一種馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液，其中，解凍液包括A液和脫脂奶，A液包括葡萄糖、棉子糖、D-乳糖單水合物、檸檬酸三鈉、檸檬酸鉀和HEPES。解凍液的配制方法為：稱取A液的各種組分放入無(wú)菌燒杯中，加雙蒸水溶解后，定容、過(guò)濾、分裝、滅菌、密封，即得A液，向A液加入等量的脫脂奶混合均勻即可得到解凍液，其適用于馬屬動(dòng)物冷凍精液的解凍。本發(fā)明的有益效果是：配制簡(jiǎn)單，使用方便，馬屬動(dòng)物冷凍精液的解凍效果好，并且一液多用，省時(shí)省力，適于規(guī)模化生產(chǎn)和應(yīng)用。
【專利說(shuō)明】一種馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及動(dòng)物精液保存的【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]精液冷凍保存與人工授精技術(shù)的結(jié)合在現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮著極其重要的作用，應(yīng)用冷凍精液進(jìn)行人工授精可以不受時(shí)間、地域、品種及個(gè)體體格的限制，并且大量減少公畜飼養(yǎng)量，降低生產(chǎn)成本，提高優(yōu)良種公畜的利用率，為養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)效益。同時(shí)，精液冷凍技術(shù)的發(fā)展和冷凍精液的使用在品種引進(jìn)、雜交改良，以及提高繁殖性能、疾病控制及遺傳多樣性保護(hù)方面具有重要的意義。
[0003]解凍液在冷凍精液的使用過(guò)程中是必不可少的，可以補(bǔ)充精子的營(yíng)養(yǎng)，減少精液粘稠度，降低異物對(duì)精子的影響，同時(shí)緩和代謝產(chǎn)物的危害作用；另外還能夠保護(hù)精子，增強(qiáng)其抵抗低溫打擊和抗氧化的能力，減少冷凍所造成的損傷。
[0004]近年來(lái)，家畜冷凍精液解凍液的研究不斷取得可喜的成果，尤其是在牛、羊等反芻動(dòng)物方面。馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液的研究也日漸成效，但是仍然存在諸多弊端，主要表現(xiàn)在精液解凍效果不穩(wěn)定，受胎率低；因此開(kāi)發(fā)出解凍效果好，成本低，受胎效果好的冷凍精液解凍液對(duì)人工授精而言有重要的經(jīng)濟(jì)效益。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為了解決傳統(tǒng)的精液解凍液對(duì)精子活力恢復(fù)差、受胎率低及現(xiàn)用現(xiàn)配等問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種馬屬動(dòng)物冷 凍精液解凍液。
[0006]為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供了一種馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液，所述解凍液包括A液和脫脂奶，所述A液包括葡萄糖、棉子糖、D-乳糖單水合物、檸檬酸三鈉、檸檬酸鉀和HEPES。
[0007]其中，所述A液和所述脫脂奶的混合體積比例優(yōu)選為1:1。
[0008]每500ml的所述A液中，各組分的含量為:葡萄糖22~26g、棉子糖1.5^1.7g、D_乳糖單水合物1.5~1.7g、檸檬酸三鈉Na3C6H5O7.2Η20 0.2~0.25g、檸檬酸鉀0.35~0.45g、HEPES
4.6~4.8g0
[0009]所述葡萄糖為無(wú)水葡萄糖，其分子式為C6H12O6 ;所述棉子糖的分子式為C18H32O6.5H20 ;所述D-乳糖單水合物的分子式為C12H22O11.H2O ;所述檸檬酸鉀的分子式為K3C6H5O7.H2O ;所述 HEPES 的分子式為 C8H18N2O4S15
[0010]本發(fā)明實(shí)施例提供的技術(shù)方案帶來(lái)的有益效果是:使用本發(fā)明馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液進(jìn)行精液的解凍，效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的解凍液，馬屬動(dòng)物精液的解凍效果好，延長(zhǎng)了稀釋精液中精子的存活時(shí)間，保證精子的活率和精子頂體完整率，增強(qiáng)受精能力，充分提高了精液的利用率和優(yōu)良公畜配種的效率；本發(fā)明的解凍液配制簡(jiǎn)單，使用方便，可置于0_5°C保存，隨用隨取且可一液多用，省時(shí)省力，適于規(guī)模化生產(chǎn)和應(yīng)用?！揪唧w實(shí)施方式】
[0011]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步描述。
[0012]實(shí)施例1
稱取葡萄糖24g、棉子糖1.6g、D-乳糖單水合物1.6g、檸檬酸三鈉Na3C6H5O7.2H20
0.24g、檸檬酸鉀0.4g和HEPES 4.7g，放入無(wú)菌燒杯中，加雙蒸水溶解后，定容、過(guò)濾、分裝、滅菌、密封，即得A液；將經(jīng)過(guò)嚴(yán)格滅菌、密封的A液標(biāo)記配制時(shí)間，置于(T5°C保存，隨用隨??；取適量的A液加入等量體積的脫脂奶混合均勻后，得到本實(shí)施例1的解凍液。
[0013]對(duì)比試驗(yàn)I
將傳統(tǒng)的解凍液葡萄糖-卵黃稀釋液(對(duì)照組I)和牛奶解凍液(對(duì)照組2)，與實(shí)施例1的解凍液(實(shí)施例組I)分別解凍馬的冷凍精液。解凍后在0-10小時(shí)內(nèi)觀察對(duì)照組1、對(duì)照組2和實(shí)施例組I的精子活力，每隔2個(gè)小時(shí)測(cè)定精子的活率，結(jié)果如表1所示。
[0014]表1:不同解凍液對(duì)馬凍精解凍后活率的影響
【權(quán)利要求】
1.一種馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液，其特征在于，所述解凍液包括A液和脫脂奶，所述A液包括葡萄糖、棉子糖、D-乳糖單水合物、檸檬酸三鈉、檸檬酸鉀和HEPES。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液，其特征在于，所述A液和所述脫脂奶的混合體積比例為1:1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液，其特征在于，每500ml的所述A液中，各組分的含量為:葡萄糖22~26g、棉子糖1.5^1.7g、D-乳糖單水合物1.5^1.7g、檸檬酸三鈉 Na3C6H5O7.2H20 0.2~0.25g、檸檬酸鉀 0.35~0.45g、HEPES 4.6~4.8g。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的馬屬動(dòng)物冷凍精液解凍液，其特征在于，所述葡萄糖為無(wú)水葡萄糖，其分子式為C6H12O6 ;所述棉子糖的分子式為C18H32O6.5Η20 ;所述0_乳糖單水合物的分子式為C12H22O11.H2O ;所述檸檬酸鉀的分子式為K3C6H5O7.H2O ;所述HEPES的分子式為C8H18 N2O4S0
【文檔編號(hào)】A61D19/02GK103749434SQ201310588538
【公開(kāi)日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2013年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月21日
【發(fā)明者】鄒志鋼, 張肖軍, 馬玉萍 申請(qǐng)人:青島德瑞駿發(fā)生物科技有限公司, 伊犁德瑞駿發(fā)生物科技有限公司, 青島德瑞鰲藍(lán)馬術(shù)有限公司