專利名稱：一種黃連木快速繁殖的方法
一種黃連木快速繁殖的方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種黃連木快速繁殖的方法。
背景技術(shù)：
黃連木(/7Z1Siacia chinensis Bunge.)又名偕樹、偕木、黃楝樹等,屬漆樹科黃連木屬落葉喬木，成年樹高達20 m以上，材質(zhì)優(yōu)良，葉片隨季節(jié)變換而呈現(xiàn)不同色澤，花序紅色，極為美觀，宜作景觀綠化，是一種多用途樹種。因其種子含油率42.5%，出油率20% 30%，可提煉成生物柴油，因此被國家列為“十一五”期間重點開發(fā)的主要生物質(zhì)能源樹種之一，極具發(fā)展?jié)摿Α?br> 目前，黃連木主要通過播種和嫁接繁殖，但出芽率和成活率都不是很高；而在黃連木組培快繁上有純粹的利用子葉節(jié)進行繁殖，也有純粹的利用黃連木芽進行繁殖，而沒有將這兩種組培快繁方法結(jié)合使用，繁殖系數(shù)和成苗率都不高；遠不能滿足國內(nèi)對黃連木種苗的需求。
傳統(tǒng)的利用黃連木芽進行組織培養(yǎng)快速繁殖的方法為1、選取成熟飽滿且種皮呈綠藍色的種子，去除黃連木種皮。
2、在超凈工作臺內(nèi)，將黃連木種子用酒精消毒，再用無菌水沖洗，之后用升汞消毒，再將消毒后的黃連木種子用無菌水沖洗。
3、將消毒后的黃連木種子放于培養(yǎng)基中進行接種培養(yǎng)，之后觀察莖尖誘導(dǎo)情況， 進行取材。
4、在無菌操作臺內(nèi)取出，切其頂芽接于培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。后續(xù)過程同通常的組培成苗過程。
傳統(tǒng)的利用黃連木子葉節(jié)進行組織培養(yǎng)快速繁殖的方法為1、選取成熟飽滿且種皮呈綠藍色的種子，去除黃連木種皮。
2、在超凈工作臺內(nèi)，將黃連木種子用酒精消毒，再用無菌水沖洗，之后用升汞消毒，再將消毒后的黃連木種子用無菌水沖洗。
3、將消毒后的黃連木種子放于培養(yǎng)基中進行接種培養(yǎng)，取材時間控制嚴格，要求培養(yǎng)實生苗長至子葉變綠展平，并長出兩片小真葉后，進行取材。
4、取出無菌苗 ，在超凈工作臺里用解剖刀切去兩端，留下子葉節(jié)(切時上胚軸、下胚軸各留O. 5 Cm左右)，再沿胚軸中軸線切開兩個子葉節(jié)，將獲得的兩個子葉節(jié)再分別切除 1/3子葉，剩下的子葉節(jié)部分接種在芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后得幼芽。此時莖尖尚小，無快繁利用價值。后續(xù)過程同通常的組培成苗過程。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種黃連木快速繁殖的方法，能夠大大提高黃連木的出芽率和成活率。
本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是一種黃連木快速繁殖的方法，包括以下步驟A、選取成熟飽滿且種皮呈藍綠色的黃連木種子，去除黃連木種皮，備用；B、在超凈工作臺內(nèi)，將黃連木種子用質(zhì)量濃度為75%的酒精消毒20 30s，再用無菌水沖洗3 5次,每次3 5分鐘；之后用質(zhì)量濃度為O. 2%的升萊消毒5 6分鐘,再將消毒后的黃連木種子用無菌水沖洗3 5次，每次3 5分鐘，備用；C、將消毒后的黃連木種子種臍向下垂直放于MS培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)；D、待黃連木種子長成莖尖長I 2cm，子葉變綠展平，并長出兩片小真葉，且全長3 4 cm的無菌幼苗植株后，取出植株，用滅菌后的剪刀在超凈工作臺內(nèi)將黃連木植株剪成3部分，上部是I 2cm長的莖尖，中間是長I 2cm的子葉節(jié)，下部是黃連木的根，備用；E、分別將莖尖和子葉節(jié)接種于相同的生長培養(yǎng)基上，進行芽增殖培養(yǎng)。
所述步驟E中的生長培養(yǎng)基為加有1/2WPM、4· O mg/L 6_ΒΑ、0· I mg/L IBA、30 g/ L蔗糖和6. 7 g/L瓊脂的pH為5. 8 6. O的培養(yǎng)基。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明在黃連木種子長成莖尖長I 2cm，子葉變綠展平， 并長出兩片小真葉，且全長3 4 cm的無菌幼苗植株后，取出植株，切割成三部分，將莖尖接于培養(yǎng)基中，再將剩下的子葉節(jié)也接種在培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。通過采用本發(fā)明方法，具有以下優(yōu)點1、操作簡單，本發(fā)明在超凈工作臺里用剪刀將無菌苗剪成3段，分別為上端的莖尖和中間的子葉節(jié)以及下部的根，此后即可直接將莖尖和子葉節(jié)接種于生長培養(yǎng)基上進行快繁培養(yǎng)，將無菌苗分為三段用時5 10s ;而前人在處理時獲取子葉節(jié)的時間較長，且切下的子葉節(jié)還要沿胚軸中軸線縱切以切取子葉節(jié)，還要切去1/3的子葉，剩下的部分用于接種，操作過于復(fù)雜，最快需要廣2 min左右，也就說此法在時間上比起原來可以省8倍左右的時間，大大提高了工作效率，對于大量組培生產(chǎn)有很大的幫助，可以更大程度的獲取利益。
2、減少了切割操作對子葉節(jié)的傷害，由于減少了操作步驟，可以大大避免在取子葉節(jié)的時候?qū)ψ尤~節(jié)的傷害，而且由于本發(fā)明操作簡單，因此基本無污染。
3、材料利用率高，本發(fā)明利用的是莖尖快繁的下腳料，無須為子葉節(jié)快繁專門準備材料，提聞了材料的利用率。
4、成苗快繁殖系數(shù)更高，與前人純粹的用子葉節(jié)或莖尖接種相比，此方法更進一步，將上面的莖尖和子葉節(jié)分開，再分別接種到加有1/2WPM、4.0 mg/L 6_BA、0.1 mg/L IBA、30 g/L蔗糖和6. 7 g/L瓊脂的pH為5. 8 6. 0的培養(yǎng)基上，莖尖繼續(xù)正常生長快繁， 子葉節(jié)生出兩個幼芽，這樣擴大了繁殖系數(shù)。


圖1為采用本發(fā)明的子葉節(jié)培養(yǎng)20天后長出兩個新生芽。具體實施例
下面對本發(fā)明的 實施例做詳細說明本實施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護范圍不限于下述的實施例。
一種黃連木快速繁殖的方法，包括以下步驟A、選取成熟飽滿且種皮呈藍綠色的黃連木種子，去除黃連木種皮，備用；B、在超凈工作臺內(nèi)，將黃連木種子用質(zhì)量濃度為75%的酒精消毒25s，再用無菌水沖洗4次，每次4分鐘；之后用質(zhì)量濃度為O. 2%的升汞消毒5分鐘，再將消毒后的黃連木種子用無菌水沖洗4次，每次4分鐘，備用；C、將消毒后的黃連木種子種臍向下垂直放于MS培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)；D、待黃連木種子長成莖尖長I 2cm，子葉變綠展平，并長出兩片小真葉，且全長3 4 cm的無菌幼苗植株后，取出植株，用滅菌后的剪刀在超凈工作臺內(nèi)將黃連木植株剪成3部分，上部是1. 5cm長的莖尖，中間是長1. 5cm的子葉節(jié)，下部是黃連木的根，備用；E、分別將莖尖和子葉節(jié)接種于相同的生長培養(yǎng)基上，進行芽增殖培養(yǎng)。生長培養(yǎng)基為加有 1/2WPM、4· O mg/L 6_ΒΑ、0· I mg/L IBA、30 g/L 蔗糖和 6. 7 g/L 瓊脂的 pH 為 5· 8 6.O的培養(yǎng)基。
結(jié)果表明本發(fā)明方法操作簡單，將無菌苗分為三段用時5 10s即可獲得子葉節(jié)和莖尖，大大提高了工作效率，對于大量組培生產(chǎn)有很大的幫助。本發(fā)明方法切取子葉節(jié)時成功率可達到98%，且95%的子葉節(jié)都能成活，利用本發(fā)明方法大大提高了材料的利用率 ， 且有85%的子葉節(jié)和94%的莖尖在接種20天后就能新生芽，效果明顯。
權(quán)利要求
1.一種黃連木快速繁殖的方法，其特征在于，包括以下步驟A、選取成熟飽滿且種皮呈藍綠色的黃連木種子，去除黃連木種皮，備用；B、在超凈工作臺內(nèi)，將黃連木種子用質(zhì)量濃度為75%的酒精消毒20 30s，再用無菌水沖洗3 5次,每次3 5分鐘；之后用質(zhì)量濃度為O. 2%的升萊消毒5 6分鐘,再將消毒后的黃連木種子用無菌水沖洗3 5次，每次3 5分鐘，備用；C、將消毒后的黃連木種子種臍向下垂直放于MS培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)；D、待黃連木種子長成莖尖長I 2cm，子葉變綠展平，并長出兩片小真葉，且全長3 4 cm的無菌幼苗植株后，取出植株，用滅菌后的剪刀在超凈工作臺內(nèi)將黃連木植株剪成3部分，上部是I 2cm長的莖尖，中間是長I 2cm的子葉節(jié)，下部是黃連木的根，備用；E、分別將莖尖和子葉節(jié)接種于相同的生長培養(yǎng)基上，進行增殖培養(yǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種黃連木快速繁殖的方法，其特征在于所述步驟E中的生長培養(yǎng)基為加有1/2WPM ,4.0 mg/L 6_ΒΑ、0· I mg/L IBA、30 g/L蔗糖和6. 7 g/L瓊脂的 pH為5.8 6· O的培養(yǎng)基。
全文摘要
本發(fā)明屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種黃連木快速繁殖的方法。包括選取種子、消毒、培養(yǎng)、取材和增殖培養(yǎng)五個步驟。本發(fā)明在黃連木種子長成莖尖長1～2cm，子葉變綠展平，并長出兩片小真葉，且全長3～4cm的無菌幼苗植株后，取出植株，切割成三部分，將莖尖接于培養(yǎng)基中，再將剩下的子葉節(jié)也接種在培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。通過采用本發(fā)明方法，不僅操作簡單，而且減少了切割操作對子葉節(jié)的傷害，大大避免在取子葉節(jié)的時候?qū)ψ尤~節(jié)的傷害，本發(fā)明的莖尖組織培養(yǎng)后剩下的子葉節(jié)也可以組織培養(yǎng)，大大提高了材料利用率。
文檔編號A01H4/00GK103053421SQ20131000450
公開日2013年4月24日 申請日期2013年1月7日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月7日
發(fā)明者施江, 辛莉, 郭倩, 戴凌峰, 馬香麗, 史國安 申請人:河南科技大學(xué)