一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基，由以下組分組成：KNO3：1900mg/L；硝酸銨：1650mg/L；磷酸二氫鉀：170mg/L；七水硫酸鎂：370mg/L；二水氯化鈣：440mg/L；KI：0.60-0.62mg/L；硼酸：4.5-4.8mg/L；四水硫酸錳：25.0-25.3mg/L；七水硫酸鋅：7.0-7.2mg/L；二水合鉬酸鈉：0.20-0.22mg/L；五水硫酸銅：0.025mg/L；六水氯化鈷：0.025mg/L；Na2·EDTA：37.25mg/L；七水硫酸亞鐵：27.85mg/L；肌醇：100mg/L；甘氨酸：2mg/L；鹽酸硫胺素：0.1mg/L；鹽酸吡哆醇：0.5mg/L；煙酸：0.5mg/L；蔗糖：20-22g/L；瓊脂：5-5.2g/L；香蕉汁：30-35g/L；梨汁：3-5g/L；活性炭0.45-0.48g/L；溶劑為去離子水。應(yīng)用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)蝴蝶蘭，成活率大于96%，染菌率為2.7-2.8%，培養(yǎng)基褐化程度較MS培養(yǎng)基低30-40%。
【專利說明】一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002]蝴蝶蘭又名蝶蘭(Phalaenopsisamabilis),蘭科(Orchidaceae)蝶蘭屬(Phalaenopsis)多年生附生草本植物，有著“洋蘭皇后”之稱的蝴蝶蘭，由于其花形如彩蝶飛舞，色彩艷麗，體態(tài)輕盈、飄逸，在國內(nèi)外花卉市場(chǎng)上極受歡迎，一直都是消費(fèi)者的寵兒。而且蝴蝶蘭除了盆栽之外，還特別適宜用作切花，是藝術(shù)插花的高檔花材。
[0003]目前蝴蝶蘭工廠化生產(chǎn)常用的方法是用組織培養(yǎng)無性繁殖，即所謂克隆繁殖，具有繁殖快、數(shù)量大和小苗品種純的優(yōu)點(diǎn)。利用蝴蝶蘭花梗側(cè)芽、葉片、莖尖等外植體，經(jīng)消毒處理后接種到培養(yǎng)基上，可誘導(dǎo)出營(yíng)養(yǎng)牙或原球莖。再進(jìn)一步于培養(yǎng)基中進(jìn)行大量增殖、分化培養(yǎng)，這樣就可以培養(yǎng)出大量的植株。通過克隆繁殖的蝴蝶蘭苗生長(zhǎng)、開花比較整齊一致，可完全保存母株的花色性狀。
[0004]在原球莖的誘導(dǎo)過程中，目前使用的培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基，但是其在使用過程中褐化程度嚴(yán)重。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供了一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基，應(yīng)用其進(jìn)行蝴蝶蘭原球莖的誘導(dǎo)時(shí)，褐化程度小。`
[0006]本發(fā)明提供一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基由以下組分組成:
KNO3:1900mg/L ；
NH4NO3:1650mg/L ；
KH2PO4:170mg/L ；
MgSO4.7H20:370mg/L ；
CaCl2.2H20:440mg/L ；
KI:0.60-0.62mg/L ；
H3BO3:4.5-4.8mg/L ；
MnSO4.4H20:25.0-25.3mg/L ；
ZnSO4.7H20:7.0-7.2mg/L ；
Na2MoO4.2H20:0.20-0.22mg/L ；
CuSO4.5H20:0.025mg/L ；
CoCl2.6H20:0.025mg/L ；
Na2.EDTA:37.25mg/L ；
FeSO4.7H20:27.85mg/L ；
肌醇:100mg/L ；
甘氨酸:2mg/L ；鹽酸硫胺素:0.lrng/L ；
鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ；
煙酸:0.5mg/L ；
蔗糖:20-22g/L ；
瓊脂:5.0-5.2g/L ；
香蕉汁:30-35g/L ；
梨汁:3-5g/L ；
活性炭 0.45-0.48g/L ；
溶劑為去離子水。
[0007]優(yōu)選地，所述培養(yǎng)基由以下組分組成:
KNO3:1900mg/L ；
NH4NO3:1650mg/L ；
KH2PO4:170mg/L ；
MgSO4.7H20:370mg/L ；
CaCl2.2H20:440mg/L ；
KI:0.61mg/L ；
H3BO3:4.6mg/L ；
MnSO4.4H20:25.2mg/L ；
ZnSO4.7H20:7.lmg/L ；
Na2MoO4.2H20:0.2 lmg/L ；
CuSO4.5H20:0.025mg/L ；
CoCl2.6H20:0.025mg/L ；
Na2.EDTA:37.25mg/L ；
FeSO4.7H20:27.85mg/L ；
肌醇:100mg/L ；
甘氨酸:2mg/L ；
鹽酸硫胺素:0.lmg/L ；
鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ；
煙酸:0.5mg/L ；
鹿糖:21g/L ；
瓊脂:5.lg/L ；
香蕉汁:32g/L ；
梨汁:4g/L ；
活性炭0.46g/L ；
溶劑為去離子水。
[0008]應(yīng)用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)蝴蝶蘭，成活率大于96%，染菌率為2.7-2.8%，培養(yǎng)基褐
化程度較MS培養(yǎng)基低30-40%。
【具體實(shí)施方式】[0009]以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0010]實(shí)施例1
本發(fā)明提供的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基配方如下:
本發(fā)明的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而成,具體配方如
下:
KNO3:1900mg/L ；
NH4NO3:1650mg/L ；
KH2PO4:170mg/L ；
MgSO4.7H20:370mg/L ；
CaCl2.2H20:440mg/L ；
KI:0.6lmg/L ；
H3BO3:4.6mg/L ；
MnSO4.4H20:25.2 mg/L ；
ZnSO4.7H20:7.lmg/L ；
Na2MoO4.2H20:0.2 lmg/L ；
CuSO4.5H20:0.025mg/L ；
CoCl2.6H20:0.025mg/L ；
Na2.EDTA:37.25mg/L ；
FeSO4.7H20:27.85mg/L ；
肌醇:100mg/L ；
甘氨酸:2mg/L ；
鹽酸硫胺素:0.lmg/L ；
鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ；
煙酸:0.5mg/L ；
鹿糖:21g/L ；
瓊脂:5.lg/L ；
香蕉汁:32g/L ；
梨汁:4g/L ；
活性炭0.46g/L ；
溶劑為去離子水。
[0011]實(shí)施例2
本發(fā)明提供的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基配方如下:
本發(fā)明的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而成,具體配方如
下:
KNO3:1900mg/L ；
NH4NO3:1650mg/L ；
KH2PO4:170mg/L ；
MgSO4.7H20:370mg/L ；CaCl2.2H20:440mg/L ；
KI:0.6lmg/L ；
H3BO3:4.6mg/L ；
MnSO4.4H20:25.0mg/L ；
ZnSO4.7H20:7.0mg/L ；
Na2MoO4.2H20:0.20mg/L ；
CuSO4.5H20:0.025mg/L ；
CoCl2.6H20:0.025mg/L ；
Na2.EDTA:37.25mg/L ；
FeSO4.7H20:27.85mg/L ；
肌醇:100mg/L ；
甘氨酸:2mg/L ；
鹽酸硫胺素:0.lmg/L ；
鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ；
煙酸:0.5mg/L ；·
鹿糖:20g/L ；
瓊脂:5.0g/L ；
香蕉汁:30g/L ；
梨汁:3g/L ；
活性炭0.45g/L ；
溶劑為去離子水。
[0012]實(shí)施例3
本發(fā)明提供的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基配方如下:
本發(fā)明的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而成,具體配方如
下:
KNO3:1900mg/L ；
NH4NO3:1650mg/L ；
KH2PO4:170mg/L ；
MgSO4.7H20:370mg/L ；
CaCl2.2H20:440mg/L ；
KI:0.6lmg/L ；
H3BO3:4.6mg/L ；
MnSO4.4H20:25.3mg/L ；
ZnSO4.7H20:7.2mg/L ；
Na2MoO4.2H20:0.22mg/L ；
CuSO4.5H20:0.025mg/L ；
CoCl2.6H20:0.025mg/L ；
Na2.EDTA:37.25mg/L ；
FeSO4.7H20:27.85mg/L ；肌醇:100mg/L ；
甘氨酸:2mg/L ；
鹽酸硫胺素:0.lmg/L ；
鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ；
煙酸:0.5mg/L ；
庶糖:22g/L ；
瓊脂:5.2g/L ；
香蕉汁:35g/L ；
梨汁:5g/L ；
活性炭0.48g/L ；
溶劑為去離子水。
[0013]應(yīng)用上述培養(yǎng)基對(duì)蝴蝶蘭進(jìn)行組織培養(yǎng):
(1)切下蝴蝶蘭帶芽莖段，長(zhǎng)約2-3cm，用自來水清洗干凈，在飽和漂白粉上清液中浸泡15min ；
(2)浸泡時(shí)不斷攪動(dòng)，浸泡后的莖段用流水沖洗干凈，置于超凈工作臺(tái)上，先用75%的酒精消毒30s，無菌水清洗I次,再用0.1%的升汞浸泡IOmin ；
(3)經(jīng)無菌水沖洗數(shù)次，將帶芽莖段接種到培養(yǎng)基上，調(diào)pH為4.5，在每天光照12小時(shí)，光強(qiáng)1600Lux，溫度25°C下培養(yǎng)；
(4)按照35天一個(gè)周期不斷進(jìn)行轉(zhuǎn)接，每次轉(zhuǎn)接都會(huì)有平均3倍的增殖，每天光照12小時(shí)，光強(qiáng)1600Lux，溫度250C ；
(5)將苗分成單株，將其接種至壯苗生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使其長(zhǎng)高長(zhǎng)大，同時(shí)長(zhǎng)出發(fā)達(dá)的根系，最終培養(yǎng)成為一棵有根有葉的完整植株，每天光照12小時(shí)，光強(qiáng)1600LUX，溫度25。。。
[0014]實(shí)驗(yàn)結(jié)果:應(yīng)用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)蝴蝶蘭，成活率大于96%，染菌率為
2.7-2.8%，培養(yǎng)基褐化程度較MS培養(yǎng)基低30-40%。
[0015]最后應(yīng)說明的是:以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基，其特征在于:所述培養(yǎng)基由以下組分組成:KN03:1900mg/L ；NH4N03:1650mg/L ；KH2P04:170mg/L ；MgS04.7H20:370mg/L ；CaCl2.2H20:440mg/L ；KI:0.60-0.62mg/L ；H3BO3:4.5-4.8mg/L ；MnS04.4H20:25.0-25.3mg/L ；ZnS04.7H20:7.0-7.2mg/L ；Na2Mo04.2H20:0.2 0-0.22mg/L ；CuS04.5H20:0.025mg/L ；CoCl2.6H20:0.025mg/L ；Na2.EDTA:37.25mg/L ；FeS04.7H20:27.85mg/L ；肌醇:100mg/L ；甘氨酸:2mg/L ；鹽酸硫胺素:0.lmg/L ；鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ；煙酸:0.5mg/L ；蔗糖:20-22g/L ；瓊脂:5.0-5.2g/L ； 香蕉汁:30-35g/L ；梨汁:3-5g/L ；活性炭 0.45-0.48g/L ；溶劑為去離子水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于:所述培養(yǎng)基由以下組分組成:KN03:1900mg/L ；NH4N03:1650mg/L ；KH2P04:170mg/L ；MgS04.7H20:370mg/L ；CaCl2.2H20:440mg/L ；KI:0.6lmg/L ；H3BO3:4.6mg/L ；MnS04.4H20:25.2mg/L ；ZnS04.7H20:7.lmg/L ；Na2Mo04.2H20:0.2 lmg/L ；CuS04.5H20:0.025mg/L ；CoCl2.6H20:0.025mg/L ；Na2.EDTA:37.25mg/L ；FeS04.7H20:27.85mg/L ；肌醇:100mg/L ；甘氨酸:2mg/L ；鹽酸硫胺素:0.lmg/L ；鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ；煙酸:0.5mg/L ；鹿糖:21g/L ；瓊脂:5.lg/L ；香蕉汁:32g/L ；梨汁:4g/L ；活性炭0.46g/L ；溶劑為去 離子水。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103704133SQ201310669090
【公開日】2014年4月9日 申請(qǐng)日期:2013年12月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月11日
【發(fā)明者】李道強(qiáng), 李培泰 申請(qǐng)人:柳州賽特生物科技研發(fā)中心