一種組織培養(yǎng)繁殖紫山藥種苗的方法
【專利摘要】一種組織培養(yǎng)繁殖紫山藥種苗的方法，該方法以紫山藥嫩莖尖1.0cm為外植體，在對外植體用75％酒精和0.1％氯化汞溶液進行消毒滅菌后，接種于初始培養(yǎng)基MS0，待莖尖成活后，取再生芽莖尖（0.5-1.0mm）處理，根據(jù)不同時期需要采用不同的培養(yǎng)基配方分別進行莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)、莖尖繼代增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)獲得紫山藥瓶苗；待苗高2cm左右時再將瓶苗移栽營養(yǎng)缽基質(zhì)煉苗，培育50－60天苗生長10cm即為紫山藥種苗。所述莖尖誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基為MS+6BA0.5mg·L-1NAA0.1mg·L-1，生根培養(yǎng)基為1/2MS＋NAA0.2mg·L-1＋Ac0.2g·L-1；以上所述培養(yǎng)基含45g·L-1食用糖，瓊脂6g·L-1，pH5.7。本發(fā)明催芽方式簡便，萌芽速度快；本發(fā)明脫毒方試簡捷，脫毒率高；品種優(yōu)純；本發(fā)明方法可實現(xiàn)紫山藥組培苗工廠化生產(chǎn)和品種改良的推廣。
【專利說明】一種組織培養(yǎng)繁殖紫山藥種苗的方法
[0001]

【技術(shù)領(lǐng)域】 本發(fā)明涉及一種組織培養(yǎng)繁殖紫山藥種苗的方法，屬植物無性繁殖【技術(shù)領(lǐng)域】。
[0002]

【背景技術(shù)】 紫山藥（Purple yam)別名薯截或腳板薯，長芋。為薯截科(iT/oscoreaceae)薯截屬 (ZVoscorm)的一個地方品種，為多年生蔓性植物，塊根呈塊狀或圓柱狀表皮和肉質(zhì)呈紫紅 色而得名。紫山藥因肥大的塊根肉質(zhì)細膩滑爽，口感極佳，富含粘性蛋白，紫色花青素， 維生素和膽堿等，并富含薯蕷皂（天然的DHEA)，內(nèi)含各種荷爾蒙基本物質(zhì)，常吃有促進內(nèi) 分泌荷爾蒙的合成作用等多種獨特的食療價值也稱〃紫人參"，據(jù)本草綱目藥書的記載， 經(jīng)常食用紫山藥，不僅可以增加人體的抵抗力，降低血壓、血糖、抗衰益壽等功效，，而且還 有固腎、潤肺益精、軟化血管等藥用滋補功能。故又被稱做〃蔬菜之王〃之美譽。
[0003] 紫山藥是無性繁殖的植物。由于長期的塊莖繁殖，導(dǎo)致種性退化，品質(zhì)下降，產(chǎn)量 降低。隨著農(nóng)藥化肥的大量施用，病毒病不但得不到控制，而且更加嚴重至蔓延，危及到整 個產(chǎn)業(yè)以致某些優(yōu)良品種瀕臨滅絕。在山藥生長初期，病毒病癥狀并不明顯。在生長的中 后期，癥狀逐漸明顯，發(fā)病初期葉上出現(xiàn)明顯的褪綠斑，隨后綠色花斑逐漸隆起，葉片斑 駁花葉、凸凹卷曲畸形、黃化或壞死，感病葉片明顯小于健壯葉片，嚴重時整株矮化，生長 緩慢，地下塊莖明顯小于健壯的植株，并且畸形，產(chǎn)量下降。不但滿足不了市場的供求， 還嚴重影響和制約了地方產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和種植極積性。據(jù)資料表明并且證實了病毒病是造成 山藥產(chǎn)量下降，品質(zhì)退化的重要因素。由于病毒在寄主植物體內(nèi)隨維管系統(tǒng)轉(zhuǎn)移，而在細胞 與細胞之間，病毒可通過胞間連絲擴散轉(zhuǎn)移，因此，一旦感染植物病毒往往蔓延全株，對寄 主植物可造成滅性危害。導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)，甚至全株死亡，病毒侵入植物體內(nèi)，改變了細胞 的代謝途徑，使正常的生理機能受到于擾和破壞，造成種性退化，抗性降低，生長受阻或出 現(xiàn)變色、壞死、畸形，產(chǎn)量降低，品種變劣，甚至完全喪失商品價值。
[0004] 為保證該物種遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性，只有通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)，采用植物營養(yǎng)體 進行快速繁殖，才可保持原品種全部的遺傳性，實現(xiàn)該品種種質(zhì)的一致性。據(jù)資料顯示通過 人工脫毒無性繁殖的惠樓山藥要比一般山藥增產(chǎn)30%以上。因此選育良種，改良品質(zhì)，增加 產(chǎn)量已是當前生產(chǎn)上必需亟待解決的主要問題。
[0005] 目前尚無有效的藥物可防治愈病毒病的發(fā)生或蔓延，而采用現(xiàn)代生物技術(shù)選取優(yōu) 良無病株種苗進行離體脫毒培養(yǎng)，繁殖無毒或少毒苗，以組培苗更替?zhèn)鹘y(tǒng)的營養(yǎng)繁殖才能 從根本上解決病毒病的問題。
[0006]


【發(fā)明內(nèi)容】
本發(fā)明的目的是，根據(jù)紫山藥塊莖繁殖存在的問題，本發(fā)明公開一種地方紫色山藥 (薯）的莖尖組織培養(yǎng)快繁種苗的方法。
[0007] 本發(fā)明的技術(shù)方案是，本發(fā)明方法以紫山藥嫩莖尖（lcm)為外植體，在對外植體 用75%酒精和0. 1 %氯化汞溶液進行消毒滅菌后，接種于初始培養(yǎng)基MS0,待莖尖成活后， 取再生芽莖尖（0. 5 - 1. 0mm)接種，根據(jù)不同時期需要采用不同的培養(yǎng)基配方分別進行莖 尖誘導(dǎo)培養(yǎng)、莖尖繼代增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)獲得紫山藥瓶苗。其中莖尖誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基
【權(quán)利要求】
1. 一種組織培養(yǎng)繁殖紫山藥種苗的方法，其特征在于，所述方法以紫山藥嫩頂芽為 外植體，在對外植體用75%酒精和0. 1%氯化汞溶液進行消毒滅菌后，接種于初始培養(yǎng)基 MS0,待莖尖成活后，取再生芽莖尖接種，根據(jù)不同時期需要采用不同的培養(yǎng)基配方分別進 行莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)、莖尖繼代增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)獲得紫山藥瓶苗；待苗高2cm左右時再將 瓶苗移栽營養(yǎng)缽基質(zhì)煉苗，培育50 - 60天苗生長10cm以上即為紫山藥種苗。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種組織培養(yǎng)繁殖紫山藥種苗的方法，其特征在于，所 述莖尖誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基為MS+6BA0. 5mg · L-1 ΝΑΑ0. 1 mg · L-1，生根培養(yǎng)基為1/2MS + NAAO. 2mg · L-1 + AcO. 2g · L-1 ;以上所述培養(yǎng)基含 45g · L-1 食用糖，瓊脂 6g · L-1，PH5. 7。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種組織培養(yǎng)繁殖紫山藥種苗的方法，其特征在于，所述營 養(yǎng)缽基質(zhì)煉苗，基質(zhì)為黃土和珍珠巖，或泥碳和珍珠巖；黃土與珍珠巖石的體積比為2 :3 ; 泥碳與珍珠巖的體積比為3 :2 ;煉苗50 - 60天，苗高10cm以上即為紫山藥種苗。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種組織培養(yǎng)繁殖紫山藥種苗的方法，其特征在于，所述紫 山藥初始培養(yǎng)嫩頂芽長度為lcm ;所述再生芽莖尖培養(yǎng)0. 5 - 1. 0mm。
【文檔編號】A01H4/00GK104115753SQ201410389906
【公開日】2014年10月29日 申請日期:2014年8月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月11日
【發(fā)明者】王碧琴, 余發(fā)新, 劉騰云, 肖亮 申請人:江西省科學(xué)院生物資源研究所