優(yōu)質(zhì)肉雞肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因聚合的選育方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種優(yōu)質(zhì)肉雞肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因聚合的選育方法，其包括以下步驟：以連續(xù)兩個世代優(yōu)質(zhì)肉雞基因組DNA為模版，在PCR條件下，利用三對引物分別擴(kuò)增基因；根據(jù)瓊脂糖凝膠電泳對第一引物、第二引物、第三引物擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行大小判定，然后采用DNA測序技術(shù)篩選到腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因5’非編碼區(qū)，以及脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因內(nèi)含子2共有三個堿基的突變；再利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對這三個位點(diǎn)的SNPs進(jìn)行基因分型和基因頻率分析。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)優(yōu)勢基因型的有利聚合，同時能較全面的探尋雞肉質(zhì)風(fēng)味性狀的遺傳機(jī)制。
【專利說明】優(yōu)質(zhì)肉雞肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因聚合的選育方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種選育方法，特別涉及一種優(yōu)質(zhì)肉雞肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因聚合的選育方法。
技術(shù)背景
[0002]改善與提高肉質(zhì)風(fēng)味已成為優(yōu)質(zhì)肉雞育種研究的重要方向，其中，肌苷酸和肌內(nèi)脂肪含量是影響肉質(zhì)風(fēng)味性狀的重要因素。但肌苷酸和肌內(nèi)脂肪均受多種因素影響，常規(guī)選育進(jìn)展較慢；因此利用肌苷酸及肌內(nèi)脂肪性狀的相關(guān)候選基因，應(yīng)用分子標(biāo)記輔助選擇加快遺傳進(jìn)展是當(dāng)前較為有效的手段，從而從遺傳水平上進(jìn)行雞肉質(zhì)風(fēng)味育種改良。國內(nèi)外對肌肉品質(zhì)性狀分子標(biāo)記篩選和標(biāo)記輔助選擇的研究已具備一定基礎(chǔ)，特別對一些單基因性狀標(biāo)記輔助選擇已取得了一定的進(jìn)展。但肉質(zhì)性狀是一個受多基因控制的綜合性狀，僅僅從單基因入手進(jìn) 行分子輔助育種，往往不能達(dá)到全面改良肉品質(zhì)，最終培育優(yōu)質(zhì)雞的目的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種優(yōu)質(zhì)肉雞肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因聚合的選育方法，其實(shí)現(xiàn)優(yōu)勢基因型的有利聚合，同時能較全面的探尋雞肉質(zhì)風(fēng)味性狀的遺傳機(jī)制。
[0004]本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案來解決上述技術(shù)問題的:一種優(yōu)質(zhì)肉雞肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因聚合的選育方法，其特征在于，其包括以下步驟:
[0005]步驟一，以連續(xù)兩個世代優(yōu)質(zhì)肉雞基因組DNA為模版，在PCR條件下，利用第一引物、第二引物、第三引物，分別擴(kuò)增ADSL、GARS-AIRS-GART、A-FABP基因；
[0006]步驟二，根據(jù)瓊脂糖凝膠電泳對第一引物、第二引物、第三引物擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行大小判定，然后采用DNA測序技術(shù)篩選到腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因5’非編碼區(qū)，以及脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因內(nèi)含子2共有三個堿基的突變；
[0007]步驟三，再利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對這三個位點(diǎn)的SNPs進(jìn)行基因分型和基因頻率分析，分析優(yōu)質(zhì)肉雞個體多態(tài)性與肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量的關(guān)系及不同基因型組合與肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量之間的關(guān)系，并上溯親代，跟蹤子代，檢測優(yōu)質(zhì)肉雞個體的基因型組合與肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量的關(guān)系，分析不同基因型在肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量性狀形成中的貢獻(xiàn)，挑選高肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量個體的基因型組合，分析高肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量個體基因型組合形成的選配方式，應(yīng)用這些選配方式形成優(yōu)質(zhì)肉雞高肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量的多基因聚合核心群。
[0008]優(yōu)選地，所述第一引物如下:上游引物IF:5’ -TCTCCTTCCACAGGCTCAA-3’ ；下游引物IR:5’ -AACTGCTGCACTGCACGAT-3’ ；所述第二引物P2如下:上游引物2F:5’-ACAGTTGCCAGTCTGATTA-3’ ；下游引物 2R:5’-CATCGCCAGAGTTAGAAGT-3’ ；所述第三引物P3如下:上游引物3F:5’ -GGAATGTGACAACGCTAA-3’ ；下游引物3R:5， -CGGATAAGGAGGGCAGAG-3，。
[0009]優(yōu)選地，所述第一引物擴(kuò)增腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，用于篩選優(yōu)質(zhì)肉雞腺苷琥珀酸裂解酶基因位點(diǎn)的突變，第二引物擴(kuò)增甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因5’非編碼區(qū)，用于篩選優(yōu)質(zhì)肉雞甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因位點(diǎn)的突變，第三引物擴(kuò)增脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因內(nèi)含子2，用于篩選優(yōu)質(zhì)肉雞脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因位點(diǎn)的突變。
[0010]本發(fā)明具有如下積極效果:本發(fā)明實(shí)現(xiàn)優(yōu)勢基因型的有利聚合，同時能較全面的探尋雞肉質(zhì)風(fēng)味性狀的遺傳機(jī)制。
【具體實(shí)施方式】
[0011]為了使本發(fā)明的內(nèi)容更容易被清楚的理解，下面根據(jù)具體實(shí)施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
[0012]基因聚合是將分散在不同品種中的有利基因聚合到同一個基因組中，在分離世代中通過分子標(biāo)記選擇含有多個目標(biāo)基因的個體，實(shí)現(xiàn)有利基因的聚合。采用基因聚合手段可以實(shí)現(xiàn)真正意義上的分子育種。故研究多個肉質(zhì)候選基因的聚合效應(yīng)將為加快地方雞種優(yōu)良種質(zhì)特性的開發(fā)與利用，為優(yōu)質(zhì)雞的產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供技術(shù)支撐。
[0013]本發(fā)明以ADSL、GARS-AIRS-GART、A-FABP基因?yàn)檠芯繉ο?，結(jié)果在八種聚合類型中，有利單基因聚合后的CCAAMM基因型胸肌肌苷酸含量(3.077mg/g)顯著高于其它非完全有利基因型聚合個體。除了 CCBBMM型，CCAAMM型的肌內(nèi)脂肪含量顯著高于其它聚合基因型(P〈0.05)。通過基因聚合效應(yīng) 的初步驗(yàn)證，ADSL、GART、A-FABP基因存在聚合效應(yīng)，聚合基因型可作為大恒優(yōu)質(zhì)肉雞肉質(zhì)性狀有效的候選標(biāo)記?；蚓酆先后w可適當(dāng)調(diào)整擴(kuò)大，有利于更多優(yōu)勢基因型個體篩選 。分子標(biāo)記輔助選擇是進(jìn)行基因聚合育種一種有效途徑，同時，基因聚合育種在優(yōu)質(zhì)肉雞分子育種中是可行的。
[0014]本發(fā)明優(yōu)質(zhì)肉雞肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因聚合的選育方法包括以下步驟:
[0015]步驟一，以連續(xù)兩個世代優(yōu)質(zhì)肉雞基因組DNA為模版，在PCR (聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，PolymeraseChainReaction)條件下,利用三對引物P1、P2和P3(第一引物Pl,第二引物P2,第三引物P3)，分別擴(kuò)增ADSL、GARS-AIRS-GART、A-FABP基因，其中:
[0016]所述第一引物Pl如下:上游引物IF:5’ -TCTCCTTCCACAGGCTCAA-3’;下游引物IR:5， -AACTGCTGCACTGCACGAT-3，；
[0017]所述第二引物P2如下:上游引物2F:5’ -ACAGTTGCCAGTCTGATTA-3’;下游引物2R:5， -CATCGCCAGAGTTAGAAGT-3，；
[0018]所述第三引物P3如下:上游引物3F:5’ -GGAATGTGACAACGCTAA-3’ ；下游引物3R:5， -CGGATAAGGAGGGCAGAG-3，；
[0019]第一引物Pl擴(kuò)增腺苷琥珀酸裂解酶(ADSL)基因外顯子9，用于篩選優(yōu)質(zhì)肉雞腺苷琥珀酸裂解酶基因位點(diǎn)的突變；
[0020]第二引物P2擴(kuò)增甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶(GARS-AIRS-GART)基因5’非編碼區(qū)，用于篩選優(yōu)質(zhì)肉雞甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因位點(diǎn)的突變；
[0021]第三引物P3擴(kuò)增脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白(A-FABP)基因內(nèi)含子2，用于篩選優(yōu)質(zhì)肉雞脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因位點(diǎn)的突變；
[0022]步驟二，根據(jù)瓊脂糖凝膠電泳對三對引物擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行大小判定，然后采用DNA測序技術(shù)篩選到腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因5’非編碼區(qū)，以及脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因內(nèi)含子2共有三個堿基的突變；
[0023]步驟三，再利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對這三個位點(diǎn)的SNPs進(jìn)行基因分型和基因頻率分析，分析優(yōu)質(zhì)肉雞個體多態(tài)性與肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量的關(guān)系及不同基因型組合與肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量之間的關(guān)系，并上溯親代，跟蹤子代，檢測優(yōu)質(zhì)肉雞個體的基因型組合與肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量的關(guān)系，分析不同基因型在肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量性狀形成中的貢獻(xiàn)，挑選高肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量個體的基因型組合，分析高肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量個體基因型組合形成的選配方式，應(yīng)用這些選配方式形成優(yōu)質(zhì)肉雞高肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量的多基因聚合核心群。
[0024]所述PCR 擴(kuò)增的條件是:10μ L 擴(kuò)增體系:2XLong Taq PCR MasterMix 5μ L ；ddH20, 3.5 μ L ;上、下游引物(F、R) (10pmol/ul)，各 0.5μ L ;DNA 模板(50ng/μ L)，0.5 μ L ；
[0025]PCR反應(yīng)程序如下:1)利用引物Pl的PCR反應(yīng)程序?yàn)?95°C預(yù)變性3min ;95°C變性30s，56°C退火30s，72°C延伸50s，共進(jìn)行35個循環(huán);72°C延伸10min，4°C保存。2)利用引物P2的PCR反應(yīng)程序?yàn)?95°C預(yù)變性3min ;95°C變性30s，53。。退火30s, 72°C延伸50s，共進(jìn)行35個循環(huán)；72°C延伸10min，4°C保存。3)利用引物Pl的PCR反應(yīng)程序?yàn)?95°C預(yù)變性3min ;95°C變性30s，59°C退火30s，72。。延伸50s，共進(jìn)行35個循環(huán);72°C延伸IOmin,4°C保存。
[0026]所述腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9在10191bp存在C/T的突變，甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因5’非編碼區(qū)在153bp存在C/T的突變，以及脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因內(nèi)含子2在1684bp存在C/T的突變；
[0027]所述基因分型是用12%聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測和分析引物P1、P2和P3的PCR產(chǎn)物，結(jié)果如下:
[0028]第一引物Pl位點(diǎn):純合型CC在10191bp位的堿基是C，雜合型CT在10191bp位的堿基是c/τ，純合型TT在10191bp位的堿基是T ；
[0029]第二引物P2位點(diǎn):純合型AA在153bp位的堿基是C，雜合型AB在153bp位的堿基是C/T，純合型BB在153bp位的堿基是T ；
[0030]第三引物P3位點(diǎn):純合型MM在1684bp位的堿基是C，雜合型MN在1684bp位的堿基是C/T，純合型NN在1684bp位的堿基是T ；
[0031]所述有利單基因聚合組合為:CCAAMM (F0代和Fl代)；
[0032]所述不同基因型在肌苷酸含量與肌內(nèi)脂肪含量性狀形成中的貢獻(xiàn)率為，有利單基因聚合后的CCAAMM基因型個體肌苷酸含量(3.077mg/g)顯著高于其它非完全有利基因型聚合個體，比基因型CC的高7.96%，比基因型AA的高9.91%，、比基因型麗的高12.21% ;除了 CCBBMM型，CCAAMM型的肌內(nèi)脂肪含量顯著高于其它聚合基因型，比基因型CC的高5.49%,比基因型AA的高5.68%,、比基因型MM的高6.11%。
[0033]利用引物P1、P2和P3分別對腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9、甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因5’非編碼區(qū)和脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因內(nèi)含子2的PCR擴(kuò)增及其多態(tài)性的檢測。
[0034]1、優(yōu)質(zhì)肉雞血樣的采集及處理
[0035]用注射器從大恒優(yōu)質(zhì)肉雞翼下靜脈處采血2mL，注入真空采血管(EDTA.K2抗凝)中。冰盒保存，帶回實(shí)驗(yàn)室。3000r/min離心10min,4°C保存?zhèn)溆谩?br> [0036]本實(shí)施例采用優(yōu)質(zhì)肉雞血樣300份，采自四川大恒家禽育種有限公司。
[0037]2、血樣基因組DNA的提取、純化
[0038](I)血樣經(jīng)離 心移去血清后取10 μ L,加PBS溶液稀釋至250 μ L,后加入500 μ L細(xì)菌裂解液Buffer API (1.5mL離心管中)，渦旋振蕩IOs ；
[0039](2)加入 100 μ L 蛋白沉淀液 Buffer AP2,潤旋振蕩 10s, 12000g 離心 IOmin ；
[0040](3)取上清液600 μ L,加入DNA制備柱中(制備柱預(yù)先置于2mL離心管中)，12000g離心Imin，棄濾液；
[0041](4)制備柱中加入700 μ L洗滌液Buffer W1A，室溫放置2min，12000g離心lmin，
棄濾液；
[0042](5)向制備柱中加入800 μ L去鹽液Buffer W2,12000g離心lmin,棄濾液；再加入500 μ L Buffer W2,12000g 離心 lmin,棄濾液；12000g 離心 lmin ;
[0043](6)將制備柱置于1.5mL離心管中，在silica膜中央加入200 μ L Buffer TE (預(yù)熱到65°C)，室溫靜置lmin ;12000g離心Imin洗脫DNA。
[0044]基因組DNA檢測:采用1.5%瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度法檢測DNA純度和濃度。
[0045]1.5%瓊脂糖凝膠配置:稱取瓊脂糖0.225g，加入15mL0.5 X TBE溶液，微波溶解，再加入0.75 μ L Gold View核酸染料，制膠(水平膠)；電泳:將5μ L DNA溶與I μ L 6 X DNALoading Buffer混勻，上樣，120V條件下在水平電泳槽中于0.5XTBE電泳緩沖液中電泳30min,檢測DNA電泳條帶,凝膠成像系統(tǒng)照相保存。
[0046]紫外分光光度計(jì)測定核酸:在260nm和280nm處測定核酸紫外吸光度值，即0D260、0D280和0D260/0D280值，檢測DNA濃度和純度，確保無蛋白質(zhì)、RNA及小分子物質(zhì)污染。
[0047]突變位點(diǎn)檢測，采用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)，具體步驟如下:
[0048](I) 12%聚丙烯酰胺凝膠配置:量取30%丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺預(yù)混液(29:1)8mL，I X TBE溶液12mL，加入10%過硫酸銨120 μ L，TEMED 24 μ L，于冰上混勻，迅速灌膠(垂直膠)。
[0049](2) PCR產(chǎn)物預(yù)變性:將20 μ L LIS-SSCP上樣緩沖液與IyL PCR產(chǎn)物混勻，97°C變性2min，室溫放置。
[0050](3)電泳:取IOyL PCR變性產(chǎn)物，上樣，120V條件下在垂直電泳槽中于IXTBE電泳緩沖液中冰浴電泳2?4h，檢測變性PCR產(chǎn)物的單鏈構(gòu)象多態(tài)性。
[0051](4)銀染:膠鏟輕取下凝膠，雙蒸水洗滌30s ;加入IOOmL 0.l%AgN03染色液染色I(xiàn)Omin (搖床約30r/min),再用雙蒸水洗漆IOs ;采用IOOmL四硼酸鈉顯色液顯色,加入甲醒500 μ L輕搖顯色I(xiàn)Omin至獲得滿意效果，雙蒸水洗滌兩遍；凝膠成像系統(tǒng)照相保存。
[0052]根據(jù)非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果，挑選不同基因型個體的PCR產(chǎn)物經(jīng)AxyPrep DNA凝膠回收試劑盒(Axygen公司)純化后送上海Invitrogen公司進(jìn)行序列測定。
[0053]實(shí)驗(yàn)過程是先利用聚丙烯酰胺凝膠電泳篩選到腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因5’非編碼區(qū)，以及脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因內(nèi)含子2共有三個堿基的突變；再采用DNA測序技術(shù)對這三個SNPs位點(diǎn)不同基因型進(jìn)行驗(yàn)證，然后進(jìn)行基因分型和基因型頻率分析。
[0054]以上所述具體實(shí)施例，對本發(fā)明的解決的技術(shù)問題、技術(shù)方案和有益效果進(jìn)行了進(jìn)一步詳細(xì)說明，所應(yīng)理解的是，以上所述僅為本發(fā)明的具體實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所做的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范 圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種優(yōu)質(zhì)肉雞肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因聚合的選育方法，其特征在于，其包括以下步驟: 步驟一，以連續(xù)兩個世代優(yōu)質(zhì)肉雞基因組DNA為模版，在PCR條件下，利用第一引物、第二引物、第三引物，分別擴(kuò)增ADSL、GARS-AIRS-GART、A-FABP基因； 步驟二，根據(jù)瓊脂糖凝膠電泳對第一引物、第二引物、第三引物擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行大小判定，然后采用DNA測序技術(shù)篩選到腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因5’非編碼區(qū)，以及脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因內(nèi)含子2共有三個堿基的突變； 步驟三，再利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對這三個位點(diǎn)的SNPs進(jìn)行基因分型和基因頻率分析，分析優(yōu)質(zhì)肉雞個體多態(tài)性與肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量的關(guān)系及不同基因型組合與肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量之間的關(guān)系，并上溯親代，跟蹤子代，檢測優(yōu)質(zhì)肉雞個體的基因型組合與肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量的關(guān)系，分析不同基因型在肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量性狀形成中的貢獻(xiàn)，挑選高肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量個體的基因型組合，分析高肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量個體基因型組合形成的選配方式·，應(yīng)用這些選配方式形成優(yōu)質(zhì)肉雞高肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量的多基因聚合核心群。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述優(yōu)質(zhì)肉雞肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因聚合的選育方法，其特征在于，所述第一引物如下:上游引物IF: 5 ’ -TCTCCTTCCACAGGCTCAA-3 ’ ；下游引物IR:5’ -AACTGCTGCACTGCACGAT-3，;所述第二引物P2如下:上游引物2F:5’-ACAGTTGCCAGTCTGATTA-3’ ；下游引物 2R:5’-CATCGCCAGAGTTAGAAGT-3’ ；所述第三引物P3如下:上游引物3F:5’ -GGAATGTGACAACGCTAA-3’ ；下游引物3R:5， -CGGATAAGGAGGGCAGAG-3，。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述優(yōu)質(zhì)肉雞肌苷酸與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因聚合的選育方法，其特征在于，所述第一引物擴(kuò)增腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，用于篩選優(yōu)質(zhì)肉雞腺苷琥珀酸裂解酶基因位點(diǎn)的突變，第二引物擴(kuò)增甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因5’非編碼區(qū)，用于篩選優(yōu)質(zhì)肉雞甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲基酶基因位點(diǎn)的突變，第三引物擴(kuò)增脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因內(nèi)含子2，用于篩選優(yōu)質(zhì)肉雞脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白基因位點(diǎn)的突變。
【文檔編號】A01K67/027GK103436630SQ201310436012
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2013年9月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月23日
【發(fā)明者】蔣小松, 張?jiān)鰳s, 杜華銳, 邱莫寒, 李晴云, 楊朝武, 李雯, 宋小燕, 余春林, 熊霞 申請人:四川省畜牧科學(xué)研究院