海帶及多肋藻雜交新品種的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明分涉及一種新的褐藻雜交新品種的育種技術。具體地說就是利用海帶（Saccharinajaponica）雌配子體與多肋藻（Costariacostata）雄配子體雜交，獲得雜交新品種的方法?？砂慈缦虏襟E操作，1、分別克隆培養(yǎng)海帶雌配子體與多肋藻雄配子體，獲得可用于雜交育種的種質材料；2、取海帶雌配子體與多肋藻雄配子體按1:1比例混合，倒入放有棕繩的燒杯中在適宜條件下培養(yǎng)；3、當棕繩上長出肉眼可見的幼孢子體（長度約0.5-1cm）時，轉移到海上暫養(yǎng)；4、暫養(yǎng)一個月后，分苗，海上養(yǎng)殖5-6個月，獲得成熟的“海多”新品種。本發(fā)明操作簡單、成本低廉，可獲得海帶與多肋藻雜交新品種。
【專利說明】海帶及多肋藻雜交新品種
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種褐藻種間雜交繁育的新品種。，具體地說就是通過海帶雌配子體與多肋藻雄配子體雜交，海上養(yǎng)殖，獲得了“海多”雜交新品種。
[0002]
【背景技術】
[0003]海帶(51japonica)屬于褐藻門(Phaeophyta),褐藻綱(Phaeophyceae),海帶目(Laminariales),海帶科(Laminariaceae),海帶屬iSaccharina)，原產于日本、朝鮮以及俄羅斯遠東沿海地區(qū)。海帶是我國主要的褐藻養(yǎng)殖品種，除了可以使用外，我國海帶的褐藻膠年產量占全球總產量的60%左右。目前在我國已形成了一個包括海帶良種繁育、栽培、食品加工、化工和生物制品開發(fā)的產業(yè)鏈。
[0004]多肋藻(Ccosiaia)屬于褐藻門(Phaephyta),褐子綱(Phaeosporeae),海帶目(Laminariales),海帶科(Laminariaceae),多肋藻屬(fiosiaria),是一種自然分布于太平洋北部沿岸潮間帶或者潮下帶淺海區(qū)的有較高經(jīng)濟價值的一年生大型褐藻，其富含碘以及多種人體必需的微量元素，營養(yǎng)價值高，口感好，味道鮮美，為海藻中的上等營養(yǎng)佳品。除了食用價值，多肋藻還是海藻工業(yè)的重要原材料，多肋藻具有提取褐藻膠、甘露醇、鉀等化工原料以及制備褐藻淀粉的應用潛力。
[0005]目前，制約我國海藻養(yǎng)殖產業(yè)的主要瓶頸問題:第一養(yǎng)殖品種單一化；第二海帶高值化開發(fā)和利用從上個 世紀五十年代到現(xiàn)在沒有實質性的革新和發(fā)展。針對上述存在的瓶頸問題，“海多”新品的問世，可以豐富我國海藻養(yǎng)殖經(jīng)濟品種。另外，由于“海多”是海帶和多肋藻的雜交種，具有二者的雜種優(yōu)勢，其中褐藻膠與巖藻聚糖硫酸酯中古洛糖醛酸和甘露糖醛酸的比例明顯不同于其親本海帶和多肋藻，因而導致新品種的褐藻膠和巖藻聚糖硫酸酯的活性具有其特殊性，這將為海藻高值化利用提供具有潛在應用前景的活性化合物。

【發(fā)明內容】

[0006]本發(fā)明的目的運用海帶及多肋藻配子體克隆雜交育苗技術，獲得“海多”雜交新品種。
[0007]“海多”雜交新品種可按以下步驟操作:
1)克隆培養(yǎng)海帶雌配子體和多肋藻雄配子體。取優(yōu)良品系的海帶雌配子體和多肋藻的雄配子體，攪拌器(JYD-P11S81，九陽)打碎10 s，將配子體打碎成長度約為200 μ m的配子體切段。將打碎的配子體懸浮擴增培養(yǎng)35 d，每周換一次無菌海水培養(yǎng)液，獲得大量雌、雄配子體種質材料。海帶雌配子體的培養(yǎng)條件為10 °C、40 μπιο?.um~2.s_S24 h光照；多肋藻雄配子體的培養(yǎng)條件為10 °C、20 μ mol.m_2.s'12:12 h (L:D)；.2)取雌、雄配子體按1:1混合，倒入放有直徑3mm棕繩的燒杯中，10 °C、40μ mol.?α2.s'10:14 h (L:D)條件下培養(yǎng)28 d,每周換一次無菌海水培養(yǎng)液；3)當棕繩上長出肉眼可見的幼孢子體(長度約0.5-1 cm)時，轉移到海上暫養(yǎng)；
4)暫養(yǎng)一個月后，分苗，海上養(yǎng)殖5-6個月，獲得成熟的“海多”新品種。
[0008]所述無菌海水培養(yǎng)液組成為200 μ mol.L_1KN03, 20 μ mol.的無菌海水。
[0009]本發(fā)明具有以下優(yōu)點
本發(fā)明利用配子體克隆雜 交技術，在實驗 室條件下瞬間成功制備海藻新品種。
[0010]
【具體實施方式】
[0011]2012年8月24日，取實驗室保存的海帶雌配子體和多肋藻的雄配子體濕重各
2mg，攪拌器(JYD-P11S81，九陽)打碎10 s，將配子體打碎成長度約為200 μ m配子體切段，將打碎的配子體分別放入500 mL錐形瓶中進行懸浮擴增培養(yǎng)35 d。每周換一次無菌海水培養(yǎng)液，獲得大量雌、雄配子體種質材料。海帶雌配子體的培養(yǎng)條件為:10 °C、40μ mol.m_2.s_S 24 h光照。多肋藻雄配子體的培養(yǎng)條件為:10 °C、20 μ mol.m_2.s'12:12 h (L:D)。取海帶雌配子體與多肋藻雄配子體濕重各15 mg混合，置于含有300 mL無菌海水以及直徑3 mm棕繩的1 L燒杯中，10 °C、40 μ mol.m-2.s'10:14 h (L:D)條件下培養(yǎng)28 d，每周換一次無菌海水培養(yǎng)。2012年10月26日棕繩上長出肉眼可見的小孢子體(長度0.5-lcm)，將棕繩轉移至海上暫養(yǎng)，一個月后分苗，海上養(yǎng)殖6個月，獲得“海多”新品種。
【權利要求】
1.其特征在于:可按如下步驟操作，1)分別克隆培養(yǎng)海帶雌配子體與多肋藻雄配子體，獲得可用于雜交育種的種質材料；2)取海帶雌配子體與多肋藻雄配子體按1:1比例混合，倒入放有棕繩的燒杯中在適宜條件下培養(yǎng)；3)當棕繩上長出肉眼可見的幼孢子體(長度約0.5-1 cm)時，轉移到海上暫養(yǎng)；4)暫養(yǎng)一個月后，分苗，海上養(yǎng)殖5-6個月，獲得“海多”孢子體。
2.按照權力1所述“海多”雜交新品種的育種方法，其特征在于海帶雌配子體克隆培養(yǎng)的條件為:10 °C、40 μ mol.m^2.s'24 h光照；多肋藻雄配子體克隆培養(yǎng)條件:10 °C、20μ mol.m 2.s S 光周期為 12:12 h (L:D)。
3.按照權力1所述“海多”雜交新品種的育種方法，其特征在于取海帶雌配子體與多肋藻雄配子體濕重各15 mg混合放入加有300 mL無菌海水和棕繩的燒杯中，培養(yǎng)條件為:10°C、40 μ mol.m 2.s S 光周期為 10:14 h (L:D)。
4.按照權力1所述“海多”雜交新品種的育種方法，其特征在于無菌海水培養(yǎng)液的組成為 200 μ mol.1 ΚΝ03, 20 μ mol.的無菌海水。
【文檔編號】A01H1/02GK103651101SQ201310647469
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年12月6日 優(yōu)先權日:2013年12月6日
【發(fā)明者】王高歌, 魏曉嬌, 帥麗玫, 李丹丹, 張蕊, 路博鈞 申請人:中國海洋大學