專利名稱：一種牛凍精生產(chǎn)工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及牛冷凍精液生產(chǎn)技術領域，尤其是一種牛凍精生產(chǎn)エ藝。
背景技術：
我國自上世紀七十年代開展牛冷凍精液生產(chǎn)，迄今已有三十多年的歷史。雖然生產(chǎn)設備不斷更新、エ藝流程不斷改進、自動化水平不斷提高，但隨著改良范圍逐漸擴大、改良目的要求逐漸提高，市場對公牛凍精生產(chǎn)需求也逐漸多量化、優(yōu)質化。這就要求，在原有鮮精生產(chǎn)的基礎上，在維持并提高原有產(chǎn)量的情況下，優(yōu)化牛凍精生產(chǎn)的エ藝流程，并進ー步可提高產(chǎn)量、質量。例如在生產(chǎn)凍精過程中，通過采用不同的稀釋液、稀釋方法、平衡降溫時間及冷凍的方法，我們發(fā)現(xiàn)，對生產(chǎn)凍精的品質起著重要的決定作用，通過進行評定、對比，以及對凍后精子的活力、定義的完整率和畸形率的研究對比，針對性的優(yōu)化生產(chǎn)エ藝流程可大大提高牛凍精的生產(chǎn)品質與產(chǎn)量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供ー種操作方便、經(jīng)濟實用，利于提高種公牛的精液品質和年產(chǎn)精液量的牛凍精生產(chǎn)エ藝。本發(fā)明公開了ー種牛凍精生產(chǎn)エ藝，其特征在于包括以下エ藝步驟
(1)配制牛凍精稀釋液A液與B液備用；
(2)將接入的牛鮮精先置于29.5 30. 5°C水浴鍋內(nèi)，檢測、記錄、計算得出所需添加稀釋液A液與B液的量，時間需1 2min，之后再將接入的牛鮮精放置于24°C 26°C水浴鍋內(nèi)；
(3)待上述精液降溫至24.5°C 25. 5 V吋，添加等溫的稀釋A液，然后置于常溫21. 5°C 22. 5°C水浴中經(jīng)5-10min滲透互溶；
(4)將第(3)步驟得到的互溶好的精液內(nèi)添加稀釋B液，稀釋B液為22-25°C，之后降溫至3. 5°C 4. 5°C并平衡3. 5 5小時，即可封裝打??；
上述A液與B液分別為
(a)其中A液為每100ml稀釋液中各原料的含量主要包括
檸檬酸三鈉或檸檬酸鈉2. 5 3. 4g,慶大霉素0. 1 0. 2g、環(huán)丙沙星0. 03 0. lg、氨芐西林鈉和鏈霉素各5 10萬単位、果糖1 2g、卵黃10 15ml，余量為蒸餾水；
(b)其中B液為取自體積比84% 88%的A液作為基礎液，在其中加入12 16ml的甘油或こニ醇配制而成。所述A液中每100ml稀釋液中各原料的含量的最佳值為
檸檬酸三鈉或檸檬酸鈉2. 9g、慶大霉素0. 16g、環(huán)丙沙星0. 04g、氨芐西林鈉為8萬單位、鏈霉素為5萬単位、果糖1. lg、卵黃12ml，余量為蒸餾水；
其中B液最好為取自體積比85%的A液作為基礎液，在其中加入15ml的甘油或こニ醇配制而成，即其中的主要原料含量的最佳值包括朽1檬酸三鈉或朽"檬酸鈉2. 465g、慶大霉素0. 136g、環(huán)丙沙星0. 34g、氨節(jié)西林鈉為6. 8萬單位、鏈霉素為4. 25萬單位、果糖0. 935g、卵黃10. 2ml、甘油或こニ醇為15ml,余量為蒸餾水。所述的牛凍精稀釋液A液與B液主要由以下步驟配制而成
(1)稱取各種原料朽1檬酸三鈉或朽"檬酸鈉2.5 3. 4g,慶大霉素0. 1 0. 2g、環(huán)丙沙星0. 03 0. lg、氨節(jié)西林鈉和鏈霉素各5 10萬單位、果糖1 2g、卵黃10 15ml,甘油或こニ醇為12 16ml及蒸餾水備用；
(2)每100ml蒸餾水用2.5 3. 4g的檸檬酸三鈉或檸檬酸鈉配 制成溶液為基礎液，配制時溶解定容消毒、過濾；
(3)A液的配制在上述基礎液中加入慶大霉素0.1 0. 2g、環(huán)丙沙星0. 03 0. lg、氨節(jié)西林鈉和鏈霉素各5 10萬單位、果糖1 2g、卵黃10 15ml配制而成；
(4)B液的配制以上述備用的取自體積比84% 88%的A液作為基礎液，加入甘油或こニ醇12 16ml配制而成；
上述(3) (4)步驟所獲得的A液和B液為所要得到的牛凍精稀釋液。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明所提供的牛凍精生產(chǎn)エ藝的優(yōu)點
1、溫度、時間的優(yōu)化
調(diào)整稀釋溫度在牛凍精生產(chǎn)中，我們沿用的是二次稀釋法，即鮮精接入后先置于35°C水浴鍋內(nèi)，經(jīng)過記錄、計算得出所需添加稀釋A、B液的量后，首先添加等溫(即35°C)A液，然后直接置于常溫(即22-25°C)水浴中降溫30-60min后，添加B液(22_25°C )，最后連同水浴(22-25°C)放入低溫操作柜內(nèi)降溫平衡后，封裝打印。這樣做優(yōu)點在于鮮精采出后首先接觸的溫度與附睪內(nèi)的溫度相仿，添加A液B液中間間隔時間比較長，避免稀釋沖擊，讓精子適應稀釋液環(huán)境，使甘油對精子的毒害降低。但是，①鮮精采出后，首先要與內(nèi)胎，集精杯接觸，在這ー過程中，雖然有保溫套保溫，但畢竟不能做到絕對保溫，鮮精與外界溫差越大，精液降溫速度越快(尤其在冬天)，再從采精現(xiàn)場到實驗室接精窗ロ這ー時間段，精子一直在持續(xù)降溫?？梢?，鮮精從采出那一刻，到放置于水浴鍋內(nèi)，溫度已經(jīng)降低了很多，一般在30-33°C，與附睪內(nèi)的溫度有差異，如果在放入35で水浴鍋內(nèi)，鮮精溫度將會再次提高。因而精子反復回溫，易遭受打擊致使死亡。所以，將鮮精采出后放置的水浴溫度降低到29. 5-30. 5°C，得到良好的效果。②稀釋溫度常規(guī)稀釋流程中，稀釋后降溫速度過快，從35°C直接降至22°C左右，精子易受到冷打擊，本發(fā)明采用下列方式在29. 5-30. 5°C水浴鍋記錄、計算完畢后，放置于24-26°C水浴鍋，待精液逐步降溫至24. 5-25. 5°C時，添加等溫的稀釋A液，然后再放到常溫21. 5-22. 5°C水浴中經(jīng)過5-10min滲透互溶后，添加稀釋B液、放置低溫操作柜中平衡。增加這ー步驟，可以有效地使精子逐步適應下降的溫度，減少死亡。如下圖表格所示鮮精在不同流程時的溫度
I附睪內(nèi)I接入時放置溫度I稀釋A液溫度I稀釋B液溫f 鮮精溫度 37-38°C 30-33°C
優(yōu)化前不同流程 37-38°C 35 °C35 °C22 °C
優(yōu)化后不同流程 [37-38°C I30°C[25°C122 °C
2、優(yōu)化稀釋液
稀釋液作為冷凍精液的保護機制，不僅為精液提供能量，也對精子有著保護的作用。它的成分有糖類、卵黃、抗凍劑、緩沖劑、抗菌素及非電解質。其中糖類和抗凍劑尤為重要。
在凍精生產(chǎn)流程中，二次稀釋時，糖類和抗凍劑是添加在稀釋B液中的。糖類具有補充精子的能量消耗，對精子在低溫情況下有保護的作用?？箖鰟┑淖饔卯斁豪鋬鰰r，主要受到危害是冰晶從精子細胞原生質中抽去水，使精子細胞造成脫水狀態(tài)，發(fā)生不可逆的變化死亡。而甘油可減少和降低這種對精細胞的危害。如下表所示稀釋B液優(yōu)化前后果糖和甘油的含量
權利要求
1.一種牛凍精生產(chǎn)工藝，其特征在于包括以下工藝步驟 (1)配制牛凍精稀釋液A液與B液備用； (2)將接入的牛鮮精先置于29.5 30. 5°C水浴鍋內(nèi)，檢測、記錄、計算得出所需添加稀釋液A液與B液的量，時間需I 2min，之后再將接入的牛鮮精放置于24°C 26°C水浴鍋內(nèi)； (3)待上述精液降溫至24.5°C 25. 5 V時，添加等溫的稀釋A液，然后置于常溫21. 5°C 22. 5°C水浴中經(jīng)5-10min滲透互溶； (4)將第(3)步驟得到的互溶好的精液內(nèi)添加稀釋B液，稀釋B液為22-25°C，之后降溫至3. 5°C 4. 5°C并平衡3. 5 5小時，即可封裝打印； 上述A液與B液分別為 (a)其中A液為每IOOml稀釋液中各原料的含量主要包括 檸檬酸三鈉或檸檬酸鈉2. 5 3. 4g,慶大霉素O. I O. 2g、環(huán)丙沙星O. 03 O. lg、氨芐西林鈉和鏈霉素各5 10萬單位、果糖I 2g、卵黃10 15ml，余量為蒸餾水； (b)其中B液為取自體積比84% 88%的A液作為基礎液，在其中加入12 16ml的甘油或乙二醇配制而成。
2.如權利要求I所述的牛凍精生產(chǎn)工藝，其特征在于所述A液中每IOOml稀釋液中各原料的含量為 檸檬酸三鈉或檸檬酸鈉2. 9g、慶大霉素O. 16g、環(huán)丙沙星O. 04g、氨芐西林鈉為8萬單位、鏈霉素為5萬單位、果糖I. lg、卵黃12ml，余量為蒸餾水； 其中B液為取自體積比85%的A液作為基礎液，在其中加入15ml的甘油或乙二醇配制而成，即其中的主要原料含量包括 朽1檬酸三鈉或朽1檬酸鈉2. 465g、慶大霉素O. 136g、環(huán)丙沙星O. 34g、氨節(jié)西林鈉為6. 8萬單位、鏈霉素為4. 25萬單位、果糖O. 935g、卵黃10. 2ml、甘油或乙二醇為15ml,余量為蒸餾水。
3.如權利要求I或2所述的牛凍精生產(chǎn)工藝，其特征在于所述的牛凍精稀釋液A液與B液主要由以下步驟配制而成 (1)稱取各種原料朽1檬酸三鈉或朽1檬酸鈉2.5 3. 4g,慶大霉素O. I O. 2g、環(huán)丙沙星O. 03 O. lg、氨節(jié)西林鈉和鏈霉素各5 10萬單位、果糖I 2g、卵黃10 15ml,甘油或乙二醇為12 16ml及蒸餾水備用； (2)每IOOml蒸餾水用2.5 3. 4g的檸檬酸三鈉或檸檬酸鈉配制成溶液為基礎液，配制時溶解定容消毒、過濾； (3)A液的配制在上述基礎液中加入慶大霉素O.I O. 2g、環(huán)丙沙星O. 03 O. lg、氨節(jié)西林鈉和鏈霉素各5 10萬單位、果糖I 2g、卵黃10 15ml配制而成； (4)B液的配制以上述備用的取自體積比84% 88%的A液作為基礎液，加入甘油或乙二醇12 16ml配制而成； 上述(3) (4)步驟所獲得的A液和B液為所要得到的牛凍精稀釋液。
全文摘要
本發(fā)明涉及牛冷凍精液生產(chǎn)技術領域，尤其是一種牛凍精生產(chǎn)工藝。包括以下工藝步驟(1)配制牛凍精稀釋液A液與B液備用；(2)將接入的牛鮮精先置于29.5～30.5℃水浴鍋內(nèi)，檢測、記錄、計算出稀釋液A液與B液的量，之后再將接入的牛鮮精放置于24℃～26℃水浴鍋內(nèi)；(3)待上述精液降溫至24.5℃～25.5℃時，添加等溫的稀釋A液，然后置于常溫21.5℃～22.5℃水浴中經(jīng)滲透互溶；(4)將第(3)步驟得到的互溶好的精液內(nèi)添加稀釋B液，稀釋B液為22-25℃，之后降溫至3.5℃～4.5℃并平衡3.5～5小時，即可封裝打印，其操作方便、經(jīng)濟實用。
文檔編號A01N1/02GK102948414SQ20121047156
公開日2013年3月6日 申請日期2012年11月20日 優(yōu)先權日2012年11月20日
發(fā)明者朱兵山, 孫錦霞, 陳蕾, 王寧 申請人:新疆天山畜牧生物工程股份有限公司