一種豹藥藤的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種豹藥藤的快速繁殖方法，包括外植體的消毒、腋芽的誘導(dǎo)、叢生芽的增殖、生根誘導(dǎo)和煉苗移栽。本發(fā)明的豹藥藤組培方法操作簡便易行，成活率高，生長速度快，可以短期內(nèi)獲得大量的豹藥藤幼苗，有助于豹藥藤資源的大規(guī)模開發(fā)。
【專利說明】一種豹藥藤的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及組培條件下豹藥藤的培養(yǎng)，屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]勢]M藤，Cynanchum夾竹桃科,攀援灌木,為中國的特有植物。分布在中國大陸的云南、四川等地，生長于海拔2000米至3500米的地區(qū)，多生在溝谷、路邊的灌木叢中、山坡和林中向陽處。產(chǎn)中甸、瀘水等地。植物的用途及功能:根有毒，是一種藥用植物，具有抗驚、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用。目前尚未由人工引種栽培，目前主要采用自然繁殖，野外采收。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的豹藥藤組培方法操作簡便易行，成活率高，生長速度快，可以短期內(nèi)獲得大量的豹藥藤幼苗，有助于豹藥藤資源的大規(guī)模開發(fā)。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案:
取豹藥藤帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗25min，次氯酸鈉處理15min，無菌水沖洗5-7遍，滅菌處理過的豹藥藤帶芽莖段接入改良MS+NAA0.lmg/L+6-BAl.0mg/L+2g/LAC培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照20001x，溫度25°C，生長出來的豹藥藤腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良MS+NAA0.3mg/L+6-BA2.0mg/L+50mg/L檸檬酸，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照30001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽繼代5次放入MS培養(yǎng)基中生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照40001x，將生根后長約5cm的試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，甲基托布津浸根15min,栽植于向陽處,沙壤土 (栽種前使用生石灰消毒處理)，土壤濕度以手握成團(tuán)，放開即散為好，培養(yǎng)20天后，統(tǒng)計(jì)成活率。
[0005]采用本發(fā)明制備的豹藥藤生長速度快，操作簡單，能耗小，成活率94%。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
取豹藥藤帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗25min，次氯酸鈉處理15min，無菌水沖洗5-7遍，滅菌處理過的豹藥藤帶芽莖段接入改良MS+NAA0.lmg/L+6-BA0.5mg/L+2g/LAC培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照20001x，溫度25°C，生長出來的豹藥藤腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良MS+NAA0.2mg/L+6-BAl.5mg/L+50mg/L檸檬酸，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照30001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽繼代5次放入MS培養(yǎng)基中生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照40001x，將生根后長約5cm的試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，甲基托布津浸根15min,栽植于向陽處,沙壤土 (栽種前使用生石灰消毒處理)，土壤濕度以手握成團(tuán)，放開即散為好，培養(yǎng)20天后，成活率90%。
[0008]實(shí)施例2
取豹藥藤帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗25min，次氯酸鈉處理15min，無菌水沖洗5-7遍，滅菌處理過的豹藥藤帶芽莖段接入改良MS+NAA0.lmg/L+6-BAl.0mg/L+2g/LAC培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照20001x，溫度25°C，生長出來的豹藥藤腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良MS+NAA0.5mg/L+6-BA2.0mg/L+50mg/L檸檬酸，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照30001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽繼代5次放入MS培養(yǎng)基中生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照40001x，將生根后長約5cm的試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，甲基托布津浸根15min,栽植于向陽處,沙壤土 (栽種前使用生石灰消毒處理)，土壤濕度以手握成團(tuán)，放開即散為好，培養(yǎng)20天后，成活率91%。
[0009]實(shí)施例3
取豹藥藤帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗25min，次氯酸鈉處理15min，無菌水沖洗5-7遍，滅菌處理過的豹藥藤帶芽莖段接入改良MS+NAA0.lmg/L+6-BAl.0mg/L+2g/LAC培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照20001x，溫度25°C，生長出來的豹藥藤腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良MS+NAA0.2mg/L+6-BAl.5mg/L+50mg/L檸檬酸，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照30001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽繼代5次放入MS培養(yǎng)基中生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照40001x，將生根后長約5cm的試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，甲基托布津浸根15min,栽植于向陽處,沙壤土 (栽種前使用生石灰消毒處理)，土壤濕度以手握成團(tuán)，放開即散為好，培養(yǎng)20天后，成活率92%。
[0010]實(shí)施例4
取豹藥藤帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗25min，次氯酸鈉處理15min，無菌水沖洗5-7遍，滅菌處理過的豹藥藤帶芽莖段接入改良MS+NAA0.lmg/L+6-BAl.0mg/L+2g/LAC培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照20001x，溫度25°C，生長出來的豹藥藤腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良MS+NAA0.5mg/L+6-BAl.5mg/L+50mg/L檸檬酸，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照30001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽繼代5次放入MS培養(yǎng)基中生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照40001x，將生根后長約5cm的試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，甲基托布津浸根15min,栽植于向陽處,沙壤土 (栽種前使用生石灰消毒處理)，土壤濕度以手握成團(tuán)，放開即散為好，培養(yǎng)20天后，成活率93%。
【權(quán)利要求】
1.一種豹藥藤的快速繁殖方法，包括腋芽的消毒、叢生芽的誘導(dǎo)、叢生芽的增殖、生根培養(yǎng)，其主要步驟如下: (1)取豹藥藤帶腋芽的莖段，對其進(jìn)行常規(guī)消毒處理； (2)將步驟(I)滅菌處理過的豹藥藤帶芽莖段接入改良MS+NAA0.1mg/L+6-BA0.5-1.0mg/L+2g/LAC 培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6.5g/L，PH5.8，光照20001x，溫度 25 0C ； (3)取步驟(2)生長出來的豹藥藤腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良MS+NAA0.2-0.5mg/L+6-BA1.5-2.0mg/L+50mg/L 檸檬酸，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，PH5.8，光照 30001x ； (4)取步驟(3)增殖培養(yǎng)出來的叢生芽繼代5次放入MS培養(yǎng)基中生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂 6.5g/L，PH5.8，光照 40001x ； (5)取步驟(4)生根后的豹藥藤試管苗移栽到大田進(jìn)行煉苗培養(yǎng)。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種豹藥藤的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述豹藥藤帶芽莖段的滅菌處理為:取豹藥藤帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗25min，次氯酸鈉處理15min,無菌水沖洗5_7遍。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種豹藥藤的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(2)腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)中附加了 2g/LAC，AC可以控制褐化現(xiàn)象。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種豹藥藤的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(3)中附加了50mg/L檸檬酸，具有抗氧化作用，促進(jìn)芽的分化。
5.按照權(quán)利要求1所述的一種豹藥藤的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(4)中根的誘導(dǎo)沒有添加激素，繼代多次可以促進(jìn)生根。
6.按照權(quán)利要求1所述的一種豹藥藤的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(5)中豹藥藤的煉苗培養(yǎng)方法為將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，甲基托布津浸根15min，栽植于向陽處，沙壤土(栽種前使用生石灰消毒處理)，土壤濕度以手握成團(tuán)，放開即散為好，培養(yǎng)20天后，統(tǒng)計(jì)成活率。
【文檔編號】A01H4/00GK104170745SQ201410462938
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司