一種菊花離體育種方法
【專利摘要】一種菊花離體育種方法，本發(fā)明屬于生物技術(shù)育種領(lǐng)域，具體涉及一種針對(duì)菊花的離體育種方法，它要解決現(xiàn)有處于開花期的菊花易受環(huán)境影響導(dǎo)致不結(jié)實(shí)的問題。育種方法：一、向MS培養(yǎng)液中加入NAA溶液和6-BA溶液配制育種培養(yǎng)液；二、對(duì)處于開花期的菊花莖段進(jìn)行處理，使用清水沖洗后消毒，得到處理后的菊花莖段；三、菊花莖段放入裝有育種培養(yǎng)液的培養(yǎng)箱中，控制光照強(qiáng)度和光照時(shí)間，沾取花粉進(jìn)行人工授粉；四、采集成熟的種子自然陰干，完成菊花的離體育種。由于育種過程是在培養(yǎng)箱中進(jìn)行，避免了外界地理?xiàng)l件，菊花離體培養(yǎng)的結(jié)實(shí)率為5%。本發(fā)明主要應(yīng)用于菊花的育種。
【專利說明】一種菊花罔體育種方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物技術(shù)育種領(lǐng)域，具體涉及一種針對(duì)菊花的離體育種方法。
【背景技術(shù)】
[0002]菊花(Dendranthema grandiflourm Kitam)原產(chǎn)自我國(guó)，由于花色豐富，品種多樣，而深受大眾喜愛，廣泛的在世界各地種植。當(dāng)今世界菊花品種達(dá)7000多個(gè)，我國(guó)的菊花品種也有3000多個(gè)，由于花卉市場(chǎng)的發(fā)展和人們觀賞水平的提高，對(duì)菊花的品種需求也表現(xiàn)出多樣化，要求人們不斷培育新的品種，而全新的育種技術(shù)在新品種的選育中也起著越來(lái)越重要的作用，傳統(tǒng)育種手段已經(jīng)無(wú)法滿足市場(chǎng)的需要，誘變育種、分子育種以及組織培養(yǎng)技術(shù)等育種方法不斷涌現(xiàn)，成為近年來(lái)育種的主要手段。
[0003]雜交育種方法是在菊花授粉期間不同品種的菊花自然傳播花粉獲得種子，或者人為干預(yù)授粉過程獲得種子，選育新的花卉品種；芽變育種是利用自然栽培過程中的個(gè)別枝或植株的某一枝段或根部發(fā)生了變異的部分進(jìn)行離體培養(yǎng)培育成的植株，從而獲得新品種；誘變育種利用物理、化學(xué)和生物等因素誘導(dǎo)菊花的遺傳性發(fā)生變異，然后根據(jù)育種目標(biāo)進(jìn)行選擇，從而培育出新的品種，誘變育種包括物理誘變、化學(xué)誘變等方式；組織培養(yǎng)育種主要是通過原生質(zhì)體培養(yǎng)、體細(xì)胞雜交、體細(xì)胞遺傳變異以及單倍體的誘導(dǎo)與利用等途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)；分子育種是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，采用生物技術(shù)的手段，將各種外源基因?qū)胫参锛?xì)胞，通過篩選獲得植物新品種。然而無(wú)論是哪種育種方式都有自己的優(yōu)點(diǎn)和不足，并且在后期的繁殖推廣過程中都顯示出了其自身的局限性，長(zhǎng)期的無(wú)性繁殖會(huì)使品種的優(yōu)勢(shì)退化，抗病性減弱，生長(zhǎng)勢(shì)不強(qiáng)。有性繁殖種子的獲得又受到地理?xiàng)l件、氣候等多方面原因的影響。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有處于開花期的菊花易受環(huán)境影響導(dǎo)致不結(jié)實(shí)的問題，而提供一種菊花離體育種方法。
[0005]本發(fā)明菊花離體育種方法按下列步驟實(shí)現(xiàn):
[0006]一、向MS培養(yǎng)液中加入NAA (萘乙酸)溶液和6_BA (6_芐氨基腺嘌呤)溶液，經(jīng)消毒處理后得到育種培養(yǎng)液；
[0007]二、對(duì)處于開花期的菊花莖段進(jìn)行處理，保留兩個(gè)飽滿的花頭，保留菊花莖段的3片葉子,菊花莖段的長(zhǎng)度裁剪為10±0.5cm，使用清水沖洗后消毒，得到處理后的菊花莖段；
[0008]三、向培養(yǎng)箱中通入氧氣,然后將處理后的菊花莖段放入裝有育種培養(yǎng)液的培養(yǎng)箱中，在光照強(qiáng)度為2000~3000LX，光照時(shí)間為10~12h/d，溫度為20~24°C的條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)期間用毛筆沾取花粉進(jìn)行人工輔助授粉，并每隔7天更換一次育種培養(yǎng)液，每次換液時(shí)剪去Icm處理后的菊花莖段；
[0009]四、待種子成熟，采集成熟的種子，放在通風(fēng)處自然陰干，完成菊花的離體育種。[0010]本發(fā)明菊花離體育種方法簡(jiǎn)便易行，所使用的育種培養(yǎng)液配方簡(jiǎn)單，利于其在菊花育種上的廣泛應(yīng)用，由于育種過程是在培養(yǎng)箱中進(jìn)行，相對(duì)于自然育種避免了外界地理?xiàng)l件、氣候等因素的影響，尤其適用于北方寒地區(qū)域的育種，如在東北林業(yè)大學(xué)試驗(yàn)田進(jìn)行測(cè)試，神農(nóng)香菊在自然生長(zhǎng)條件下的結(jié)實(shí)率為0，而經(jīng)本發(fā)明的離體培養(yǎng)結(jié)實(shí)率為5%。
【具體實(shí)施方式】
[0011]【具體實(shí)施方式】一:本實(shí)施方式菊花離體育種方法按下列步驟實(shí)施:
[0012]一、向MS培養(yǎng)液中加入NAA (萘乙酸)溶液和6_BA (6_芐氨基腺嘌呤)溶液，經(jīng)消毒處理后得到育種培養(yǎng)液；
[0013]二、對(duì)處于開花期的菊花莖段進(jìn)行處理，保留兩個(gè)飽滿的花頭，保留菊花莖段的3片葉子,菊花莖段的長(zhǎng)度裁剪為10±0.5cm，使用清水沖洗后消毒，得到處理后的菊花莖段；
[0014]三、向培養(yǎng)箱中通入氧氣,然后將處理后的菊花莖段放入裝有育種培養(yǎng)液的培養(yǎng)箱中，在光照強(qiáng)度為2000~3000 LX，光照時(shí)間為10~12h/d，溫度為20~24°C的條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)期間用毛筆沾取花粉進(jìn)行人工輔助授粉，并每隔7天更換一次育種培養(yǎng)液，每次換液時(shí)剪去Icm處理后的菊花莖段；
[0015]四、待種子成熟，采集成熟的種子，放在通風(fēng)處自然陰干，完成菊花的離體育種。
[0016]本實(shí)施方式步驟二所述的菊花莖段選取花苞已經(jīng)形成，舌狀花即將展開的莖段，以縮短其離體培養(yǎng)周期，所采的花朵要飽滿，保證種子的質(zhì)量，用清水沖洗要徹底，以減少細(xì)菌的滋生。步驟三中通入氧氣是為了使莖段的底部形成有氧的環(huán)境減少厭氧菌的滋生，有利于莖段對(duì)養(yǎng)分的吸收；本步驟中剪去Icm的菊花莖段的過程是在培養(yǎng)液中進(jìn)行的。
[0017]【具體實(shí)施方式】二:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一不同的是步驟一所述的育種培養(yǎng)液的制備方法是向1000~2000mll/2MS培養(yǎng)液中加入2~5ml濃度為0.5mg/L的NAA(萘乙酸)溶液和2~5ml濃度為2.0mg/L的6-BA (6-芐氨基腺嘌呤)溶液。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一相同。
[0018]本實(shí)施方式所述的MS培養(yǎng)液配方簡(jiǎn)單，并且其所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)足以維持離體的菊花莖段生長(zhǎng)。
[0019]【具體實(shí)施方式】三:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一或二不同的是步驟一中所述的消毒處理方式是采用高壓蒸汽滅菌消毒。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一或二相同。
[0020]【具體實(shí)施方式】四:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一至三之一不同的是步驟二所述的消毒方式是采用次氯酸鈉的水溶液浸泡消毒。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一至三之一相同。
[0021]【具體實(shí)施方式】五:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一至四之一不同的是步驟三在光照強(qiáng)度為2000LX，光照時(shí)間為12h/d，培養(yǎng)溫度為24°C的條件下培養(yǎng)。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一至四之一相同。
[0022]本實(shí)施方式控制育種期光照、溫度等培養(yǎng)條件容易達(dá)到，一般的溫室就可以達(dá)到育種要求，這樣可以提高菊花育種的環(huán)境限制。
[0023]實(shí)施例一:本實(shí)施例菊花離體育種方法按下列步驟實(shí)施:
[0024]一、向1000mll/2MS培養(yǎng)液中加入3ml濃度為0.5mg/L NAA (萘乙酸)溶液和2ml濃度為2.0mg/L6-BA (6-芐氨基腺嘌呤)溶液，經(jīng)消毒處理后得到育種培養(yǎng)液；
[0025]二、對(duì)處于開花期的神農(nóng)香菊(Dendranthema indicum var.aromaticum)莖段進(jìn)行處理，保留兩個(gè)飽滿的花頭，保留菊花莖段的3片葉子，菊花莖段的長(zhǎng)度裁剪為10cm，使用清水沖洗后使用質(zhì)量濃度為2%的次氯酸鈉水溶液浸泡消毒,得到處理后的菊花莖段；
[0026]三、向培養(yǎng)箱中通入氧氣,然后將處理后的菊花莖段放入裝有育種培養(yǎng)液的培養(yǎng)箱中，在光照強(qiáng)度為2000LX，光照時(shí)間為12h/d，溫度為24°C的條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)期間用毛筆沾取花粉進(jìn)行人工輔助授粉，并每隔7天更換一次育種培養(yǎng)液，每次換液時(shí)剪去Icm處理后的菊花莖段；
[0027]四、待種子成熟，采集成熟的種子，放在通風(fēng)處自然陰干，完成菊花的離體育種。
[0028]本實(shí)施例步驟四采集種子的過程是將已經(jīng)落花的植株從培養(yǎng)液中拿出，將花朵剪下放在容器中，保持通風(fēng)良好， 自然風(fēng)干。神農(nóng)香菊在自然條件下生長(zhǎng)季平均降水量330毫米左右，開花季節(jié)要求平均氣溫為10°C，通過在東北林業(yè)大學(xué)試驗(yàn)田的測(cè)試可知，如在該試驗(yàn)田自然生長(zhǎng)神農(nóng)香菊的結(jié)實(shí)率為0，經(jīng)本實(shí)施例離體培養(yǎng)結(jié)實(shí)率為5%。
【權(quán)利要求】
1.一種菊花離體育種方法，其特征在于菊花離體育種方法按下列步驟實(shí)現(xiàn): 一、向MS培養(yǎng)液中加入NAA溶液和6-BA溶液，經(jīng)消毒處理后得到育種培養(yǎng)液； 二、對(duì)處于開花期的菊花莖段進(jìn)行處理，保留兩個(gè)花頭，保留菊花莖段的3片葉子，菊花莖段的長(zhǎng)度裁剪為10±0.5cm，使用清水沖洗后消毒，得到處理后的菊花莖段； 三、向培養(yǎng)箱中通入氧氣，然后將處理后的菊花莖段放入裝有育種培養(yǎng)液的培養(yǎng)箱中，在光照強(qiáng)度為2000~3000LX，光照時(shí)間為10~12h/d，溫度為20~24°C的條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)期間用毛筆沾取花粉進(jìn)行人工輔助授粉，并每隔7天更換一次育種培養(yǎng)液，每次換液時(shí)剪去1cm處理后的菊花莖段； 四、待種子成熟，采集成熟的種子，放在通風(fēng)處自然陰干，完成菊花的離體育種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種菊花離體育種方法，其特征在于步驟一所述的育種培養(yǎng)液的制備方法是向1000~2000mll/2MS培養(yǎng)液中加入2~5ml濃度為0.5mg/L的NAA溶液和2~5ml濃度為2.0mg/L的6-BA溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種菊花離體育種方法，其特征在于步驟一中所述的消毒處理方式是采用高壓蒸汽滅菌消毒。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種菊花離體育種方法，其特征在于步驟二所述的消毒方式是采用次氯酸鈉的水溶液浸泡消毒。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種菊花離體育種方法，其特征在于步驟三在光照強(qiáng)度為2000LX，光照時(shí)間為12h/d，培養(yǎng)溫度為24°C的條件下培養(yǎng)。
【文檔編號(hào)】A01H5/00GK103828718SQ201410083025
【公開日】2014年6月4日 申請(qǐng)日期:2014年3月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月7日
【發(fā)明者】何淼, 李海芯, 高文杰, 徐鵬飛, 焦宏彬, 劉穎竹, 李強(qiáng), 孫穎, 周蘊(yùn)薇 申請(qǐng)人:東北林業(yè)大學(xué)