復(fù)合益生菌發(fā)酵豆粕飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種復(fù)合益生菌發(fā)酵豆粕飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法；所述方法包括如下步驟：將粉碎后的豆粕、水和復(fù)合益生菌，攪拌均勻，密封，進行發(fā)酵，即可。本發(fā)明方法采用微生物固態(tài)發(fā)酵工藝，所用原料無需滅菌，發(fā)酵工藝簡單，生產(chǎn)成本較低，大豆異黃酮苷元活性較高。本發(fā)明制備的發(fā)酵豆粕飼料具有濃郁的香味，可大大提高動物的采食量，飼料為金黃色，質(zhì)地松軟，發(fā)酵后大豆異黃酮活性極大提高。此工藝方法干物質(zhì)回收率較高。
【專利說明】復(fù)合益生菌發(fā)酵豆粕飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種畜牧【技術(shù)領(lǐng)域】的大豆異黃酮苷元制備方法，具體地是一種復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]大豆異黃酮(soy isoflavones, SIF)是大豆生長過程中形成的次級代謝產(chǎn)物。主要分布在大豆的種皮、胚軸和子葉中。迄今為止，大豆中已知的異黃酮共有12種異構(gòu)體，分為游離型的苷元(Aglycon)和結(jié)合型的糖苷(Glycosides)兩類。苷元占總量的2?3%，包括染料木素(Genistein)、大豆苷元(Daidzein)和黃豆黃素(Glycitein);糖苷型占總量的97?98%,主要以染料木苷(Genistin)、大豆苷(Daidzin)、黃豆苷(Glycitin)和丙二酰染料木苷、丙二酰大豆苷、丙二酰黃豆苷形式存在，約占總量的95%。
[0003]SIF具有多種生物學(xué)活性，大量的動物實驗及流行病學(xué)研究證明了 SIF不僅具有降低血脂，抗動脈粥樣硬化的作用，還具有神經(jīng)保護和抗神經(jīng)退變的作用、預(yù)防骨質(zhì)疏松、抗癌、免疫調(diào)節(jié)、維持血管彈性及抗氧化的作用。
[0004]大豆異黃酮對畜禽具有促進生長、提高泌乳性能、促進乳腺發(fā)育、提高機體免疫力、抗氧化、改善繁殖性能等多種生理功能。Greiner等(2001)發(fā)現(xiàn)飼糧中添加大豆染料木素(200mg / kg)和大豆苷元(200或400mg / kg)能顯著提高豬群的生長。Cassidy(2003)試驗發(fā)現(xiàn)，禽類飼糧中添加10或20mg / kg ISO，胸肌重、體重、采食量均有顯著性提高。
[0005]豆柏是畜禽主要的蛋白質(zhì)飼料，約占飼料工業(yè)中蛋白源的63%。豆柏也是畜禽大豆異黃酮的主要來源。新近的研究表明，苷元類大豆異黃酮的活性顯著高于糖苷類大豆異黃酮，具有生理活性的成分主要是大豆異黃酮苷元，苷元更易被機體吸收。
[0006]豆柏中苷元形式的異黃酮含量很低，僅為大豆異黃酮的2?3%。目前獲得大豆異黃酮苷元的方法主要有以提取的大豆異黃酮為原料，一般采用酸解法和β_葡萄糖苷酶酶解法生產(chǎn)獲得。如發(fā)明專利CN1315322、CN1315323和CN1448394，美國專利(US5554519A)、日本專利(JP11-89589、JP8-214787)均公開了用酶水解大豆異黃酮苷的糖基生產(chǎn)大豆異黃酮苷元的方法，這些方法存在產(chǎn)量低、轉(zhuǎn)化效率低成本高、反應(yīng)條件苛刻和對機體健康有害等弊端，不能進行大規(guī)模推廣應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]針對現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明提供一種復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法。本發(fā)明以大豆柏為原料，采用分泌高活性β_葡萄糖苷酶的復(fù)合益生菌發(fā)酵的方法，提高豆柏中大豆異黃酮苷元轉(zhuǎn)化效率，生產(chǎn)高活性大豆異黃酮苷元復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏。復(fù)合益生菌發(fā)酵飼料的制備過程無需原料滅菌，工藝簡單，成本較低且大大提高了大豆異黃酮苷元的含量。
[0008]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的:
[0009]本發(fā)明提供一種復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，所述方法包括如下步驟:將粉碎后的豆柏、水和復(fù)合益生菌，攪拌均勻，密封，進行發(fā)酵，即可。
[0010]優(yōu)選地，所述粉碎后的豆柏、水和復(fù)合益生菌為如下各重量份數(shù):
[0011]粉碎后的豆柏53~74份，
[0012]水25 ~40 份，
[0013]復(fù)合益生菌1~7份。
[0014]優(yōu)選地，所述粉碎后的豆柏的粒徑為20~50目。
[0015]優(yōu)選地，所述粉碎后的豆柏的粒徑為40目。
[0016]優(yōu)選地，所述粉碎后的豆柏為58份，水為35份，復(fù)合益生菌為7份。
[0017]優(yōu)選地，所述發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度為25~40°C，發(fā)酵時間為72~360小時。
[0018]優(yōu)選地，所述發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度為40°C，發(fā)酵時間為360小時。
[0019]優(yōu)選地，所述復(fù)合益生菌為乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌。
[0020]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下的有益效果:
[0021](I)本發(fā)明方法所采用的原料無需滅菌，工藝簡單，生產(chǎn)成本較低和大豆異黃酮苷元轉(zhuǎn)化率高。
[0022](2)本發(fā)明方法制備的產(chǎn)品具有芳香味，可大大提高動物的采食量，飼料為金黃色，質(zhì)地松軟，發(fā)酵飼料中的大豆異黃酮苷元含有較高，另外DPPH清除能力和羥自由基清除能力提高，PH值降低，干物質(zhì)回收率高。
【具體實施方式】
[0023]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行詳細說明。以下實施例將有助于本領(lǐng)域的技術(shù)人員進一步理解本發(fā)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)指出的是，對本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進。這些都屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0024]本發(fā)明涉及的實施例1~4中采用的復(fù)合益生菌(乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌)購于上海創(chuàng)博生態(tài)工程有限公司，批號:120815，其中活菌數(shù)≥50X 108cfu/ml，乳酸菌數(shù) 12X108CFU/mL。
[0025]實施例1
[0026]本實施例涉及一種復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，所述方法包括如下步驟:
[0027]選取粉碎為20目的豆柏飼料55份，水分40份，乳酸桿菌5份，混合均勻，裝袋封口，35°C進行發(fā)酵培養(yǎng)72小時即為成品。
[0028]本實施例采用高效液相色譜檢測大豆苷,大豆黃素,黃豆黃苷,黃豆黃素,染料木苷和染料木素的含量，用PH計測定發(fā)酵前后的pH值和干物質(zhì)回收率。用試劑盒檢測發(fā)酵前后飼料中DPPH清除能力和羥自由基清除能力。
[0029]實施效果:本實施例方法制得的大豆異黃酮苷元的轉(zhuǎn)化率為85.30% ；pH為3.84 ;干物質(zhì)回收率為94.24% ；DPPH清除能力為70.70%和羥自由基清除能力為88.70%。
[0030]實施例2
[0031]本實施例涉及一種復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，所述方法包括如下步驟:[0032]選取粉碎為50目的豆柏飼料53份，水分40份，枯草芽孢桿菌7份，混合均勻，裝袋封口，25 °C進行發(fā)酵培養(yǎng)360小時即為成品。
[0033]本實施例采用高效液相色譜檢測大豆苷,大豆黃素,黃豆黃苷,黃豆黃素,染料木苷和染料木素的含量，用PH計測定發(fā)酵前后的pH值和干物質(zhì)回收率。用試劑盒檢測發(fā)酵前后飼料DPPH清除能力和羥自由基清除能力。
[0034]實施效果:本實施例方法制得的大豆異黃酮苷元的轉(zhuǎn)化率為81.02% ；pH為3.56 ;干物質(zhì)回收率為91.25% ；DPPH清除能力為73.88%和羥自由基清除能力為87.43%。
[0035]實施例3
[0036]本實施例涉及一種復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，所述方法包括如下步驟:
[0037]選取粉碎為20目的豆柏飼料62份，水分35份，酵母菌3份，混合均勻，裝袋封口，40°C進行發(fā)酵培養(yǎng)288小時即為成品。
[0038]本實施例采用高效液相色譜檢測大豆苷,大豆黃素,黃豆黃苷,黃豆黃素,染料木苷和染料木素的含量，用PH計測定發(fā)酵前后的pH值和干物質(zhì)回收率。用試劑盒檢測發(fā)酵前后飼料DPPH清除能力和羥自由基清除能力。
[0039]實施效果:本實施例制得的大豆異黃酮苷元的轉(zhuǎn)化率為82.14% ；pH為3.74 ;干物質(zhì)回收率為95.24% ；DPPH清除能力為76.14%和羥自由基清除能力為85.17%。
[0040]實施例4
[0041]本實施例涉及一種復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，所述方法包括如下步驟:
[0042]選取粉碎為30目的豆柏飼料74份，水分25份，酵母菌I份，混合均勻，裝袋封口，40°C進行發(fā)酵培養(yǎng)144小時即為成品。
[0043]本實施例采用高效液相色譜檢測大豆苷,大豆黃素,黃豆黃苷,黃豆黃素,染料木苷和染料木素的含量，用PH計測定發(fā)酵前后的pH值和干物質(zhì)回收率。用試劑盒檢測發(fā)酵前后飼料DPPH清除能力和羥自由基清除能力。
[0044]實施效果:本實施例制得的大豆異黃酮苷元的轉(zhuǎn)化率為83.10% ；pH為3.91 ;干物質(zhì)回收率為96.34% ；DPPH清除能力為73.50%和羥自由基清除能力為85.54%。
[0045]以上對本發(fā)明的具體實施例進行了描述。需要理解的是，本發(fā)明并不局限于上述特定實施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在權(quán)利要求的范圍內(nèi)做出各種變形或修改，這并不影響本發(fā)明的實質(zhì)內(nèi)容。
【權(quán)利要求】
1.一種復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟:將粉碎后的豆柏、水和復(fù)合益生菌，攪拌均勻，密封，進行發(fā)酵，即可。
2.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，其特征在于，所述粉碎后的豆柏、水和復(fù)合益生菌為如下各重量份數(shù): 粉碎后的豆柏53?74份， 水25?40份， 復(fù)合益生菌I?7份。
3.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，其特征在于，所述粉碎后的豆柏的粒徑為20?50目。
4.如權(quán)利要求1或3所述的復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，其特征在于，所述粉碎后的豆柏的粒徑為40目。
5.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，其特征在于，所述粉碎后的豆柏為58份，水為35份，復(fù)合益生菌為7份。
6.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，其特征在于，所述發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度為25?40°C，發(fā)酵時間為72?360小時。
7.如權(quán)利要求6所述的復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，其特征在于，所述發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度為40°C，發(fā)酵時間為360小時。
8.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合益生菌發(fā)酵豆柏飼料提高大豆異黃酮轉(zhuǎn)化率的方法，其特征在于，所述復(fù)合益生菌為乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌。
【文檔編號】A23K1/14GK103652346SQ201310557000
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年11月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月11日
【發(fā)明者】徐建雄, 楊守鳳, 包健, 盛永帥 申請人:上海交通大學(xué)