟一、將寬為17 20cm，高為10 12cm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機(jī)塑封，制作成生根培養(yǎng)袋；二、將泥炭土和沙按體積比I 2 I混合，然后于121°C進(jìn)行高溫滅菌I. 5 2小時(shí)，得培養(yǎng)料，然后將培養(yǎng)料分裝于生根培養(yǎng)袋中，每個(gè)生根培養(yǎng)袋中培養(yǎng)料的裝入量為培養(yǎng)袋體積的1/3 ；三、將培養(yǎng)袋中的培養(yǎng)料挖穴，穴規(guī)格為寬I.5 2cm，深I(lǐng). 5cm，穴與穴之間間隔2cm，然后用生根培養(yǎng)液將每個(gè)穴潤(rùn)濕，每個(gè)穴內(nèi)生根培養(yǎng)液的用量為3 5mL ;四、將I.5 3cm的歐美雜種山楊組培苗從培養(yǎng)基中取出，將組培苗根部的愈傷組織切除，取切除愈傷組織后的單棵組培苗栽入培養(yǎng)袋的穴中，然后將培養(yǎng)袋頂部用封口機(jī)封好，置于溫室大棚內(nèi)培養(yǎng)，光照為散射光，棚內(nèi)溫度控制在23 28°C之間，空氣相對(duì)濕度保持在60% 70%，培養(yǎng)5 7天后，將培養(yǎng)袋頂部劃開，敞口后再培養(yǎng)8 10天，即得歐美雜種山楊生根苗；步驟三中所述的生根培養(yǎng)液為含有O. 3mg/L NAA的WPM培養(yǎng)基或含有O.3mg/L NAA 和 O. 05mg/L IAA 的 WPM 培養(yǎng)基。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于步驟一中將寬為18cm，高為Ilcm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機(jī)塑封。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于步驟二中將泥炭土和沙按體積比I:I混合。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于步驟二中將泥炭土和沙按體積比2I混合。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于步驟三中每個(gè)穴內(nèi)生根培養(yǎng)液的用量為4mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于步驟四中棚內(nèi)溫度控制在25 °C，空氣相對(duì)濕度保持在65%。
全文摘要
歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，涉及一種歐美雜種山楊組培苗生根方法。本發(fā)明是要解決現(xiàn)有歐美雜種山楊組織培養(yǎng)過程中存在培養(yǎng)成本高、生產(chǎn)周期長(zhǎng)，組培苗移栽成活率低的問題。方法一、將聚丙烯塑料袋的底部用封口機(jī)塑封，制作成生根培養(yǎng)袋；二、將泥炭土和沙混合，高溫滅菌得培養(yǎng)料，將培養(yǎng)料分裝于生根培養(yǎng)袋中；三、將培養(yǎng)袋中的培養(yǎng)料挖穴，用生根培養(yǎng)液將每個(gè)穴潤(rùn)濕；四、將歐美雜種山楊組培苗從培養(yǎng)基中取出，栽入培養(yǎng)袋的穴中，將培養(yǎng)袋頂部用封口機(jī)封好，置于溫室大棚內(nèi)培養(yǎng)5～7天后，將培養(yǎng)袋頂部劃開，再培養(yǎng)8～10天，即得歐美雜種山楊生根苗。本發(fā)明方法用于歐美雜種山楊無性繁殖領(lǐng)域。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102919128SQ20121045695
公開日2013年2月13日 申請(qǐng)日期2012年11月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月14日
發(fā)明者刁桂萍, 王秋玉, 詹亞光, 楊傳平, 閆紹鵬, 尚潔, 張榮沭 申請(qǐng)人:東北林業(yè)大學(xué)