專利名稱：一種半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于一種農(nóng)業(yè)技術(shù)所用的器械，涉及煙草病毒病的接種用具，具體涉及一種半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，該接種器適用于準(zhǔn)確、快速對(duì)煙草花葉病毒病(TMV)的針刺接種。
背景技術(shù)：
接種試驗(yàn)是植物病害研究中重要的工作，在研究植物對(duì)病原物抗性、病害循環(huán)、病害流行、病害控制、侵染過(guò)程和病害防治等各個(gè)方面，接種是試驗(yàn)的前提。煙草花葉病毒病(Tobacco Mosaic Virus, TMV)、煙草黃瓜花葉病毒病(Cucumber Mosaic Virus, CMV)和煙草馬鈴薯Y病毒病(Potato Virus Y，PVY)是煙草上最主要的病毒病。特別是煙草花葉病毒，它是世界范圍內(nèi)普遍發(fā)生的一種可侵染22科198種植物的病毒病，煙草感染后造成品 質(zhì)和產(chǎn)量下降，甚至絕收，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，研究該病害的侵染性具有重要意義。由于植物病毒是絕對(duì)內(nèi)寄生病原，只能在活體植物細(xì)胞內(nèi)繁殖，而在研究一些抗病毒物質(zhì)時(shí)候則需要利用植物葉片的半葉做相互對(duì)照，因此半葉法接種是植物病毒病研究中非常重要的研究方法。現(xiàn)有的機(jī)械摩擦傳染的煙草病毒病接種材料及方法，主要有病株汁液摩擦接種法、噴槍接種法、病組織直接接種法等三種。就目前的煙草病毒病多種接種方法而言，上述每種接種方法存在一定的問(wèn)題，共同的缺點(diǎn)是接種程序繁雜，接種效率低，接種速度慢，植株間接種病毒量誤差大，不能滿足短時(shí)間內(nèi)病毒大量接種的要求。如病株汁液摩擦接種法是最常用的接種法，其步驟是取病葉組織加少量的pH = 7. 0的磷酸緩沖液在研缽中研碎，紗布過(guò)濾并擠出汁液，最后磷酸緩沖液稀釋至I : 100質(zhì)量體積比備用。接種時(shí)，待用病毒接種液中加入少量細(xì)金剛砂或在接種的葉面上撒上少量金剛砂作為磨料，然后用手指、紗布、毛筆或小的扁刷等，蘸取待用病毒接種液在葉片上來(lái)回輕輕摩擦，再用清水將葉面多余的病毒接種液和磨料輕輕洗去。其缺點(diǎn)是程序繁瑣，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，植株間接種病毒量誤差大，特別是在大面積接種和材料多的時(shí)候尤為明顯。而噴槍接種法是在待用病毒接種液中加金剛砂，在相同的時(shí)間內(nèi)，用相同的噴射壓力，將含有少量金剛砂的待用病毒接種液打在被接種的病株上，實(shí)現(xiàn)接種，其缺點(diǎn)是操作難度較大，相同時(shí)間和相同壓力的控制缺乏一定的可操作性；噴槍設(shè)備昂貴，增加了試驗(yàn)成本。病組織直接在葉面上接種，又稱“干接法”，適用于少量接種或病組織材料較少和病毒不穩(wěn)定的情況，其缺點(diǎn)是無(wú)法進(jìn)行大量接種試驗(yàn)、傳染率較低和植株間接種病毒量誤差大。目前針刺接種法尚缺乏高效簡(jiǎn)便的針刺接毒工具，因此設(shè)計(jì)一種方便快捷、準(zhǔn)確一致、高效的接種工具對(duì)病毒接種、病毒侵染研究、抗病毒藥物篩選及后續(xù)研究具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容針對(duì)目前病毒接種方法及工具中存在的接種效率低，不同葉片間誤差大、接種效果不穩(wěn)定，接種工具使用不方便等問(wèn)題，本實(shí)用新型的目的在于，提供一種半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器。為了實(shí)現(xiàn)上述任務(wù)，本實(shí)用新型采用如下的技術(shù)解決方案予以實(shí)現(xiàn)—種半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，包括由A片和B片以及彈簧所構(gòu)成的塑料夾，其特征在于，在塑料夾的A片上有半葉型接種板和病毒接種液固定件，其中，半葉型接種板上均勻分布有接種針；在塑料夾的B片上有和半葉型接種板相匹配的接種墊，在接種墊上均勻分布有和接種針相對(duì)應(yīng)的針刺穿孔。本實(shí)用新型的其它一些特點(diǎn)是所述的病毒接種液固定件為覆有病毒接種液的海綿或棉紗。所述的接種針為昆蟲(chóng)解剖針。所述的接種墊中的針刺穿孔的直徑為0. 3mm。所述的接種板中的接種針之間的間距為3mm。所述的接種墊和半葉型接種板均選用橡膠板制作。采用本實(shí)用新型的半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，按以下步驟進(jìn)行操作a)將煙草花葉病毒病病葉和pH =7.0的磷酸緩沖液按I : 100的質(zhì)量體積比配
置，研磨過(guò)濾后獲得病毒接種液；b)將病毒接種液固定件浸泡病毒接種液后覆蓋在接種板上,接種針的針尖穿過(guò)病毒接種液固定件外露；c)將煙草葉片置于接種帶的A片接種板和B片的接種墊中間，使接種針穿過(guò)葉片進(jìn)入B片接種墊的針刺穿孔中，將稍加擠壓，將病毒接種液固定件中的煙草花葉病毒接種液接種于葉片中。在具體應(yīng)用過(guò)程中浸沾一次病毒接種液的病毒接種液固定件可以接種5 7張煙草葉片。本實(shí)用新型的半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，性能好，輕便易攜，同時(shí)具有準(zhǔn)確、一致、高效和快速接種特性。

圖I為本實(shí)用新型的半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器器結(jié)構(gòu)示意以下結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。
具體實(shí)施方式
參見(jiàn)圖1，本實(shí)施例給出一種半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，包括由A片和B片以及彈黃6所構(gòu)成的塑料夾I，在塑料夾I的A片上有半葉型接種板2和病毒接種液固定件3，其中，半葉型接種板2上均勻分布有接種針；在塑料夾I的B片上有和半葉型接種板2相匹配的接種墊4，在接種墊4上分布有和接種針相對(duì)應(yīng)的針刺穿孔5。本實(shí)施例中，半葉型接種板2和接種墊4均采用橡膠板制作。接種板2中的接種針之間的間距為3mm，接種墊4中的針刺穿孔5直徑為0. 3mm且均勻分布，接種針選擇昆蟲(chóng)解剖針；病毒接種液固定件3為覆有病毒接種液的海綿或棉紗。[0024]本實(shí)施例的半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器工作原理是先用病毒接種液固定件3浸取一定量的按比例配好的病毒接種液，浸泡后病毒接種液固定件3覆蓋在半葉型接種板2上，使接種針的針尖穿過(guò)病毒接種液固定件3并外露；再將煙草葉片置于塑料夾I的A片上的半葉型接種板2上和B片上的接種墊4的中間，塑料夾I由彈簧6固定，使接種針穿過(guò)煙草葉片進(jìn)入B片上接種墊的針刺穿孔中，稍加擠壓，將病毒接種液固定件3中的煙草花葉病毒接種液接種于煙草葉片中。本實(shí)用新型的半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，可用于抗病毒藥物篩選、植物抗病性、寄主與病原的相互作用、藥劑對(duì)病害的預(yù)防效果測(cè)定以及病原物的致病機(jī)制等方面的研究。·
權(quán)利要求1.一種半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，包括由A片和B片以及彈簧(6)所構(gòu)成的塑料夾(I)，其特征在于，在塑料夾(I)的A片上有半葉型接種板(2)和病毒接種液固定件(3)，其中，半葉型接種板(2)上均勻分布有接種針；在塑料夾(I)的B片上有和半葉型接種板(2)相匹配的接種墊(4)，在接種墊(4)上分布有和接種針相對(duì)應(yīng)的針刺穿孔(5)。
2.如權(quán)利要求I所述的半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，其特征在于，所述的病毒接種液固定件(3)為覆有病毒接種液的海綿或棉紗。
3.如權(quán)利要求I所述的半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，其特征在于，所述的接種針為昆蟲(chóng)解剖針。
4.如權(quán)利要求I所述的半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，其特征在于，所述的接種墊⑷中的針刺穿孔(5)的直徑為0.3mm。
5.如權(quán)利要求I所述的半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，其特征在于，所述的接種板(2)中的接種針之間的間距為3mm。
6.如權(quán)利要求I所述的半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，其特征在于，所述的接種墊(4)和半葉型接種板(2)均選用橡膠板制作。
專利摘要本實(shí)用新型公開(kāi)了一種半葉法測(cè)定煙草花葉病毒侵染性的接種器，包括由A片和B片以及彈簧所構(gòu)成的塑料夾，在塑料夾的A片上有半葉型接種板和病毒接種液固定件，其中，半葉型接種板上均勻分布有接種針；在塑料夾的B片上有和半葉型接種板相匹配的接種墊，在接種墊上均勻分布有和接種針相對(duì)應(yīng)的針刺穿孔。接種時(shí)將病毒接種液固定件浸取一定量配好的病毒接種液，置于接種板上，依靠塑料夾固定在煙草葉片的半葉位置，通過(guò)針刺造成的傷口即可完成病毒接種，其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，性能好，輕便易攜，同時(shí)具有準(zhǔn)確、一致、高效和快速接種特性。
文檔編號(hào)A01G7/06GK202524805SQ20122018448
公開(kāi)日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月27日
發(fā)明者安德榮, 成巨龍, 沈小英 申請(qǐng)人:陜西省煙草研究所