少花龍葵根組織培養(yǎng)方法建立的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明的少花龍葵根組織培養(yǎng)方法是首先利用15%次氯酸鈉溶液消毒種子，時間15分鐘，然后在超凈工作臺把用無菌水清洗后的種子放置在MS基本培養(yǎng)基上，進行光照培養(yǎng)，待20天后取無菌苗的根，制備外植體，放置在誘芽培養(yǎng)基上培養(yǎng)，待芽長到2-3cm時切下來，放置在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)，待幼苗的根長到3-4cm時，即可煉苗移栽。
【專利說明】少花龍葵根組織培養(yǎng)方法建立

【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于植物基因工程【技術領域】，具體涉及少花龍葵根組織培養(yǎng)方法建立。

【背景技術】
[0002]少花龍葵{Solariumphoteinocarpum Nakamuraet Odashima)別名白花菜、扣子草等，是茄科(Solanaceae)茄屬多年生草本植物，分布于我國大部分地區(qū)、多生長在果園、田邊、村邊路旁等。少花龍葵主治痢疾、高血壓和黃疸等。外治皮膚濕毒、烏皰和老鼠咬傷等。它不僅具有重要的藥用價值，同時也可以食用，所以越來越受到人們的關注。目前人們已經(jīng)建立少花龍葵子葉、龍葵葉、原生質(zhì)體和幼莖表皮細胞再生體系，曾祥偉等利用野生少花龍葵種子萌發(fā)后長出的無菌苗子葉作為外植體，通過在MS培養(yǎng)基中添加一定濃度的
6-BA和NAA誘導分化出胚狀體，再通過對幼苗誘導生根最后培養(yǎng)成完整植株。劉連芬等利用龍葵幼苗的葉片經(jīng)表面消毒后制備外植體，在MS培養(yǎng)基中添加0.5mg/L 6BA和2 mg/LIAA能夠誘導出芽，在MS培養(yǎng)基中添加0.05mg/L 6BA和1 mg/L IAA能夠誘導出根。王光遠等利用從龍葵葉肉細胞分離出的原生質(zhì)體進行組織培養(yǎng)，最后再生成完整的植株。何奕昆等利用龍葵表皮及皮下1-6層細胞為實驗材料，通過添加一定濃度的6-BA和2，4-D，能夠誘導出幼芽。但截至目前為止未見根組織培養(yǎng)方法相關研究。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的少花龍葵根組織培養(yǎng)方法是首先利用15%次氯酸鈉溶液消毒種子，時間15分鐘，然后在超凈工作臺用無菌水清洗5次，把消毒后的種子放置在MS基本培養(yǎng)基上，25°C光照培養(yǎng)，待培養(yǎng)20天后在超凈工作臺取無菌苗的根，用無菌水洗去瓊脂后切成l-2cm數(shù)段，作為外植體，放置誘芽培養(yǎng)基培養(yǎng)，該培養(yǎng)基配方是在MS基本培養(yǎng)基中添加lmg/L 6BA 、0.25 mg/L TDZ和0.2 mg/L IAA。待幼芽長到2_3cm時切下，放置在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基配方是在MS基本培養(yǎng)基添加0.5mg/L NAA ;待幼苗的根長到3-4cm時，即可煉苗移栽。
[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種少花龍葵根組織培養(yǎng)方法。
[0005]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明第一方面提供了一種少花龍葵種子的消毒方法。
[0006]本發(fā)明的第二個方面提供了少花龍葵根誘芽培養(yǎng)基的配方。
[0007]本發(fā)明的第三個方面提供了芽誘導生根培養(yǎng)基的配方。
[0008]關于少花龍葵根組織培養(yǎng)方法，國內(nèi)外至今未見報道。本發(fā)明首先利用15%次氯酸鈉溶液消毒種子，然后利用培養(yǎng)20天后無菌苗的根，制備外植體，進行誘芽培養(yǎng)，待芽長到2-3cm時切下來，放置在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)，待幼苗的根長到3-4cm時，即可煉苗移栽。
【權利要求】
1.利用15%次氯酸鈉溶液消毒少花龍葵種子，時間15分鐘，然后在超凈工作臺用無菌水清洗5次，用于制備無菌苗。
2.在超凈工作臺取生長20天少花龍葵無菌苗的根，用無菌水清洗后切成l-2cm數(shù)段，放置在誘芽培養(yǎng)基培養(yǎng)，該培養(yǎng)基配方是在MS基本培養(yǎng)基中添加lmg/L 6BA 、0.25 mg/LTDZ 和 0.2 mg/L ΙΑΑ。
3.待幼芽長到2-3cm時切下，放置在生根培養(yǎng)基上誘導生根，該培養(yǎng)基配方是在MS基本培養(yǎng)基中添加0.5mg/L NAA，待幼苗的根長到3_4cm時，即可煉苗移栽。
【文檔編號】A01H4/00GK104273026SQ201310272723
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2013年7月2日 優(yōu)先權日:2013年7月2日
【發(fā)明者】不公告發(fā)明人 申請人:四川農(nóng)業(yè)大學