一種馬鞭石斛的組織培育方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種馬鞭石斛的組織培育方法，其特征在于，包括以下步驟：培育瓶的消毒；培養(yǎng)基的制備；外植體的培養(yǎng)和培育。本發(fā)明提供的方法通過對培養(yǎng)瓶的重復消毒殺菌，培養(yǎng)基的養(yǎng)分調配以及添加鏈霉菌和好力克的溶液中浸泡馬鞭石斛根莖，達到了根莖防腐防蟲害的效果，營養(yǎng)成分高，縮短了馬鞭石斛的生長周期，提高了馬鞭石斛的存活率，增加了產量。
【專利說明】—種馬鞭石斛的組織培育方法
【技術領域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種中藥材的培育方法，尤其涉及一種馬鞭石斛的組織培育方法。
【背景技術】
[0002]馬鞭石斛為蘭科石斛，是傳統的名貴中藥材?！渡褶r本草經》中有記載，其具有益胃生津、滋陰生津、清熱止咳潤肺等功效?，F代藥理研究表明，石斛還有抗腫瘤、抗衰老、增強人體免疫力和擴張血管的作用。由于石斛的自然繁殖能力低，需要依附在樹木、巖石或者苔蘚上進行繁殖跟生存，由于生存能力低，生產周期長，加上人類的大量采掘，造成此種名貴中藥材難以滿足市場的藥物需求。

【發(fā)明內容】
[0003]本發(fā)明為了滿足市場上對中藥材馬鞭石斛的需要，提供了一種生產周期短，成活率高，產量高的馬鞭石斛的組織培育方法，其中，包括以下步驟:
[0004]I)培育瓶的消毒:培養(yǎng)瓶先采用臭氧進行間斷消毒后用無菌水在常溫下浸泡
20-30分鐘，晾干后采用150-200°C熱水進行高溫噴淋滅菌,對培育瓶進行臭氧、無菌水以及高溫反復消毒殺菌是為了保證培育瓶的干凈無菌，不會攜帶任何對外植體培育有害的細菌，安全的無菌環(huán)境給馬鞭石斛種苗的培育提供了一個良好的生長條件；
[0005]2)培養(yǎng)基的制備:在培育瓶中加入MS基礎培養(yǎng)基、ΝΑΑ0.1-1.2mg / L、
6-BA1.0-1.2mg / L、白糖、馬鈴薯汁和茶子餅，攪拌均勻，室內靜置1_2小時，在基礎的培養(yǎng)基的基礎上添加一定比例的生長調節(jié)劑能夠更好地促進馬鞭石斛的快速生長，使其生長周期縮短，添加白糖是為了增加培養(yǎng)基中的碳源，增加了馬鞭石斛的繁殖量，添加天然提取物馬鈴薯汁以及茶子餅一個是促進馬鞭石斛外植體生根壯苗，使其根系繁茂，另一個茶子餅中含有茶皂素能夠很好地防止根莖著受病蟲害的侵蝕；
[0006]3)外植體的培養(yǎng):選取優(yōu)質的馬鞭石斛的根莖部位,用無菌水反復清洗3-4遍，放在用水稀釋了 3500-4000倍的鏈霉菌和好力克的溶液中浸泡3-5小時，浸泡是為了防止馬鞭石斛根莖腐爛；
[0007]4)培育:將靜置好的培養(yǎng)基灌入培養(yǎng)瓶中，至培養(yǎng)瓶容量的三分之二處，將消毒好的外植體接種至培養(yǎng)基中，置于溫度為20-25°C大棚培養(yǎng)室中進行培養(yǎng)，保持空氣濕度為70-80%，光照時間為12-14小時，光照強度為1200-20001x。
[0008]優(yōu)選的是，所述的馬鞭石斛的組織培育方法，其特征在于，所述的步驟I)中的臭氧間斷消毒是采用濃度為2-3ppm的臭氧在間隔15-20分鐘消毒2_3次。
[0009]優(yōu)選的是，所述的馬鞭石斛的組織培育方法，其特征在于，所述的步驟2)中培養(yǎng)基的優(yōu)選用量為ΝΑΑ0.1-1.2mg / L、6_BA1.0-1.2mg / L、白糖、馬鈴薯汁和茶子餅的重量組分別為 20-30、12-20 和 5-10。
[0010]優(yōu)選的是，所述的馬鞭石斛的組織培育方法，其特征在于，所述的步驟4)中外植體接種至培養(yǎng)基的培養(yǎng)時間為1-2月，間隔10天往培養(yǎng)瓶中添加步驟2)中同樣比例配比的培養(yǎng)基，間隔20天往培養(yǎng)瓶中添加含有N、P、K、Mg、Zn、Na的復合營養(yǎng)液，間隔噴施營養(yǎng)液可以促進馬鞭石斛生長速度快。
[0011]本發(fā)明提供的方法通過對培養(yǎng)瓶的重復消毒殺菌，培養(yǎng)基的養(yǎng)分調配以及添加鏈霉菌和好力克的溶液中浸泡馬鞭石斛根莖，達到了根莖防腐防蟲害的效果，營養(yǎng)成分高，縮短了馬鞭石斛的生長周期，提高了馬鞭石斛的存活率，增加了產量。
【具體實施方式】
[0012]下面結合具體的實施方法對本發(fā)明做進一步的詳細說明，以令本領域技術人員參照說明書文字能夠據以實施。
[0013]實施例1
[0014]采用濃度為2ppm的臭氧間隔20分鐘對培育瓶進行消毒，總共消毒2次后用無菌水在常溫下浸泡20分鐘，晾干后采用150°C熱水進行高溫噴淋滅菌；在培育瓶中加入MS基礎培養(yǎng)基、NAA0.1mg / L.6-BA1.0mg / L、白糖4克、馬鈴薯汁8克和茶子餅4克，攪拌均勻，室內靜置I小時；選取優(yōu)質的馬鞭石斛的根莖部位，用無菌水反復清洗3遍，放在用水稀釋了 3500倍的鏈霉菌和好力克的溶液中浸泡3小時，浸泡是為了防止馬鞭石斛根莖腐爛；將靜置好的培養(yǎng)基灌入培養(yǎng)瓶中，至培養(yǎng)瓶容量的三分之二處，將消毒好的外植體接種至培養(yǎng)基中，置于溫度為20°C大棚培養(yǎng)室中進行培養(yǎng)，保持空氣濕度為80%，光照時間為12小時，光照強度為12001x，2-3個月培育出來的種苗已經適合移栽，移栽后的種苗6-7個月可以采收，成活率97%。
[0015]實施例2
[0016]采用濃度為3ppm的臭氧間隔20分鐘對培育瓶進行消毒，總共消毒2次后用無菌水在常溫下浸泡25分鐘，晾干后采用200°C熱水進行高溫噴淋滅菌；在培育瓶中加入MS基礎培養(yǎng)基、NAA0.5mg / L、6_BA1.2mg / L、白糖6克、馬鈴薯汁10克和茶子餅6克，攪拌均勻，室內靜置I小時；選取優(yōu)質的馬鞭石斛的根莖部位，用無菌水反復清洗3遍，沒有經過稀釋鏈霉菌和好力克的溶液中浸泡，將靜置好的培養(yǎng)基灌入培養(yǎng)瓶中，至培養(yǎng)瓶容量的三分之二處，將消毒好的外植體接種至培養(yǎng)基中，置于溫度為25°C大棚培養(yǎng)室中進行培養(yǎng)，保持空氣濕度為80%，光照時間為14小時，光照強度為18001X，3個月以后培育出來的種苗才適合移栽，移栽后的種苗8-12個月可以采收，成活率86%。
[0017]盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領域，對于熟悉本領域的人員而言，可容易地實現另外的修改，因此在不背離權利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細節(jié)和這里示出與描述的實施方式。
【權利要求】
1.一種馬鞭石斛的組織培育方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)培育瓶的消毒:培養(yǎng)瓶先采用臭氧進行間斷消毒后用無菌水在常溫下浸泡20-30分鐘，晾干后采用150-200°C熱水進行高溫噴淋滅菌； 2)培養(yǎng)基的制備:在培育瓶中加入MS基礎培養(yǎng)基、ΝΑΑ0.1-1.2mg / L、6-BA1.0-1.2mg / L、白糖、馬鈴薯汁和茶子餅，攪拌均勻，室內靜置1_2小時； 3)外植體的培養(yǎng):選取優(yōu)質的馬鞭石斛的根莖部位，用無菌水反復清洗3-4遍，放在用水稀釋了 3500-4000倍的鏈霉菌和好力克的溶液中浸泡3-5小時； 4)培育:將靜置好的培養(yǎng)基灌入培養(yǎng)瓶中，至培養(yǎng)瓶容量的三分之二處，將消毒好的外植體接種至培養(yǎng)基中，置于溫度為20-25 °C大棚培養(yǎng)室中進行培養(yǎng)，保持空氣濕度為70-80%，光照時間為12-14小時，光照強度為1200-20001x。
2.根據權利要求1中所述的馬鞭石斛的組織培育方法，其特征在于，所述的步驟I)中的臭氧間斷消毒是采用濃度為2-3ppm的臭氧在間隔15-20分鐘消毒2_3次。
3.根據權利要求1中所述的馬鞭石斛的組織培育方法，其特征在于，所述的步驟2)中培養(yǎng)基的優(yōu)選用量為ΝΑΑ0.1-1.2mg/L、6-BAl.0-1.2mg / L、白糖、馬鈴薯汁和茶子餅的重量組分別為20-30、12-20和5-10。
4.根據權利要求1中所述的馬鞭石斛的組織培育方法，其特征在于，所述的步驟4)中外植體接種至培養(yǎng)基的培養(yǎng) 時間為1-2月，間隔10天往培養(yǎng)瓶中添加步驟2)中同樣比例配比的培養(yǎng)基，間隔20天往培養(yǎng)瓶中添加含有N、P、K、Mg、Zn、Na的復合營養(yǎng)液。
【文檔編號】A01H4/00GK103733990SQ201310689162
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月16日 優(yōu)先權日:2013年12月16日
【發(fā)明者】莫文油 申請人:莫文油