防治柑橘黃龍病的微生物菌劑及制造方法
【專利摘要】本發(fā)明屬生物領(lǐng)域，提供一種防治柑橘黃龍病的復合微生物菌劑。所述菌劑由二株或二株以上公知的原始菌種和含多種微量元素的基質(zhì)組成。作為復合菌群中主體菌類的放線菌占60～90%，作為輔助菌類的植物桿菌等占10～40%，各菌類成分配比根據(jù)土壤環(huán)境條件及施肥條件的不同而改變。選用的菌類在復雜多變的生態(tài)環(huán)境下增殖、優(yōu)選、強化，培養(yǎng)成的多功能菌群。該菌群能在柑橘類植物根際土壤中繁殖并侵染柑橘類作物，發(fā)揮“以菌治菌”生物防治柑橘黃龍病的功效，還能為柑橘提供氮磷鉀營養(yǎng)元素發(fā)揮生物肥料的功效。
【專利說明】防治柑橘黃龍病的微生物菌劑及制造方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物領(lǐng)域，尤其涉及一種防治柑橘黃龍病的微生物菌劑及制造方法。

【背景技術(shù)】
[0002]柑橘作為世界第一大水果，全世界年產(chǎn)量I億噸，種植面積I億畝。有140個國家和地區(qū)栽培柑橘，主要集中在巴西、美國、中國及地中海沿海國家；2002年世界柑橘貿(mào)易額達82多億美元，是僅次于小麥、玉米的第三大貿(mào)易農(nóng)產(chǎn)品
黃龍病(英文:Huanglongbing，英文簡稱:HLB)是威脅柑橘產(chǎn)業(yè)生存發(fā)展的毀滅性病害，目前，我國種植柑橘橙的19個省區(qū)已有11個遭受黃龍病危害，受害面積占栽培面積的80%以上，產(chǎn)量占85%左右，據(jù)《華盛頓郵報》網(wǎng)站報道，美國佛羅里達州的橙樹50%患黃龍病，而且不斷蔓延，預(yù)計再過十年該州價值90億美元的柑橘業(yè)將被徹底毀掉。
[0003]黃龍病被發(fā)現(xiàn)已近100年，對其危害的研究日漸深入，普遍認為黃龍病的病原是一種類菌體，由一種飛木虱傳播，其對人體是無害的。但直至今日，全世界都認為黃龍病“可防可控不可治”，因為沒有找到一種治理黃龍病的有效藥物，中國官方鼓勵的防控辦法是從培育無菌苗開始，把病樹砍伐挖根燒毀以清理果園，控制其蔓延。參考消息網(wǎng)I月15日報道:“去年2月，來自20多個國家的500位科學家聚集在奧蘭多開會討論如何應(yīng)對黃龍病，盡管人們?yōu)檠芯窟@種病害已投入8000萬美元，但科學家仍然不知道如何消滅病菌或把它從樹木上消除”。
[0004]所以現(xiàn)在急需一種能夠有效治療黃龍病的制劑。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明實施例的目的在于提供一種防治柑橘黃龍病的微生物菌劑，其解決現(xiàn)有技術(shù)無法有效治療黃龍病的問題。
[0006]本發(fā)明實施例是這樣實現(xiàn)的，一種防治柑橘黃龍病的微生物菌劑，所述微生物菌劑包括:二株或二株以上的菌進行復合得到的復合菌種以及基質(zhì)；其中，所述復合菌種包括:主體菌類和輔助菌類，所述主體菌類的數(shù)量占比為60、0%，所述輔助菌類的數(shù)量占比為1(Γ40% ;所述主體菌類為:放線菌；所述輔助菌類為:植物桿菌或根瘤菌；
所述基質(zhì)為:包含多種微量元素的泥土，其中，所述多種微量元素含量以PPm計如下::鋰0.05?5、硼0.1?15、鎂5?15、硅5?15、硫10?30、鈣50?100、鈦0.1?3、鐵50?100、銅5?15、硒0.1?3、鉬0.5?5、釷0.05?5、鈉5?30、鋁0.5?5、磷0.5?5、鉀5?30、釩0.1?3、錳0.5?5、鈷0.1?3、鋅10?30、鋯0.1?3和鈰0.01?2。
[0007]可選的，所述泥土具體為:泥碳土、糖泥、污泥或淤泥中的任意二種或二種以上的組合。
[0008]可選的，所述放線菌具體為:美國的密西里游動放線菌、抗生鏈霉菌、金霉素鏈霉囷、鏈霉囷或委內(nèi)瑞拉鏈霉囷中的一種或多種。
[0009]可選的，所述植物桿菌具體為:枯草芽孢桿菌、玉米枯萎病桿菌、稻黃桿菌或甘蘭黑腐病桿菌的一種或多種；所述根瘤菌具體為:豇豆根瘤菌或苜宿根瘤菌。
[0010]可選的，所述復合菌種還包括:化學誘變劑，化學誘變劑含量為:0.5^10ppb ;所述化學誘變劑具體為:烷化劑、堿性類似物或Y啶化合物的一種或多種。
[0011]第二方面，提供一種上述的微生物菌劑的制造方法，所述方法包括:
將所述主體菌類和所述輔助菌類的菌株分別放入實驗室培養(yǎng)基培養(yǎng)擴大，其中，所述培養(yǎng)基為無菌密閉變溫環(huán)境，溫度變化在l°c?40°C之間，PH值變化在Γ10之間，對所述培養(yǎng)基進行震蕩操作和增氧操作得到主體菌類的菌液和輔助菌類的菌液；所述震蕩操作具體為:連續(xù)振蕩3天、間斷振蕩I天和停止振蕩3天；
將所述主體菌類的菌液和所述輔助菌類的菌液分別放入滅菌的培養(yǎng)基的種子罐，所述種子罐為無菌密閉變溫環(huán)境，溫度變化在1°C?40°C之間，PH值變化在Γ10之間，對所述種子罐進行增氧操作得到主體菌類的增殖菌液和輔助菌類的增殖菌液；、
將所述主體菌類的增殖菌液和所述輔助菌類的增殖菌液分別放入裝有經(jīng)過滅菌的培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中發(fā)酵再次增殖，所述發(fā)酵罐為無菌密閉變溫環(huán)境，溫度變化在1°C?40°C之間，PH值變化在4?10之間,對發(fā)酵罐連續(xù)曝氣5天得到濃度達標的主體菌液和輔助菌液，其中，所述曝氣的氣液比為:100:1 ；
對所述基質(zhì)進行高溫滅菌后，將所述濃度達標的主體菌液和輔助菌液放入高溫滅菌后的基質(zhì)攪拌均勻得到初始微生物菌劑；
將所述初始微生物菌劑放入密閉無菌、調(diào)溫調(diào)濕、通風、翻動的轉(zhuǎn)動床上固體發(fā)酵三天得到成品微生物菌劑。
[0012]可選的，所述方法在得到成品微生物菌劑之后，所述方法還包括:將成品微生物菌劑定量稱量裝袋，然后真空封口包裝后低于15°C保存。
[0013]可選的，所述基質(zhì)的制造方法具體為:將在泥碳土、糖泥、污泥或淤泥中的任意二種或二種以上的組合中加入礦物質(zhì)成分，所述礦物質(zhì)成分具體為:浮石粉、蛭石粉、粉煤灰粉、礦渣粉、冶煉渣粉等礦物質(zhì)成分的一種或多種的組合。
[0014]可選的，所述基質(zhì)的制造方法具體為:
將在泥碳土、糖泥、污泥或淤泥中的任意二種或二種以上的組合中加入如權(quán)利要求1所述的微量元素成分的人造固體化合物或水溶液來獲得基質(zhì)。
[0015]第三方面，提供一種采用上述微生物菌劑進行黃龍病的防治方法，所述方法包括:
在植株周圍土壤挖3?4個能見到須根的土坑或環(huán)溝，往坑里或環(huán)溝按每棵施10(Γ500克的量施入上述微生物菌劑；
往坑里或環(huán)溝在加入有機肥后，澆水蓋土，保持土壤潤濕
在本發(fā)明實施例中，本發(fā)明提供的技術(shù)方案提供一種防治柑橘黃龍病的微生物菌劑，通過實驗證明，可以非常有效的治療黃龍病，所以其具有有效治療黃龍病的優(yōu)點。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0016]圖1是本發(fā)明提供的一種防治柑橘黃龍病的微生物菌劑的制造方法的流程圖；
圖2是本發(fā)明提供的微生物菌劑進行黃龍病的防治方法的流程圖。
[0017]

【具體實施方式】
[0018]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實施例，對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應(yīng)當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0019]本發(fā)明【具體實施方式】提供一種防治柑橘黃龍病的微生物菌劑，該微生物菌劑包括:二株或二株以上的菌進行復合得到的復合菌種以及基質(zhì)；其中，該復合菌種包括:主體菌類和輔助菌類，該主體菌類的數(shù)量占比為6(Γ90%，該輔助菌類的數(shù)量占比為1(Γ40%;該主體菌類可以為:放線菌；該輔助菌類可以為:植物桿菌或根瘤菌；上述數(shù)量占比具體可以為，該菌類個數(shù)與復合菌種總個數(shù)的比例。
[0020]該基質(zhì)可以為:包含多種微量元素的泥土，其中，所述多種微量元素含量以ppm計如下:
鋰0.05?5、硼0.1?15、鎂5?15、硅5?15、硫10?30、鈣50?100、鈦0.1?3、鐵50?100、銅5?15、硒0.1?3、鉬0.5?5、釷0.05?5、鈉5?30、鋁0.5?5、磷0.5?5、鉀5?30、釩0.1?3、錳0.5?5、鈷0.1?3、鋅10?30、鋯0.1?3、鈰0.01?2。
[0021]本發(fā)明提供的微生物菌劑對防治柑、橘、橙、檸檬及柚的黃龍病非常有效。
[0022]可選的，上述泥土具體可以為:泥碳土、糖泥、污泥或淤泥中的任意二種或二種以上的組合。其中，泥碳土俗稱:褐煤、草炭、風化煤或泥煤等。
[0023]可選的，上述放線菌具體可以為:美國的密西里游動放線菌、抗生鏈霉菌、金霉素鏈霉囷、鏈霉囷或委內(nèi)瑞拉鏈霉囷中的一種或多種。
[0024]可選的，上述植物桿菌具體可以為:枯草芽孢桿菌、玉米枯萎病桿菌、稻黃桿菌或甘蘭黑腐病桿菌的一種或多種，上述根瘤菌具體可以為:豇豆根瘤菌或苜宿根瘤菌。
[0025]可選的，復合菌種還包括:化學誘變劑，其含量為:0.5^10ppb ;該化學誘變劑具體可以為:烷化劑、堿性類似物或Y啶化合物的一種或多種。
[0026]本發(fā)明【具體實施方式】還提供一種上述防治柑橘黃龍病的微生物菌劑的制造方法，該方法如圖1所示，包括如下步驟:
101、將上述主體菌類和輔助菌類的菌株分別放入實驗室培養(yǎng)基培養(yǎng)擴大，其中，該培養(yǎng)基可以放在無菌密閉變溫環(huán)境，溫度變化在IV?40 V之間，PH值在Γ10之間，對培養(yǎng)基進行震蕩操作和增氧操作得到主體菌類的菌液和輔助菌類的菌液；上述震蕩操作具體可以為:連續(xù)振蕩3天、間斷振蕩I天和停止振蕩3天；
102、將主體菌類的菌液和輔助菌類的菌液分別放入滅菌的培養(yǎng)基的種子罐增殖，該種子罐可以為無菌密閉變溫環(huán)境，溫度變化在1°C?40°C之間，PH值在Γ10之間，對種子罐進行增氧操作得到主體菌類的增殖菌液和輔助菌類的增殖菌液；
103、將主體菌類的增殖菌液和輔助菌類的增殖菌液分別放入裝有經(jīng)過滅菌的培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中發(fā)酵再次增殖，該發(fā)酵罐可以無菌密閉變溫環(huán)境，溫度變化在1°C?40°C之間，PH值在4?10之間，對發(fā)酵罐連續(xù)曝氣5天得到濃度達標的主體菌液和輔助菌液,其中，上述曝氣的氣液比可以為:100:1 ;該濃度達標的條件具體可以為:濃度達到3(Γ50億個活菌/ml ；
104、對基質(zhì)進行高溫滅菌后，將上述濃度達標的主體菌液和輔助菌液分別放入高溫滅菌后的基質(zhì)攪拌均勻得到初始微生物菌劑；
105、將初始微生物菌劑放入密閉無菌、調(diào)溫調(diào)濕、通風、翻動的轉(zhuǎn)動床上固體發(fā)酵三天得到成品微生物菌劑。
[0027]上述成品微生物菌劑需要達到菌體個數(shù):2?3億個/克，水份:2(Γ35%，ΡΗ6.5?7.2。
[0028]可選的，上述方法還可以包括:將成品微生物菌劑定量稱量裝袋真空封口包裝低于15°C保存。
[0029]可選的，上述基質(zhì)的制造方法具體可以為:將在泥碳土、糖泥、污泥或淤泥中的任意二種或二種以上的組合中加入礦物質(zhì)成分，該礦物質(zhì)成分具體可以為:浮石粉、蛭石粉、粉煤灰粉、礦渣粉、冶煉渣粉等礦物質(zhì)成分的一種或多種的組合。
[0030]可選的，上述基質(zhì)的制造方法還可以為:
將在泥碳土、糖泥、污泥或淤泥中的任意二種或二種以上的組合中加入上述微量元素成分的人造固體化合物或水溶液來獲得基質(zhì)。
[0031]本發(fā)明的優(yōu)點在于把放線菌為主的優(yōu)勢菌株配合其它菌類，通過優(yōu)化組合、合理配比，并把這些菌株在復雜多變甚至“嚴酷”的生態(tài)環(huán)境條件下進行增殖、優(yōu)選、強化，從而培養(yǎng)出有更強的生命力的微生物菌群。當該微生物菌群被吸收在基質(zhì)上制成菌劑進入土壤環(huán)境中，就能各顯其能，發(fā)揮菌與菌之間、菌與作物之間以及菌與土壤環(huán)境之間的“優(yōu)勝劣汰效應(yīng)”、“菌類共榮及營養(yǎng)調(diào)控效應(yīng)”、“固氮與解磷解鉀效應(yīng)”。本發(fā)明微生物菌劑改土、月巴地、防病治病的綜合功效是有益菌群群體功能的發(fā)揮，是有益微生物群體調(diào)節(jié)植株與根際環(huán)境生態(tài)平衡的體現(xiàn)。
[0032]本發(fā)明菌劑對防治柑、橘、橙、檸檬及柚的黃龍病有效。
[0033]本發(fā)明【具體實施方式】還提供一種采用上述微生物菌劑進行黃龍病的防治方法，該方法如圖2所示,包括:
201、在植株周圍土壤挖:Γ4個能見到須根的土坑或環(huán)溝，往坑里或環(huán)溝按每棵施100^500克的量施入上述微生物菌劑；
202、往坑里或環(huán)溝在加入有機肥后，澆水蓋土，保持土壤潤濕。
[0034]可選的，上述方法在202之后還可以包括:向果樹上噴廣3%濃度的氨基酸水溶液。
[0035]采用如圖2所示的方法處理后，過I到3個月，就能見到黃龍病的療效:黃葉轉(zhuǎn)綠、萌發(fā)新芽、開花結(jié)果(見效快慢與溫度、濕度、土壤肥料條件、施肥習慣有關(guān))。春秋兩季是施用本微生物菌劑最佳時間，與果樹施肥時間一致，還可少施1/3常規(guī)肥，每年施I一2次，同時往樹上噴廣3%的氨基酸水溶液效果更佳。有病能治，無病可防。
[0036]本發(fā)明的實驗室采用的原始菌株的形態(tài)和性能都是國內(nèi)外文獻或教科書可查到的公知菌類，這些菌株可以從自然界中提取選育自用，也可以與國內(nèi)外有關(guān)單位或?qū)＜医涣鹘粨Q而獲得，本發(fā)明采用的細菌培養(yǎng)基都可以從國內(nèi)外文獻記載中隨意選用。
[0037]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種防治柑橘黃龍病的微生物菌劑，其特征在于，所述微生物菌劑包括:二株或二株以上的菌進行復合得到的復合菌種以及基質(zhì)；其中，所述復合菌種包括:主體菌類和輔助菌類，所述主體菌類的數(shù)量占比為60、0%，所述輔助菌類的數(shù)量占比為1(Γ40% ;所述主體菌類為:放線菌；所述輔助菌類為:植物桿菌或根瘤菌； 所述基質(zhì)為:包含多種微量元素的泥土，其中，所述多種微量元素的含量范圍以PPm計如下: 鋰0.05?5、硼0.1?15、鎂5?15、硅5?15、硫10?30、鈣50?100、鈦0.1?3、鐵50?100、銅5?15、硒0.1?3、鉬0.5?5、釷0.05?5、鈉5?30、鋁0.5?5、磷0.5?5、鉀5?30、釩0.1?3、錳0.5?5、鈷0.1?3、鋅10?30、鋯0.1?3和鈰0.01?2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于，所述泥土具體為:泥碳土、糖泥、污泥或淤泥中的任意二種或二種以上的組合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于，所述放線菌具體為:美國的密西里游動放線菌、抗生鏈霉菌、金霉素鏈霉菌、鏈霉菌或委內(nèi)瑞拉鏈霉菌中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于，所述植物桿菌具體為:枯草芽孢桿菌、玉米枯萎病桿菌、稻黃桿菌或甘蘭黑腐病桿菌的一種或多種；所述根瘤菌具體為:豇豆根瘤菌或苜宿根瘤菌。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于，所述復合菌種還包括:化學誘變齊?，化學誘變劑含量為:0.5^10ppb ;所述化學誘變劑具體為:烷化劑、堿性類似物或Y啶化合物的一種或多種。
6.—種如權(quán)利要求1一5任一所述的微生物菌劑的制造方法,其特征在于,所述方法包括: 將所述主體菌類和所述輔助菌類的菌株分別放入實驗室培養(yǎng)基培養(yǎng)擴大，其中，所述培養(yǎng)基放在無菌密閉變溫環(huán)境，溫度變化在1°C?40°C之間，PH值變化在Γ10之間，對所述培養(yǎng)基進行震蕩操作和增氧操作得到主體菌類的菌液和輔助菌類的菌液；所述震蕩操作具體為:連續(xù)振蕩3天、間斷振蕩I天和停止振蕩3天； 將所述主體菌類的菌液和所述輔助菌類的菌液分別放入滅菌的培養(yǎng)基的種子罐，所述種子罐為無菌密閉變溫環(huán)境，溫度變化在1°C?40°C之間，PH值變化在Γ10之間，對所述種子罐進行增氧操作得到主體菌類的增殖菌液和輔助菌類的增殖菌液；、 將所述主體菌類的增殖菌液和所述輔助菌類的增殖菌液分別放入裝有經(jīng)過滅菌的培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中發(fā)酵再次增殖，所述發(fā)酵罐為無菌密閉變溫環(huán)境，溫度變化在1°C?40°C之間，PH值變化在4?10之間，對發(fā)酵罐連續(xù)曝氣5天得到濃度達標的主體菌液和輔助菌液，其中，所述曝氣的氣液比為:100:1 ; 對所述基質(zhì)進行高溫滅菌后，將所述濃度達標的主體菌液和輔助菌液分別放入高溫滅菌后的基質(zhì)攪拌均勻得到初始微生物菌劑； 將所述初始微生物菌劑放入密閉無菌、調(diào)溫調(diào)濕、通風、翻動的轉(zhuǎn)動床上固體發(fā)酵三天得到成品微生物菌劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法在得到成品微生物菌劑之后，所述方法還包括:將成品微生物菌劑定量稱量裝袋，然后真空封口包裝后低于15°C保存。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述基質(zhì)的制造方法具體為:將在泥碳土、糖泥、污泥或淤泥中的任意二種或二種以上的組合中加入礦物質(zhì)成分，所述礦物質(zhì)成分具體為:浮石粉、蛭石粉、粉煤灰粉、礦渣粉、冶煉渣粉等礦物質(zhì)成分的一種或多種的組合。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述基質(zhì)的制造方法具體為: 將在泥碳土、糖泥、污泥或淤泥中的任意二種或二種以上的組合中加入如權(quán)利要求1所述的微量元素成分的人造固體化合物或水溶液來獲得基質(zhì)。
10.一種采用上述微生物菌劑進行黃龍病的防治方法，其特征在于，所述方法包括: 在植株周圍土壤挖3?4個能見到須根的土坑或環(huán)溝，往坑里或環(huán)溝按每棵施10(Γ500克的量施入上述微生物菌劑； 往坑里或環(huán)溝在加入有機肥后，澆水蓋土，保持土壤潤濕。
【文檔編號】A01P1/00GK104230523SQ201410407246
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年8月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月18日
【發(fā)明者】陳民 申請人:深圳市農(nóng)博生物技術(shù)有限公司