一種巴戟天組織培養(yǎng)育苗方法
【專利摘要】本發(fā)明針對巴戟天人工繁育難度大，成苗率低的問題，提供一種組織培養(yǎng)育苗方法，具體包括采種、培養(yǎng)無菌苗、誘導(dǎo)培養(yǎng)基、誘導(dǎo)叢生芽、叢生芽繼代增殖、誘導(dǎo)生根、試管苗的移栽等具體步驟，具有取材方便，叢生芽誘導(dǎo)率達(dá)50%～80%，成苗達(dá)85%以上，能保持巴戟天藥用成分，移栽后生長快，可以滿足人工大面積栽培對巴戟天苗的需要的有益效果。
【專利說明】一種巴戟天組織培養(yǎng)育苗方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中草藥材栽培技術(shù)，具體涉及一種巴戟天育苗的方法，尤其是巴戟天 的組織培養(yǎng)育苗方法，屬于中藥材栽培【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 巴戟天(學(xué)名：Morinda officinalis How),為雙子葉植物茜草科（Rubiaceae)，纏繞 藤本，葉對生，膜質(zhì)，長圓形，長3?13cm，寬1. 5?5cm，前端短漸尖，基部鈍形或圓形，主要 分布于廣東、廣西，屬藥用植物。
[0003] 巴戟天的藥用部位是根，根呈扁圓柱形，略彎曲，主治陽痿遺精、宮冷不孕、月經(jīng)不 調(diào)、少腹冷痛、風(fēng)濕痹痛、筋骨痿軟。
[0004] 除了作為傳統(tǒng)的中藥材使用外，醫(yī)藥工業(yè)還以巴戟天作為原料，大量研制開發(fā)用 于補(bǔ)腎壯陽，強(qiáng)筋骨的中成藥產(chǎn)品：如人參鹿茸丸、全鹿大補(bǔ)丸、杜仲地黃丸、還少丸、龜鹿 滋腎丸、參茸丸、安腎丸、固本丸等，因此巴戟天的需求量越來越大，年需求量超過60萬公 斤，并以每年10% -15%的速率增長，但巴戟天的地域分布范圍相當(dāng)有限，在自然條件下，巴 戟天開花結(jié)莢期的病蟲害嚴(yán)重、種子成熟時容易自然脫落，因此自然繁殖系數(shù)極低，且為了 滿足市場需求，獲得經(jīng)濟(jì)利益，人們大量采挖野生巴戟天資源，致使野生巴戟天資源瀕臨滅 絕。
[0005] 為滿足需要，人們不得不發(fā)展人工栽培技術(shù)，而開展巴戟天人工栽培，首先要解決 巴戟天育苗問題。而巴戟天不僅自然繁殖系數(shù)低，通過采收種子進(jìn)行人工繁殖難度也很大， 成苗率不到20%，幾乎失敗。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 發(fā)明目的：本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中巴戟天人工繁育難度大，成苗率低的 問題，提供一種組織培養(yǎng)育苗方法，提高巴戟天育苗成苗率，而且能保持巴戟天藥用成分， 移栽后生長快，可大面積進(jìn)行巴戟天人工栽培。
[0007] 技術(shù)方案：本發(fā)明所述的一種巴戟天組織培養(yǎng)育苗方法，具體包括以下步驟： 1.采種，選健壯、無病蟲害的野生巴戟天植株作采種母株，每年霜降節(jié)氣過后，種子成 熟，即可采種。
[0008] 2.無菌苗的培養(yǎng)，將巴戟天種子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒15分鐘，在超凈工作 臺上用無菌水浸洗5次，每次浸洗3分鐘，然后將種子播種于培養(yǎng)基，在室內(nèi)自然散射光照 下培養(yǎng)。
[0009] 3.誘導(dǎo)培養(yǎng)基，以MS為基本培養(yǎng)基，加入不同濃度的植物激素進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)， 植物激素用芐基嘌呤（BA)和奈乙酸（NAA)，芐基嘌呤（BA)濃度為1. 0?2. 5mg/L，優(yōu)選為 2. Omg/L，奈乙酸（NAA)濃度為0· 1?0· 3mg/L，優(yōu)選為0· 2mg/L，同時加入2. 5%的鹿糖和 〇. 7%的瓊脂，培養(yǎng)基溫度保持24°C?26°C，PH值5. 9?6. 2。
[0010] 4.叢生芽誘導(dǎo)，當(dāng)步驟2培養(yǎng)的無菌苗長至5?6厘米后，切取上部2. 6?2. 9厘 米長的頂芽莖段，接入誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基培養(yǎng)28天后即有叢生芽形成。
[0011] 5.叢生芽繼代增殖，叢生芽誘導(dǎo)50天后，平均高達(dá)3. 5?4. 5厘米時，將叢生芽切 成3芽一簇，轉(zhuǎn)至另一誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基，25天?30天后，每簇增殖至45?50個叢生芽。
[0012] 6.誘導(dǎo)生根，當(dāng)繼代增殖的叢生芽有70%長至3?4厘米時，將健壯的芽單切，并 轉(zhuǎn)到新的誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，18天后基部切口開始分化出根。
[0013] 7.試管苗的移栽，將發(fā)育良好，具有2?3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室 溫下煉苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培養(yǎng)基，在有75%?80%遮蔭度的大棚內(nèi)， 移栽到苗床或營養(yǎng)杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保 持空氣濕度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常規(guī)管理。
[0014] 有益效果：本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其有益效果是： 本發(fā)明的巴戟天育苗方法，取材方便，叢生芽誘導(dǎo)率達(dá)50%?80%，成苗達(dá)85%以上，可 以滿足人工大量栽培的需要，而且經(jīng)過薄層色譜技術(shù)鑒定，本方法培養(yǎng)出的試管苗具有生 物合成藥用有效成分甲基異茜草素、大黃素甲醚、水晶蘭甙和四乙酰車葉草甙的能力。
[0015]

【具體實施方式】 下面結(jié)合具體實施事例對本發(fā)明技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0016] 實施例1 : 一種巴戟天組織培養(yǎng)育苗，其具體步驟如下： 1. 采種，選健壯、無病蟲害的野生巴戟天植株作采種母株，每年霜降節(jié)氣過后，種子成 熟，即可采種； 2. 無菌苗的培養(yǎng)，將巴戟天種子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒15分鐘，在超凈工作臺上 用無菌水浸洗5次，每次浸洗3分鐘，然后將種子播種于培養(yǎng)基，在室內(nèi)自然散射光照下培 養(yǎng)； 3. 誘導(dǎo)培養(yǎng)基，以MS為基本培養(yǎng)基，加入植物激素進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，植物激素用芐基嘌 呤（BA)和奈乙酸（NAA)，芐基嘌呤（BA)濃度為1.0/L，奈乙酸（NAA)濃度為0. lmg/L，同時加 入2. 5%的蔗糖和0. 7%的瓊脂，培養(yǎng)基溫度保持24°C?26°C，PH值5. 9?6. 2 ; 4. 叢生芽誘導(dǎo)，當(dāng)步驟2培養(yǎng)的無菌苗長至5?6厘米后，切取上部2. 6?2. 9厘米長 的頂芽莖段，接入誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基培養(yǎng)28天后即有叢生芽形成，叢生芽誘導(dǎo)率為50% ; 5. 叢生芽繼代增殖，叢生芽誘導(dǎo)50天后，平均高達(dá)3. 5?4. 5厘米時，將叢生芽切成3 芽一簇，轉(zhuǎn)至另一誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基，25天?30天后，每簇增殖至45?50個叢生芽； 6. 誘導(dǎo)生根，當(dāng)繼代增殖的叢生芽有70%長至3?4厘米時，將健壯的芽單切，并轉(zhuǎn)到 新的誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，18天后基部切口開始分化出根； 7. 試管苗的移栽，將發(fā)育良好，具有2?3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下 煉苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培養(yǎng)基，在有75%?80%遮蔭度的大棚內(nèi)，移 栽到苗床或營養(yǎng)杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持 空氣濕度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常規(guī)管理。
[0017] 實施例2 :-種巴戟天組織培養(yǎng)育苗，其具體步驟如下： 1. 采種，選健壯、無病蟲害的野生巴戟天植株作采種母株，每年霜降節(jié)氣過后，種子成 熟，即可采種； 2. 無菌苗的培養(yǎng)，將巴戟天種子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒15分鐘，在超凈工作臺上 用無菌水浸洗5次，每次浸洗3分鐘，然后將種子播種于培養(yǎng)基，在室內(nèi)自然散射光照下培
【權(quán)利要求】
1. 一種巴戟天組織培養(yǎng)育苗方法，其特征在于包括以下步驟： (1) 采種，選健壯、無病蟲害的野生巴戟天植株作采種母株，每年霜降節(jié)氣過后，種子成 熟，即可采種； (2) 無菌苗的培養(yǎng)，將巴戟天種子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒，后在超凈工作臺上用 無菌水浸洗5次，每次浸洗3分鐘，然后將種子播種于培養(yǎng)基，在室內(nèi)自然散射光照下培 養(yǎng)； (3) 誘導(dǎo)培養(yǎng)基，以MS為基本培養(yǎng)基，加入植物激素進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，植物激素用芐基 嘌呤（BA)和奈乙酸（NAA)，同時加入2. 5%的蔗糖和0. 7%的瓊脂，培養(yǎng)基溫度保持24°C? 26°C，PH 值 5. 9 ?6. 2 ; (4) 叢生芽誘導(dǎo)，當(dāng)無菌苗長至5?6厘米后，切取上部2. 6?2. 9厘米長的頂芽莖段， 接入誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基培養(yǎng)叢生芽； (5) 叢生芽繼代增殖，叢生芽誘導(dǎo)后，平均高達(dá)3. 5?4. 5厘米時，將叢生芽切成3芽一 簇，轉(zhuǎn)至另一誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基進(jìn)行繼代增殖； (6) 誘導(dǎo)生根，當(dāng)繼代增殖的叢生芽有70%長至3?4厘米時，將健壯的芽單切，并轉(zhuǎn)到 新的誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根； (7) 試管苗的移栽，將發(fā)育良好，具有2?3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下 煉苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培養(yǎng)基，在有75%?80%遮蔭度的大棚內(nèi)，移 栽到苗床或營養(yǎng)杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持 空氣濕度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常規(guī)管理。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的巴戟天組織培養(yǎng)育苗方法，其特征在于所述的步驟（2)巴戟 天種子置于〇. 2%升汞溶液浸泡消毒的時間為15分鐘。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的巴戟天組織培養(yǎng)育苗方法，其特征在于所述的步驟（3)的植 物激素芐基嘌呤（BA)濃度為1. 0?2. 5mg/L，奈乙酸（NAA)濃度為0. 1?0. 3mg/L。
【文檔編號】A01H4/00GK104041417SQ201410326231
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年7月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月10日
【發(fā)明者】黃振忠 申請人:黃振忠