專利名稱：朝鮮薊的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種朝鮮薊的培育方法。
背景技術(shù)：
朝鮮薊又稱法國百合、荷花百合、菜薊、洋薊、球薊等，是菊科菜薊屬中一種多年生蓮座型草本植物，以未成熟的花蕾供人們食用，剩余殘渣被用作動物飼料。朝鮮薊營養(yǎng)豐富，含有多種對人體有益的成分，具有促進消化、保護肝臟、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、降血糖、抗氧化等功效，被譽為“蔬菜之王”，在國際市場上供不應(yīng)求，具有很好的發(fā)展前景。朝鮮薊原產(chǎn)于地中海沿岸，19世紀傳入我國，2005年引入常德市成功。在中國，朝鮮薊以種子育苗栽培， 由于氣候差異，朝鮮薊在湖南、云南等主栽區(qū)只開花不結(jié)果，以致種子年年都需進口。這不僅種子進口手續(xù)繁多，耗時長，價格高，經(jīng)常延誤農(nóng)時。同時，朝鮮薊是異花授粉作物，繁殖率低，易變異，病害傳播快，生產(chǎn)栽培中田間株型和果型變異混雜，達標商品率低。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述問題，本發(fā)明的目的是提供一種朝鮮薊的培育方法，通過本方法培育出的朝鮮薊抗病性和抗逆性有很強的優(yōu)勢，并且成本低。本發(fā)明所述的一種朝鮮薊的培育方法包括如下步驟
(1)、外植體的選取每年的10月到翌年4月都可在大田取樣，采農(nóng)藝性狀好、無病毒的朝鮮薊宿根苗或分蘗芽做外植體；
(2)、外植體的消毒將從大田收集的外植體材料用流水沖洗干凈,先剪掉大葉片,再用刀片削去莖尖周圍的葉片和組織，留取3 4cm的莖尖段洗凈后轉(zhuǎn)至無菌室；在超凈工作臺上，先用75%酒精處理10s，清洗2 3次后，再用O. 1%升汞處理8 lOmin，用無菌水沖洗4 5次后，置于消毒濾紙上吸干水分后備用；
(3)、叢生芽的誘導(dǎo)將消毒后的莖尖段切成O.5cm的部分接入芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+1 mg/L 6 - ΒΑ+0. 5 mg/L NAA+56. 5 mg/L Na2HPO4+100 mg/L 肌醇 +100mg/L L-酪氨酸中;3 5天后，切口處膨大，莖尖開始變綠、伸長；10 15天后，腋芽開始萌發(fā)、伸長；30天后，形成至少8個葉片的叢生芽；
(4)、叢生芽的增殖將誘導(dǎo)出的叢生芽切成帶2 3片葉的芽塊，剔除褐化的組織，并轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基 MS+2 mg/L 6 - BA+56. 5 mg/L Na2HPO4+100 mg/L 肌醇+100mg/L L-酪氨酸中；7天后，腋芽開始分化；15天后，即可形成叢生芽，平均20天繼代I次，增殖系數(shù)為6. 2 ；
(5)、生根培養(yǎng)將長勢好、葉色濃綠、苗高2 3cm的叢生芽切成帶3 4片葉的試管小苗，移至生根培養(yǎng)基1/2MS+1.0 mg/L NAA+1. O mg/L β - CD+100 mg/L肌醇上，7天后，莖段基部根原基突起；15天后，從根原基長出新的不定根，生根率可達99. 3% ；
(6)、試管小苗的馴化和移栽當幼苗的根長達0.5 I. O厘米時進行移栽，根太長反而易遭損傷不利生長，移栽前在溫室內(nèi)開瓶煉苗2 3天，午后和傍晚噴水，以便提高煉苗的適應(yīng)能力；小苗轉(zhuǎn)移到苗床前，用自來水把根系上的培養(yǎng)基沖洗干凈，同時用1000倍甲基托布津或多菌靈浸泡小苗根部30分鐘，隨后放置于通風(fēng)陰涼處晾干水分至根系發(fā)白變軟，再栽入已準備好的基質(zhì)中，基質(zhì)為質(zhì)量比I : I : I的蛭石、珍珠巖、細沙的混合物；栽后必須通風(fēng)、保濕，溫度太高時揭開膜兩端降溫；待10 15天后有效葉達3片以上時移栽到大田，成活率達90 %以上。本發(fā)明具有如下優(yōu)點
本技術(shù)利用朝鮮薊易分蘗的特點，直接從大田采取農(nóng)藝性狀好、無病毒的朝鮮薊分蘗莖尖為外植體，利用莖尖不定芽建立朝鮮薊高效、穩(wěn)定的再生體系。不僅可以生產(chǎn)大量脫毒苗，選育符合商品要求、適合本地栽培的優(yōu)良品質(zhì)，對朝鮮薊這種外來引進作物的本地化進程以及抗病性和抗逆性有很強的優(yōu)勢，以實現(xiàn)朝鮮薊標準化、規(guī)?；a(chǎn)。而且，本技術(shù)方法簡單、成本低、容易實施，是一種高效、穩(wěn)定的種苗繁育方法。
具體實施例方式下面的實施實例可更詳細地說明本發(fā)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。實施例I :(1)、 外植體的選取每年的10月到翌年4月都可在大田取樣，采農(nóng)藝性狀好、無病毒的朝鮮薊宿根苗或分蘗芽做外植體；
(2)、外植體的消毒將從大田收集的外植體材料用流水沖洗干凈,先剪掉大葉片,再用刀片削去莖尖周圍的葉片和組織，留取3 4cm的莖尖段洗凈后轉(zhuǎn)至無菌室；在超凈工作臺上，先用75%酒精處理10s，清洗2 3次后，再用O. 1%升汞處理8 lOmin，用無菌水沖洗4 5次后，置于消毒濾紙上吸干水分后備用；
(3)、叢生芽的誘導(dǎo)將消毒后的莖尖段切成O.5cm的部分接入芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+1 mg/L 6 - ΒΑ+0. 5 mg/L NAA+56. 5 mg/L Na2HPO4+1OO mg/L 肌醇 +100mg/L L-酪氨酸中；3 5天后，切口處膨大，莖尖開始變綠、伸長；10 15天后，腋芽開始萌發(fā)、伸長；30天后，形成至少8個葉片的叢生芽；
(4)、叢生芽的增殖將誘導(dǎo)出的叢生芽切成帶2 3片葉的芽塊，剔除褐化的組織，并轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基 MS+2 mg/L 6 - BA+56. 5 mg/L Na2HPO4+100 mg/L 肌醇+100mg/L L-酪氨酸中；7天后，腋芽開始分化；15天后，即可形成叢生芽，平均20天繼代I次，增殖系數(shù)為6. 2 ；
(5)、生根培養(yǎng)將長勢好、葉色濃綠、苗高2 3cm的叢生芽切成帶3 4片葉的試管小苗，移至生根培養(yǎng)基1/2MS+1.0 mg/L NAA+1. O mg/L β - CD+100 mg/L肌醇上，7天后，莖段基部根原基突起；15天后，從根原基長出新的不定根，生根率可達99. 3% ；
(6)、試管小苗的馴化和移栽當幼苗的根長達0.5 I. O厘米時進行移栽，根太長反而易遭損傷不利生長，移栽前在溫室內(nèi)開瓶煉苗2 3天，午后和傍晚噴水，以便提高煉苗的適應(yīng)能力；小苗轉(zhuǎn)移到苗床前，用自來水把根系上的培養(yǎng)基沖洗干凈，同時用1000倍甲基托布津或多菌靈浸泡小苗根部30分鐘，隨后放置于通風(fēng)陰涼處晾干水分至根系發(fā)白變軟，再栽入已準備好的基質(zhì)中，基質(zhì)為質(zhì)量比I : I : I的蛭石、珍珠巖、細沙的混合物；栽后必須通風(fēng)、保濕，溫度太高時揭開膜兩端降溫；待10 15天后有效葉達3片以上時移栽到大田，成活率達90 %以上。
權(quán)利要求
1.朝鮮薊的培育方法，其特征在于，包括如下步驟 (1)、外植體的選取每年的10月到翌年4月都可在大田取樣，采農(nóng)藝性狀好、無病毒的朝鮮薊宿根苗或分蘗芽做外植體； (2)、外植體的消毒將從大田收集的外植體材料用流水沖洗干凈,先剪掉大葉片,再用刀片削去莖尖周圍的葉片和組織，留取3 4cm的莖尖段洗凈后轉(zhuǎn)至無菌室；在超凈工作臺上，先用75%酒精處理10s，清洗2 3次后，再用0. 1%升汞處理8 lOmin，用無菌水沖洗4 5次后，置于消毒濾紙上吸干水分后備用； (3)、叢生芽的誘導(dǎo)將消毒后的莖尖段切成0.5cm的部分接入芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+1mg/L 6 - BA+0. 5 mg/L NAA+56. 5 mg/L Na2HPO4+1OO mg/L 肌醇 +100mg/L L-酪氨酸中；3 5天后，切口處膨大，莖尖開始變綠、伸長；10 15天后，腋芽開始萌發(fā)、伸長；30天后，形成至少8個葉片的叢生芽； (4)、叢生芽的增殖將誘導(dǎo)出的叢生芽切成帶2 3片葉的芽塊，剔除褐化的組織，并 轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基 MS+2 mg/L 6 - BA+56. 5 mg/L Na2HPO4+100 mg/L 肌醇+100mg/L L-酪氨酸中；7天后，腋芽開始分化；15天后，即可形成叢生芽，平均20天繼代I次，增殖系數(shù)為6. 2 ； (5)、生根培養(yǎng)將長勢好、葉色濃綠、苗高2 3cm的叢生芽切成帶3 4片葉的試管小苗，移至生根培養(yǎng)基1/2MS+1.0 mg/L NAA+1. 0 mg/L ^ - CD+100 mg/L肌醇上，7天后，莖段基部根原基突起；15天后，從根原基長出新的不定根，生根率可達99. 3% ； (6)、試管小苗的馴化和移栽當幼苗的根長達0.5 I. 0厘米時進行移栽，根太長反而易遭損傷不利生長，移栽前在溫室內(nèi)開瓶煉苗2 3天，午后和傍晚噴水，以便提高煉苗的適應(yīng)能力；小苗轉(zhuǎn)移到苗床前，用自來水把根系上的培養(yǎng)基沖洗干凈，同時用1000倍甲基托布津或多菌靈浸泡小苗根部30分鐘，隨后放置于通風(fēng)陰涼處晾干水分至根系發(fā)白變軟，再栽入已準備好的基質(zhì)中，基質(zhì)為質(zhì)量比I : I : I的蛭石、珍珠巖、細沙的混合物；栽后必須通風(fēng)、保濕，溫度太高時揭開膜兩端降溫；待10 15天后有效葉達3片以上時移栽到大田，成活率達90 %以上。
全文摘要
朝鮮薊的培育方法，包括如下步驟外植體的選取、外植體的消毒、叢生芽的誘導(dǎo)、叢生芽的增殖、生根培養(yǎng)、試管小苗的馴化和移栽，成活率達90%以上。本發(fā)明具有如下優(yōu)點本技術(shù)利用朝鮮薊易分蘗的特點，直接從大田采取農(nóng)藝性狀好、無病毒的朝鮮薊分蘗莖尖為外植體，利用莖尖不定芽建立朝鮮薊高效、穩(wěn)定的再生體系。不僅可以生產(chǎn)大量脫毒苗，選育符合商品要求、適合本地栽培的優(yōu)良品質(zhì)，對朝鮮薊這種外來引進作物的本地化進程以及抗病性和抗逆性有很強的優(yōu)勢，以實現(xiàn)朝鮮薊標準化、規(guī)模化生產(chǎn)。而且，本技術(shù)方法簡單、成本低、容易實施，是一種高效、穩(wěn)定的種苗繁育方法。
文檔編號A01H4/00GK102960252SQ20121052879
公開日2013年3月13日 申請日期2012年12月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月11日
發(fā)明者張平喜, 王中美, 劉小兵, 李樹舉, 吳亞飛 申請人:常德市匯美食品有限公司