一種耐煙堿黑水虻品系的培育方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及昆蟲培育【技術領域】，具體公開了一種耐煙堿黑水虻品系的培育方法。所述培育方法為將耐煙堿黑水虻品種的黑水虻卵接種在含煙堿的第一配方料中，將蟲卵培育至幼蟲老熟、化蛹，黑水虻蛹羽化后直接利用煙堿水溶液喂養(yǎng)成蟲，待其產(chǎn)卵后，進入下一世代的馴化培育，經(jīng)過20～30世代的連續(xù)馴化培育，即可獲得穩(wěn)定的耐煙堿黑水虻品系。所述第二配方料為煙堿質量百分比濃度2‰～3‰的水溶液。本發(fā)明直接采用適宜濃度的煙堿水溶液與麩皮和進口魚粉科學配伍，獲得的第一配方料不僅成功掩蓋煙堿的難聞和苦味，營養(yǎng)成分適當，保證黑水虻幼蟲生長順利，而且因為第一配方料和第二配方料的煙堿含量的適當性和確定性，確保在同樣的培育環(huán)境中，不同批次的同樣重量組成的配方料獲得的黑水虻老熟幼蟲率基本相同，獲得穩(wěn)定的培育效果。
【專利說明】一種耐煙堿黑水虻品系的培育方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及昆蟲培育【技術領域】，具體涉及一種耐煙堿黑水虻品系的培育方法。

【背景技術】
[0002] 不適用鮮煙葉指不適合用于烤煙生產(chǎn)的新鮮煙葉(含水量80?90%)，與文獻中大 量提及的烤煙生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的廢次煙葉或低次煙葉(含水量約15%)不同。不適用煙葉通 常是指煙株正常封頂并清除2?3片奶腳葉后，卷煙工業(yè)不適用的、需在田間清除處理的下 部葉和上部葉，主要包括煙株底部因光照不足、發(fā)育不良、內(nèi)含物不足、預計烤后品質較差、 不具備烘烤價值的2片下部葉，以及煙株頂部開片不良、長度不足、結構僵硬、烤后品質較 差的2片頂葉。
[0003] 這些不適用煙葉若隨意丟棄田間地頭，極易造成環(huán)境污染和煙草病毒的重復感 染，若采用現(xiàn)有技術的集中銷毀或填埋的處理方式則需花費大量的費用，目前行業(yè)每噸不 適用煙葉的處理費用平均高達200元，各煙葉產(chǎn)區(qū)往往需要在當?shù)攸h委政府的組織領導 下，進行政策宣傳、造冊登記、建設處理設施、統(tǒng)一清除、記錄存檔、公示、兌現(xiàn)補貼等措施督 促進行不適用煙葉的處理，費時費力費成本。
[0004] 采用耐煙堿的昆蟲對不適用煙葉進行生物處理是一種較好的替代處理方法，環(huán) 保，經(jīng)濟效益高。為了利用昆蟲實現(xiàn)生物處理不適用鮮煙葉，首先需篩選出耐煙堿的昆蟲品 種。
[0005] 本 申請人:基于對家蠅和不適用煙葉處理技術的長期研究，總結出利用不適用煙葉 對家蠅進行耐煙堿品系的篩選、強化和培育方法。所述培育是將耐煙堿家蠅的卵接種于第 一配方料，家蠅蛹羽化后用第二配方料喂養(yǎng)成蟲，經(jīng)過20?30代的連續(xù)馴化獲得耐煙堿家 蠅品種。其方法的關鍵在于第一配方料和第二配方料的組成以保證耐煙堿家蠅的順利生 長。第一配方料組成為不適用鮮煙葉75?80%，麩皮10?15%，進口魚粉5?10% ;第二配 方料組成為全脂奶粉70%、紅糖29. 8?29. 9%、純煙堿0. 1?0. 2%。
[0006] 該技術方案可以成功培育出耐煙堿的家蠅品種，但是不同批次培育獲得的老熟黑 水虻幼蟲的數(shù)量相差較大，耐煙堿能力也有所區(qū)別，存在效果的不確定性。主要原因在于不 適用煙葉的應用方面，雖然經(jīng)過創(chuàng)造性的研究和大量實驗總結出配方料中添加合理范圍的 不適用煙葉可保證對家蠅幼蟲毒害作用的控制，但影響不煙葉煙堿含量的因素非常繁多， 機理復雜，較難實現(xiàn)準確控制。影響煙葉中煙堿含量的因素主要包括：（1)不同生長期，煙 葉中所含煙堿含量不同：煙草種子中煙堿含量為〇,育苗過程中起開始在根部形成，后隨著 根系的發(fā)展壯大，煙堿的合成和積累能力逐漸增強，所以不同生長期，煙葉中所含煙堿含量 不同；（2)煙株不同部位，煙堿含量顯著不同，煙堿含量還受葉位和葉數(shù)較大的影響；（3) 不同品種煙葉所含煙堿量不同；（4) 土壤干濕的氣候條件等均對煙堿含量有不同積蓄的影 響；（5)農(nóng)藝措施的不同顯著影響煙葉煙堿含量，包括施肥種類、栽培密度、打頂抹杈施肥、 環(huán)割和切根施肥、采收方式等等因素都顯著影響煙葉中的煙堿含量，以施肥種類為例，三種 形態(tài)的氮肥中，尿素施用后，煙堿積累最高，硝銨次之，硝酸鉀處理的煙堿積累最低，比施用 尿素低27% ;以打頂時期為例，張丹等研究發(fā)現(xiàn)，隨打頂時期推遲煙堿積累強度高峰依次下 降，煙堿含量也依次減低，每推遲一天打頂，煙堿含量就下降〇. 0504% ;再以切根施肥為例， 切根1/8與不切根相比，上部葉煙堿下降1. 9個百分點降幅31. 33%，中部葉煙堿下降2. 13 個百分點，降幅51. 4%。如何避免采用不同批次培養(yǎng)料培育獲得的老熟黑水虻幼蟲效果的不 確定性是本領域亟待解決的技術難題。而采用穩(wěn)定可行的技術方案培育出更多品種的耐煙 堿昆蟲品系并有效地連續(xù)馴化使其穩(wěn)定，是本領域同時需要解決的重要技術問題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明要解決的技術問題是為了克服現(xiàn)有技術中缺乏耐煙堿黑水虻種的缺陷，提 供一種耐煙堿黑水虻品系的培育方法，本發(fā)明方法不受不適用煙葉各種因素影響，可獲得 穩(wěn)定的培育效果。
[0008] 本發(fā)明的目的通過以下技術方案予以實現(xiàn)： 黑水虻是不同于家蠅的一種昆蟲，其是一種重要的經(jīng)濟昆蟲和環(huán)保昆蟲，可利用黑水 虻處理各種腐敗有機廢棄物，如啤酒渣、豆渣、雞糞、豬糞和餐廚垃圾等。現(xiàn)有黑水虻種對無 毒的有機廢棄物均有較好的生物處理能力，但對不適用鮮煙葉的處理效果不佳。主要原因 是因為不適用鮮煙葉中含有一定量的煙堿等毒性物質，對黑水虻幼蟲（黑水虻老熟幼蟲）具 有一定的毒害和抑制生長的作用。為了利用黑水虻生物處理不適用鮮煙葉，首先需從野生 黑水虻種中篩選出耐煙堿的黑水虻品種，提高黑水虻對鮮煙葉的耐受能力。
[0009] 本發(fā)明提供一種耐煙堿黑水虻品系的培育方法，包括如下步驟： 51. 室內(nèi)條件下將耐受質量百分比濃度為3%。的煙堿水溶液配方料的黑水虻品種的卵 接種在第一配方料中，將蟲卵培育至幼蟲老熟、化蛹； 52. 黑水虻蛹羽化后利用第二配方料喂養(yǎng)其成蟲，待其產(chǎn)卵后，進入下一世代的馴化培 育； 53. 按上述步驟重復操作，經(jīng)過20?30世代的連續(xù)馴化培育，獲得穩(wěn)定的耐煙堿黑水 蛇品系； 其中，所述第一配方料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩皮70?90%、進口魚粉 10?30%，用質量百分比濃度3%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70% ; 第二配方料為煙堿質量百分比濃度2%。?3%。的水溶液。
[0010] 優(yōu)選地，所述第一配方料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩皮80%、進口魚粉 20%，用質量百分比濃度3%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%。
[0011] 優(yōu)選地，第二配方料為煙堿質量百分比濃度2. 5%。的水溶液。
[0012] 所述煙堿可以采用純度彡99. 5%的市購產(chǎn)品。
[0013] 所述第一配方料的配制方法為將第一配方料的各組分混勻后，加入特定質量百分 比濃度的煙堿水溶液將配方料的濕度調至70%。
[0014] 所述每1 kg第一配方料之中接入黑水蛇卵0. 5?1. 0 g。優(yōu)選所述每1 kg第一 配方料中接入黑水虻卵〇. 8 g。
[0015] 所述耐受質量百分比濃度為3%。的煙堿水溶液配方料的耐煙堿黑水虻品種是指首 先從野生黑水虻品種中篩選出耐煙堿黑水虻品種，然后再將篩選出來的耐煙堿黑水虻品種 進行強化培養(yǎng)，使其耐受質量百分比濃度為3%。的煙堿水溶液配方料。
[0016] 所述從野生黑水虻品種中篩選出耐煙堿黑水虻品種的具體方法為： 501. 配置誘集培養(yǎng)料，將誘集培養(yǎng)料裝入開口容器中； 所述誘集培養(yǎng)料含有如下重量百分數(shù)的各組分：麩皮70?90%、進口魚粉10?30%，用 質量百分比濃度1%。?2%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70% ; 502. 天氣晴好時，上午8:00?9:00將裝有誘集培養(yǎng)料的容器分別放于生活垃圾堆、雞 場和豬場來誘集野生蟲卵，下午17:00?18:00收回放于各處的容器； 503. 將回收的各容器放在室內(nèi)培養(yǎng)，等誘集到的野生蟲卵培育至幼蟲老熟時，利用黑 水虻老熟幼蟲的離食期行為將黑水虻幼蟲與配方料分離； 504. 通過黑水虻幼蟲的形態(tài)學鑒定，挑出黑水虻老熟幼蟲； 505. 篩選出20?25天老熟、每條黑水虻幼蟲重0. 10?0. 16 g、體態(tài)豐腴、顏色烏黑 的黑水虻老熟幼蟲，在室溫條件下，讓黑水虻老熟幼蟲自然化蛹、羽化后即可獲得耐煙堿的 黑水虻種。
[0017] 所述將篩選出來的耐煙堿黑水虻品種進行強化培養(yǎng)，使其耐受質量百分比濃度為 3%。的煙堿水溶液配方料的具體方法為： 511. 初始階段：將耐煙堿黑水虻品種的卵接種在初始培養(yǎng)料中，所述初始培養(yǎng)料由如 下重量百分數(shù)的各組分組成：麩皮70?90%、進口魚粉10?30%，用質量百分比濃度1%〇的 煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70% ;在室內(nèi)條件下，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化 蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲； 512. 第1次強化階段：待S11的成蟲產(chǎn)卵后，將其產(chǎn)生的卵采用第1次強化培養(yǎng)料進 行培育培養(yǎng)；所述第1次強化培養(yǎng)料含有如下重量百分數(shù)的各組分：麩皮70?90%、進口魚 粉10?30%，用質量百分比濃度（1+S) %。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%，S的 取值選自0. 1?0. 5 ;在室內(nèi)條件下，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成 蟲； 513. 第N+1次強化階段：對第N次強化階段所得的成蟲產(chǎn)的卵再次進行強化培養(yǎng)，并 且第N+1次強化階段所用的培養(yǎng)料所含組分符合如下比例：煙堿水溶液的質量百分比濃度 =(第N次培育培養(yǎng)料中煙堿的含量+S) %。，其余組分含量不變，N為大于等于1的自然數(shù)， 重復強化，直至最后一次培育階段所述培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質量百分比濃度達3%。為止。
[0018] 所述喂養(yǎng)其成蟲均是利用清水喂養(yǎng)。優(yōu)選地，所述清水可選擇純凈水、自來水、井 水或無毒的河水等；水喂養(yǎng)的方式是利用海綿吸飽水，供成蟲吮吸。
[0019] 優(yōu)選地，所述培育黑水虻的室內(nèi)條件為溫度25?30°C，濕度30?70%。
[0020] 本發(fā)明的有益效果是： 本發(fā)明創(chuàng)造性地直接采用適宜濃度的煙堿水溶液與麩皮和進口魚粉科學配伍，獲得的 第一配方料不僅成功掩蓋煙堿的難聞和苦味，營養(yǎng)成分適當，保證黑水虻幼蟲生長順利，而 且因為第一配方料和第二配方料的煙堿含量的適當性和確定性，以及第一配方料和第二配 方料營養(yǎng)物質和煙堿含量前后安排的合理性，，確保在同樣的培育環(huán)境中，不同批次的同樣 重量組成的配方料獲得的黑水虻老熟幼蟲率基本相同，獲得穩(wěn)定的培育效果。
[0021] 經(jīng)過本發(fā)明培育獲得的耐煙堿黑水虻品系由于經(jīng)過了 20?30代的長期馴化培 育，不僅適應了人工培養(yǎng)條件，而且形成了較穩(wěn)定的遺傳性狀，其后代耐煙堿能力的穩(wěn)定性 很好，而不經(jīng)過本發(fā)明培育獲得的耐煙堿黑水虻品系（只經(jīng)過篩選和強化培養(yǎng)的黑水虻）后 代對煙堿的耐受性易發(fā)生退化，穩(wěn)定性不好。

【具體實施方式】
[0022] 下面結合具體實施例進一步詳細說明本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明采用的試劑、 設備為本【技術領域】常規(guī)試劑和設備。
[0023] 煙堿購于常規(guī)化學試劑店，純度為> 99. 5%。
[0024] 實施例1從野生黑水虻品種中篩選出耐煙堿黑水虻品種 S01.天氣晴好時，配制誘集培養(yǎng)料，所述誘集培養(yǎng)料由如下重量百分數(shù)的各組分組 成：麩皮90%、進口魚粉10%，用質量百分比濃度1%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為 70%。
[0025] S02.將上述調制好的培養(yǎng)料，每1 kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高 =45cm*30cm*12cm)。于當日上午8:00將裝有培養(yǎng)料的塑料盆放于一生活垃圾堆旁，下午 17:00收回各處塑料盆，帶回室內(nèi)培養(yǎng)。
[0026] S03.在室內(nèi)條件下(溫度25°C，濕度30%)，將誘集到的野生蟲卵培育至幼蟲老熟， 利用黑水虻老熟幼蟲的離食期行為將黑水虻幼蟲與配方料分離（即黑水虻老熟幼蟲老熟時 會自行爬離培養(yǎng)料，尋找干燥的地方化蛹)。
[0027] S04.在解剖鏡下通過幼蟲的形態(tài)學鑒定，用鑷子單獨挑出黑水虻老熟幼蟲，排除 其他蠅種。
[0028] S05.篩選出20?25天老熟、每條黑水虻幼蟲重0. 10?0. 16 g、體態(tài)豐腴、顏色 烏黑的黑水虻老熟幼蟲，在室溫條件下，讓這些黑水虻老熟幼蟲自然化蛹、羽化后即可獲得 耐煙堿的黑水虻種。
[0029] 實施例2從野生黑水虻品種中篩選出耐煙堿黑水虻品種 S01.天氣晴好時，配制誘集培養(yǎng)料，所述誘集培養(yǎng)料由如下重量百分數(shù)的各組分組成： 麩皮80%、進口魚粉20%，用質量百分比濃度1. 5%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為 70%。
[0030] S02.將上述調制好的培養(yǎng)料，每1kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高 =45cm*30cm*12cm)。于當日上午8:00將裝有培養(yǎng)料的塑料盆放于一生活垃圾堆旁，下午 17:00收回各處塑料盆，帶回室內(nèi)培養(yǎng)。
[0031] S03.在室內(nèi)條件下(溫度25°C，濕度30%)，將誘集到的野生蟲卵培育至幼蟲老熟， 利用黑水虻老熟幼蟲的離食期行為將黑水虻幼蟲與配方料分離（即黑水虻老熟幼蟲老熟時 會自行爬離培養(yǎng)料，尋找干燥的地方化蛹)。
[0032] S04.在解剖鏡下通過幼蟲的形態(tài)學鑒定，用鑷子單獨挑出黑水虻老熟幼蟲，排除 其他蠅種。
[0033] S05.篩選出20?25天老熟、每條黑水虻幼蟲重0. 10?0. 16 g、體態(tài)豐腴、顏色 烏黑的黑水虻老熟幼蟲，在室溫條件下，讓這些黑水虻老熟幼蟲自然化蛹、羽化后即可獲得 耐煙堿的黑水虻種。
[0034] 實施例3從野生黑水虻品種中篩選出耐煙堿黑水虻品種 S01.天氣晴好時，配制誘集培養(yǎng)料，所述誘集培養(yǎng)料由如下重量百分數(shù)的各組分組 成：麩皮70%、進口魚粉30%，用質量百分比濃度2%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為 70%。
[0035] S02.將上述調制好的培養(yǎng)料，每1 kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高 =45cm*30cm*12cm)。于當日上午8:00將裝有培養(yǎng)料的塑料盆放于一生活垃圾堆旁，下午 17:00收回各處塑料盆，帶回室內(nèi)培養(yǎng)。
[0036] S03.在室內(nèi)條件下(溫度25°C，濕度30%)，將誘集到的野生蟲卵培育至幼蟲老熟， 利用黑水虻老熟幼蟲的離食期行為將黑水虻幼蟲與配方料分離（即黑水虻老熟幼蟲老熟時 會自行爬離培養(yǎng)料，尋找干燥的地方化蛹)。
[0037] S04.在解剖鏡下通過幼蟲的形態(tài)學鑒定，用鑷子單獨挑出黑水虻老熟幼蟲，排除 其他蠅種。
[0038] S5.篩選出20?25天老熟、每條黑水虻幼蟲重0. 10?0. 16 g、體態(tài)豐腴、顏色烏 黑的黑水虻老熟幼蟲，在室溫條件下，讓這些黑水虻老熟幼蟲自然化蛹、羽化后即可獲得耐 煙堿的黑水虻種。
[0039] 實施例4對篩選出來的耐煙堿黑水虻品種進行強化培養(yǎng)使其耐受質量百分比濃 度為3%。的煙堿水溶液的配方料 將實施例1?3任意實施例篩選出來的耐煙堿黑水虻品種進行培養(yǎng)，使其耐受質量百 分比濃度為3%。的煙堿水溶液的配方料，具體方法如下： 511. 初始階段： 配制初始培養(yǎng)料，所述初始培養(yǎng)料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩皮90%、進口魚 粉10%，用質量百分比濃度1%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%。將上述調制好 的培養(yǎng)料，每1 kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高=45cm*30cm*12cm)，每盆接入黑水蛇 卵0. 8 g ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化 蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲。
[0040] 強化階段： 512. 第1次強化階段：待初始階段的成蟲產(chǎn)卵后，將其產(chǎn)生的卵采用第1次強化培養(yǎng) 料進行強化培養(yǎng)；所述第1次強化培養(yǎng)料含有如下重量百分數(shù)的各組分：麩皮80%、進口魚 粉20%，用質量百分比濃度（1+S) %。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%，S選自 0. 1?0. 5 ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、 化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲。
[0041] S13.第N+1次強化階段：對第N次強化階段所得的成蟲產(chǎn)的卵再次進行強化培 養(yǎng)，并且第N+1次強化階段所用的培養(yǎng)料所含組分符合如下比例：煙堿水溶液的質量百分 比濃度=(第N次培育培養(yǎng)料中煙堿的含量+S) %。，其余組分含量不變，N為大于等于1的 自然數(shù)，重復強化，直至最后一次強化階段所述培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質量百分比濃度達 3%。為止。
[0042] 優(yōu)選地，本實施中，在整個培育階段中，煙堿水溶液的質量百分比濃度依次為 1. 1 %。、1· 2 %。、1· 3 %。、1· 4%。、1· 5 %。、1· 6 %。、1· 7 %。、1· 8 %。、1· 9 %。、2· 0 %。、2· 1 %。、2· 2 %〇、 2. 3%。、2· 4%。、2· 5%。、2· 6%。、2· 7%。、2· 8%。、2· 9%。、3· 0%。；也即黑水虻卵共經(jīng)歷 20 次強化培 養(yǎng)。此階段培養(yǎng)出的黑水虻種即對煙堿具有較高耐受能力。
[0043] 實施例5對篩選出來的耐煙堿黑水虻品種進行強化培養(yǎng)使其耐受質量百分比濃 度為3%。的煙堿水溶液的配方料 將實施例1?3任意實施例篩選出來的耐煙堿黑水虻品種進行培養(yǎng)，使其耐受質量百 分比濃度為3%。的煙堿水溶液的配方料，具體方法如下： 511. 初始階段： 配制初始培養(yǎng)料，所述初始培養(yǎng)料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩皮80%、進口魚 粉20%，用質量百分比濃度1%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%。將上述調制好 的培養(yǎng)料，每1 kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高=45cm*30cm*12cm)，每盆接入黑水蛇 卵0. 8 g ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化 蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲。
[0044] 強化階段： 512. 第1次強化階段：待初始階段的成蟲產(chǎn)卵后，將其產(chǎn)生的卵采用第1次強化培養(yǎng) 料進行強化培養(yǎng)；所述第1次強化培養(yǎng)料含有如下重量百分數(shù)的各組分：麩皮80%、進口魚 粉20%，用質量百分比濃度（1+S) %。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%，S選自 0. 1?0. 5 ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、 化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲； 513. 第N+1次強化階段：對第N次強化階段所得的成蟲產(chǎn)的卵再次進行強化培養(yǎng)，并 且第N+1次強化階段所用的培養(yǎng)料所含組分符合如下比例：煙堿水溶液的質量百分比濃度 =(第N次培育培養(yǎng)料中煙堿的含量+S) %。，其余組分含量不變，N為大于等于1的自然數(shù)， 重復強化，直至最后一次強化階段所述培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質量百分比濃度達3%。為止。
[0045] 優(yōu)選地，本實施中，在整個培育階段中，煙堿水溶液的質量百分比濃度依次為 1. 2%〇、1· 4%〇、1· 6%〇、1· 8%〇、2· 0%〇、2· 2%〇、2· 4%〇、2· 6%〇、2· 8%〇、3· 0%?;也即黑水虻卵共經(jīng) 歷10次強化培養(yǎng)。此階段培養(yǎng)出的黑水虻種即對煙堿具有較高耐受能力。
[0046] 實施例6對篩選出來的耐煙堿黑水虻品種進行強化培養(yǎng)使其耐受質量百分比濃 度為3%。的煙堿水溶液的配方料 將實施例1?3任意實施例篩選出來的耐煙堿黑水虻品種進行培養(yǎng)，使其耐受質量百 分比濃度為3%。的煙堿水溶液的配方料，具體方法如下： 511. 初始階段： 配制初始培養(yǎng)料，所述初始培養(yǎng)料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩皮70%、進口魚 粉30%，用質量百分比濃度1%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%。將上述調制好 的培養(yǎng)料，每1 kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高=45cm*30cm*12cm)，每盆接入黑水蛇 卵0. 8 g ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化 蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲。所述喂養(yǎng)其成蟲均是利用清水喂養(yǎng)。所述清水可選擇純凈水、自 來水、井水或無毒的河水等；水喂養(yǎng)的方式是利用海綿吸飽水，供成蟲吮吸。下同。
[0047] 強化階段： 512. 第1次強化階段：待初始階段的成蟲產(chǎn)卵后，將其產(chǎn)生的卵采用第1次強化培養(yǎng) 料進行強化培養(yǎng)；所述第1次強化培養(yǎng)料含有如下重量百分數(shù)的各組分：麩皮80%、進口魚 粉20%，用質量百分比濃度（1+S) %。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%，S選自 0. 1?0. 5 ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、 化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲； 513. 第N+1次強化階段：對第N次強化階段所得的成蟲產(chǎn)的卵再次進行強化培養(yǎng)，并 且第N+1次強化階段所用的培養(yǎng)料所含組分符合如下比例：煙堿水溶液的質量百分比濃度 =(第N次培育培養(yǎng)料中煙堿的含量+S) %。，其余組分含量不變，N為大于等于1的自然數(shù)， 重復強化，直至最后一次強化階段所述培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質量百分比濃度達3%。為止。
[0048] 優(yōu)選地，本實施中，在整個培育階段中，煙堿水溶液的質量百分比濃度依次為 1. 5%。、2. 0%。、2. 5%。、3. 0%。;也即黑水虻卵共經(jīng)歷4次強化培養(yǎng)。此階段培養(yǎng)出的黑水虻種 即對煙堿具有較高耐受能力。
[0049] 實施例7多個世代的連續(xù)馴化培育獲得穩(wěn)定的耐煙堿黑水虻品系 將實施例4?6任意實施例培育出來的耐受質量百分比濃度為3%。的煙堿水溶液配方 料的黑水虻品種再經(jīng)過多個世代的連續(xù)馴化培育，形成穩(wěn)定的耐煙堿黑水虻品系。具體方 法為： 51. 室內(nèi)條件下，將耐受質量百分比濃度為3%。的煙堿水溶液配方料的黑水虻品種的 卵接種在第一配方料中，將蟲卵培育至幼蟲老熟、化蛹； 52. 黑水虻蛹羽化后利用第二配方料喂養(yǎng)其成蟲，待其產(chǎn)卵后，進入下一世代的馴化培 育； 53. 按上述步驟重復操作，經(jīng)過30世代的連續(xù)馴化培育，獲得穩(wěn)定的耐煙堿黑水虻品 系； 第一配方料的配制：所述第一配方料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩皮90%、進口 魚粉10%，用質量百分比濃度3%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%。
[0050] 將上述調制好的配方料，每1 kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高 =45cm*30cm*12cm)，每盆接入黑水蛇卵0· 8 g ; 在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化蛹； 黑水虻蛹羽化后利用第二配方料喂養(yǎng)其成蟲，第二配方料為煙堿質量百分比濃度2%。 的水溶液，待其產(chǎn)卵后，進入下一世代的馴化培育； 按上述步驟重復操作，經(jīng)過30世代的連續(xù)馴化培育，獲得穩(wěn)定的耐煙堿黑水虻品系。
[0051] 實施例8 其他操作同實施例7,不同的是所述第一配方料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩 皮80%、進口魚粉20%，用質量百分比濃度3%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%。 所述第二配方料為煙堿質量百分比濃度2. 5%。的水溶液。經(jīng)過25世代的連續(xù)馴化培育，獲 得穩(wěn)定的耐煙堿黑水虻品系。
[0052] 實施例9 其他操作同實施例7,不同的是所述第一配方料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩 皮70%、進口魚粉30%，用質量百分比濃度3%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%。 所述第二配方料為煙堿質量百分比濃度3%。的水溶液。經(jīng)過20世代的連續(xù)馴化培育，獲得 穩(wěn)定的耐煙喊黑水蛇品系。
[0053] 對比例1 操作同實施例1，不同的是所述誘集培養(yǎng)料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩皮80% 和進口魚粉20%。實驗發(fā)現(xiàn)利用如上誘集培養(yǎng)料誘集到的卵都不是耐煙堿的品種。
[0054] 實施例10 將本發(fā)明實施例1至3篩選出來的黑水虻品種、實施例4至6經(jīng)過培養(yǎng)耐受3%。的煙堿 配方料的黑水虻品種、實施例7至9經(jīng)過多代連續(xù)馴化培養(yǎng)的黑水虻品種、各對比例處理后 的黑水虻品種進行耐煙堿能力測試，測試過程為： 分別取所述實施例培養(yǎng)處理后的黑水虻成蟲所產(chǎn)的卵〇. 5g，分別接入lkg重的含較高 質量百分比濃度煙堿水溶液的配方料(麩皮80%、進口魚粉20%，用質量百分比濃度3. 0%〇的 煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%)中，測試結果見表1所示： 表1

【權利要求】
1. 一種耐煙堿黑水虻品系的培育方法，其特征在于，包括如下步驟：
51. 室內(nèi)條件下，將耐受質量百分比濃度為3%。的煙堿水溶液配方料的黑水虻品種的 卵接種在第一配方料中，將蟲卵培育至幼蟲老熟、化蛹；
52. 黑水虻蛹羽化后利用第二配方料喂養(yǎng)其成蟲，待其產(chǎn)卵后，進入下一世代的馴化培 育；
53. 按上述步驟重復操作，經(jīng)過20?30世代的連續(xù)馴化培育，獲得穩(wěn)定的耐煙堿黑水 蛇品系； 其中，所述第一配方料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩皮70?90%、進口魚粉 10?30%，用質量百分比濃度3%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70% ; 第二配方料為煙堿質量百分比濃度2%。?3%。的水溶液。
2. 根據(jù)權利要求1所述培育方法，其特征在于，S1中所述室內(nèi)條件為溫度25?30°C， 濕度30?70%。
3. 根據(jù)權利要求1所述培育方法，其特征在于，所述第一配方料由如下重量百分數(shù)的 各組分組成：麩皮80%、進口魚粉20%，用質量百分比濃度3%。的煙堿水溶液將上述配方料調 至濕度為70%。
4. 根據(jù)權利要求1所述培育方法，其特征在于，所述第二配方料為煙堿質量百分比濃 度2. 5%。的水溶液。
5. 根據(jù)權利要求1所述培育方法，其特征在于，所述第一配方料的配制方法為將第 一配方料的各組分混勻后，用質量百分比濃度3%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為 70%。
6. 根據(jù)權利要求1所述培育方法，其特征在于，所述每1 kg第一配方料之中接入黑水 蛇卵0· 5?1. 0g。
7. 根據(jù)權利要求1所述培育方法，其特征在于，所述耐受質量百分比濃度為3%。的煙堿 水溶液配方料的耐煙堿黑水虻品種的獲得方法為：首先從野生黑水虻品種中篩選出耐煙堿 黑水虻品種，然后再將篩選出來的耐煙堿黑水虻品種進行強化培養(yǎng)，使其耐受質量百分比 濃度為3%。的煙堿水溶液配方料。
8. 根據(jù)權利要求7所述培育方法，其特征在于，所述耐煙堿黑水虻品種的篩選的方法 為：
51. 配置誘集培養(yǎng)料，將誘集培養(yǎng)料裝入開口容器中； 所述誘集培養(yǎng)料含有如下重量百分數(shù)的各組分：麩皮70?90%、進口魚粉10?30%，用 質量百分比濃度1%。?2%。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70% ;
52. 天氣晴好時，上午將裝有誘集培養(yǎng)料的容器分別放于生活垃圾堆、雞場和豬場來誘 集野生黑水虻蟲卵，下午收回放于各處的容器；
53. 將回收的各容器放在室內(nèi)培養(yǎng)，等誘集到的野生蟲卵培育至幼蟲老熟時，利用黑水 虻老熟幼蟲的離食期行為將黑水虻幼蟲與配方料分離；
54. 通過黑水虻幼蟲的形態(tài)學鑒定，挑出黑水虻老熟幼蟲；
55. 篩選出20?25天老熟、每條黑水虻幼蟲重0. 10?0. 16g、體態(tài)豐腴、顏色烏黑的 黑水虻老熟幼蟲，在室溫條件下，讓黑水虻老熟幼蟲自然化蛹、羽化后即可獲得耐煙堿的黑 水虻種。
9.根據(jù)權利要求7所述培育方法，其特征在于，所述耐煙堿黑水虻品種的強化培養(yǎng)的 方法為： 初始階段：將耐煙堿黑水虻品種的卵接種在初始培養(yǎng)料中，所述初始培養(yǎng)料由如下重 量百分數(shù)的各組分組成：麩皮70?90%、進口魚粉10?30%，用質量百分比濃度1%。的煙堿 水溶液將上述配方料調至濕度為70%;在室內(nèi)條件下，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化蛹、 羽化后，喂養(yǎng)成蟲； 第1次強化階段：待初始階段的成蟲產(chǎn)卵后，將其產(chǎn)生的卵采用第1次強化培養(yǎng)料進行 強化培養(yǎng)；所述第1次強化培養(yǎng)料由如下重量百分數(shù)的各組分組成：麩皮70?90%、進口魚 粉10?30%，用質量百分比濃度（1+S) %。的煙堿水溶液將上述配方料調至濕度為70%，S選 自0. 1?0. 5 ;在室內(nèi)條件下，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化蛹、羽化后，喂養(yǎng)成蟲； 第N+1次強化階段：對第N次強化階段所得的成蟲產(chǎn)的卵再次進行強化培養(yǎng)，并且第 N+1次強化階段所用的培養(yǎng)料所含組分符合如下比例：煙堿水溶液的質量百分比濃度=(第 N次強化培養(yǎng)料中煙堿的含量+S) %。，其余組分含量不變，N為大于等于1的自然數(shù)，重復 強化，直至最后一次強化階段所述培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質量百分比濃度達3%。為止。
【文檔編號】A01K67/033GK104186432SQ201410421012
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年8月25日 優(yōu)先權日:2014年8月25日
【發(fā)明者】胡新軍, 陳澤鵬 申請人:中山大學, 中國煙草總公司廣東省公司