蘋果砧木m9的組培快速育苗方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蘋果砧木M9的組培快速育苗方法，它包括以下步驟：(1)無菌系建立選擇蘋果砧木M9單株營養(yǎng)枝，剪取帶頂芽莖段，接入誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)，所述培養(yǎng)基為在1升MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成：白砂糖25g瓊脂粉5g6-芐氨基嘌呤0.2-1.0mg萘乙酸0.2-0.6mg；(2)擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)放入擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，所述培養(yǎng)基為在1升MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成：白砂糖25g瓊脂粉5g6-芐氨基嘌呤0.2-1.0mg萘乙酸0.2-0.6mg水解酪蛋白0.2-0.5g；(3)生根培養(yǎng)放入生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根培養(yǎng)，所述培養(yǎng)基為在1升1/3MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成：白砂糖25g瓊脂粉5g吲哚丁酸0.05-0.12mg；(4)煉苗培養(yǎng)和移栽。
【專利說明】蘋果砧木M9的組培快速育苗方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體是一種通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖蘋果砧木M9的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蘋果矮化栽培是世界蘋果栽培的發(fā)展趨勢，因此，在發(fā)展矮密蘋果栽培時，因地制宜的選擇矮砧品種非常重要，蘋果砧木M9的優(yōu)點是樹體矮小，適于密植結(jié)果早，投產(chǎn)快，產(chǎn)量高果實品質(zhì)好管理方便，降低生產(chǎn)成本。
[0003]植物組織培養(yǎng)方法是利用植物細(xì)胞的全能性，即組成植物的每一個細(xì)胞都具有發(fā)育成為一個完整植株的潛在能力，采取植物上的單個細(xì)胞、細(xì)胞團(tuán)、分生組織或器官的一部分，通過人工配置不同營養(yǎng)成分和激素的培養(yǎng)基來培養(yǎng)并調(diào)控其發(fā)育，使這些細(xì)胞、組織等形成成千上萬個小植株并且保持了母本植株的全部的優(yōu)良性狀。這種方法可以在短時間內(nèi)獲得大量的組培苗，并能在人工控制條件下一年四季生產(chǎn)，因而可以實現(xiàn)種苗繁殖的工廠化生產(chǎn)，在較小的面積內(nèi)進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)，無需占用大量土地，可以有效的降低生產(chǎn)成本，實現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)。
[0004]在現(xiàn)有技術(shù)中，蘋果砧木M9組培苗擴(kuò)繁系數(shù)低，生根困難，移栽成活率低，難以實現(xiàn)大規(guī)模工廠化生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種蘋果砧木M9的組培快速育苗方法。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種蘋果砧木M9的組培快速育苗方法，它包括以下步驟:
(1)無菌系建立選擇大田栽培的盛果期優(yōu)良蘋果砧木M9單株健壯營養(yǎng)枝作為外植體，剪取帶頂芽或側(cè)芽的莖段，經(jīng)洗潔精、酒精、汞溶液消毒后切成長1.5-2cm單芽莖段，接入誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)，該誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為在I升MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g6-芐氨基嘌呤0.2-1.0mg萘乙酸0.2-0.6mg,培養(yǎng)條件:溫度18-22°C，濕度55-75%，光照強度1000-1800Lx ; (2)擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)待步驟⑴中的初代培養(yǎng)材料長出1-2片真葉時，切成長0.5-lcm的莖段放入擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，所述擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)基為在I升MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g6-芐氨基嘌呤0.2-1.0mg萘乙酸0.2-0.6mg水解酪蛋白0.2-0.5g，培養(yǎng)條件:溫度22-25°C，濕度55-75%，光照強度1800_2800Lx ； (3)生根培養(yǎng)選取步驟(2)中2_6cm長擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)材料，切成1.6-2.0cm長的帶頂芽或側(cè)芽莖段放入生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根培養(yǎng)，所述生根培養(yǎng)基為在I升1/3MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g吲哚丁酸0.05-0.12mg,培養(yǎng)條件:溫度22-25°C，濕度55-75 %，光照強度1800-2800LX ； (4)煉苗培養(yǎng)和移栽包括如下環(huán)節(jié):閉瓶鍛煉、開瓶鍛煉、移栽到蛭石基質(zhì)、移栽到由細(xì)砂石、田園土、牛糞組成的營養(yǎng)土中。
[0007]優(yōu)選的，所述誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為在I升MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g6-節(jié)氨基嘌呤0.8mg萘乙酸0.5mg ;所述擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)基為在I升MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g6-芐氨基嘌呤
0.8mg萘乙酸0.5mg水解酪蛋白0.4g ;所述生根培養(yǎng)基為在I升1/3MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g吲哚丁酸0.1mg0
[0008]針對培養(yǎng)基組成及其配比與無菌系建立、擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)等階段培養(yǎng)效果的關(guān)系或影響，發(fā)明人做了實驗研究，為了進(jìn)一步闡述本發(fā)明，將實驗數(shù)據(jù)和研究結(jié)果分述如下:
[0009]
【權(quán)利要求】
1.一種蘋果砧木M9的組培快速育苗方法，其特征在于，它包括以下步驟:⑴無菌系建立選擇大田栽培的盛果期優(yōu)良蘋果砧木M9單株健壯營養(yǎng)枝作為外植體，剪取帶頂芽或側(cè)芽的莖段，經(jīng)洗潔精、酒精、汞溶液消毒后切成長1.5-2cm單芽莖段，接入誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)，該誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為在1升MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g6-芐氨基嘌呤0.2-1.0mg萘乙酸0.2-0.6mg，培養(yǎng)條件:溫度18_22°C，濕度55-75%，光照強度1000-1800LX ; (2)擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)待步驟(1)中的初代培養(yǎng)材料長出1-2片真葉時，切成長0.5-lcm的莖段放入擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，所述擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)基為在I升MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g6-芐氨基嘌呤0.2-1.0mg萘乙酸0.2-0.6mg水解酪蛋白0.2-0.5g，培養(yǎng)條件:溫度22-25°C，濕度55-75%，光照強度1800-2800LX ; (3)生根培養(yǎng)選取步驟(2)中2_6cm長擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)材料，切成1.6-2.0cm長的帶頂芽或側(cè)芽莖段放入生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根培養(yǎng)，所述生根培養(yǎng)基為在1升1/3MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g吲哚丁酸 0.05-0.12mg，培養(yǎng)條件:溫度 22-25°C，濕度 55-75%，光照強度 1800_2800Lx ； (4)煉苗培養(yǎng)和移栽包括如下環(huán)節(jié):閉瓶鍛煉、開瓶鍛煉、移栽到蛭石基質(zhì)、移栽到由細(xì)砂石、田園土、牛糞組成的營養(yǎng)土中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果砧木M9的組培快速育苗方法，其特征在于，所述誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為在I升MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g6-芐氨基嘌呤 0.8mg萘乙酸0.5mg ;所述擴(kuò)繁繼代培養(yǎng)基為在I升MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g6-節(jié)氨基嘌呤0.8mg萘乙酸0.5mg水解酪蛋白0.4g ;所述生根培養(yǎng)基為在I升1/3MS基本培養(yǎng)基中加入下述的原料及其配比制成:白砂糖25g瓊脂粉5g吲哚丁酸0.1mg0
【文檔編號】A01H4/00GK103931492SQ201310046571
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2013年1月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月23日
【發(fā)明者】王艷芳, 李海青, 楊映紅, 楊瑞斌, 王花, 李幗英, 楊俊霞, 郭志剛, 趙新紅, 周代琴, 馬建芳 申請人:天水市果樹研究所