一種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料及其制備方法，包括活性腐植酸20-50％、有機物料0-20％、特效復(fù)合功能菌劑0.2-3％、增效劑0.2-1.8％、無機氮磷鉀30-60％、微量元素0.2-3％、助劑0.1-0.5％；本發(fā)明集合了有機、無機營養(yǎng)和微生物復(fù)配造粒技術(shù)，產(chǎn)品具有含水量低，硬度高，可機播等特點。產(chǎn)品具有提升土壤肥力，改善土壤團粒結(jié)構(gòu)，固定空氣中的氮、分解土壤中被固定的磷與鉀，活化植物根際土壤微生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)作物生長發(fā)育，根系發(fā)達(dá)，提高肥料利用率，減少化肥用量，降低土傳病害危害，增強抗病、抗逆性能的一種可增產(chǎn)增收的高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料。
【專利說明】-種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種腐植酸服料，尤其涉及一種采用礦源腐植酸及其他有機物料制備 高活性腐植酸生物服料的方法及應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 我國是世界上最大的服料市場，近年來，我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)對服料的需求量不斷增加。 由于化學(xué)服料價格上漲和過量使用化服造成環(huán)境及農(nóng)產(chǎn)品污染等原因，人們開始重視微生 物服料的生產(chǎn)。微生物服料是一類通過微生物生命活動及其產(chǎn)物使農(nóng)作物得到特定服料效 應(yīng)的微生物活體制品，具有生產(chǎn)成本低、效果好、不污染環(huán)境，施后不僅增產(chǎn)，而且能提高農(nóng) 產(chǎn)品品質(zhì)和減少化服用量。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，逐步使用微生物服料代替化服，該是必然的發(fā)展趨 勢，它也關(guān)系到糧食安全和農(nóng)業(yè)、農(nóng)村經(jīng)濟可否持續(xù)發(fā)展。目前，微生物菌服根據(jù)組成成分 可分為微生物菌劑和復(fù)合微生物服料兩大類。目前復(fù)合微生物服料除含有效微生物外，還 有一些營養(yǎng)物質(zhì)。根據(jù)營養(yǎng)物質(zhì)分為；微生物和有機物復(fù)合，微生物和有機物質(zhì)及無機元 素復(fù)合【劉刊，耿±均，王波等。微生物服料研究進(jìn)展，安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011,39(22) =13445， 13448】。如利用固氮芽抱菌、磯細(xì)菌和鐘細(xì)菌制成菌粉作為生產(chǎn)微生物服料的母劑，再混合 城鄉(xiāng)有機廢棄物、畜禽糞便、生活污泥等作為基質(zhì)進(jìn)而加工制得復(fù)合微生物服料。由于技術(shù) 受限可能存在菌種配比不合理，在±壤中大多形成不了優(yōu)勢菌群，達(dá)不到固氮、解磯、解鐘 等綜合效果。由于作為原料的有機廢棄物、畜禽糞便、生活污泥等物質(zhì)來源不同，會導(dǎo)致養(yǎng) 分含量不一致，水分含量高，進(jìn)而使生產(chǎn)出來的復(fù)合微生物服料的質(zhì)量和效果不夠穩(wěn)定。
[0003] 按照作用機理復(fù)合微生物服料可分為營養(yǎng)型、抗病型，解農(nóng)藥型，多種作用同時兼 有型。目前市場上單一功能的復(fù)合微生物服料較多，而營養(yǎng)型加抗病型兼俱的復(fù)合微生物 服料較少。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種高活性腐植酸復(fù)合微生物服料及其制備方 法。產(chǎn)品顆粒含水量低，硬度好，有效活菌數(shù)高，可機播，大大提高提高了腐植酸生物服料的 產(chǎn)品性能及施用的便利性，同時多功能復(fù)合菌種也提供了高活性腐植酸生物服料在農(nóng)業(yè)生 產(chǎn)中的新用途。
[0005] 本發(fā)明的目的是通過W下技術(shù)方案實現(xiàn)：
[0006] 一種高活性腐植酸復(fù)合微生物服料及其制備方法，包括活性腐植酸20-50%，有機 物料0-20%、特效復(fù)合功能菌0. 2-3%、增效劑0. 2-1. 8%、無機氮磯鐘30-60%、微量元素 0. 2-3%、助劑0. 1-0. 5%。其制備方法為：
[0007] A ;活性腐植酸的提??；按專利號200610131953. 7中的方法制備活性腐植酸，備 用；
[0008] B ;噴漿造粒：將制備好的活性腐植酸20-50%、有機物料0-20%、無機氮磯鐘 30-60%、微量元素0. 2-3%-起加入攬拌槽中，加入2-5倍水混合攬拌至完全混合的料漿， 用粟將混合的料漿送入噴漿造粒干燥機內(nèi)進(jìn)行造粒，100-30(TC高溫干燥后即得腐植酸復(fù) 合微生物服料母粒，母粒含水量控制在12% W下；
[000引 C、菌種活化
[0010] a;培養(yǎng)基的制備：分別稱取氯化軸、牛肉膏、蛋白腺，其比例為；1-3 : 1-2 : 2-4 混合后加入蒸觸水或自來水溶解，用氨氧化軸或鹽酸的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的抑調(diào) 節(jié)至7. 0-8.0,然后加入瓊脂1-3倍，加熱溶化后再在115-125 °C、0. IlMPa壓力下滅菌 25-35min，冷卻后制成斜面固體培養(yǎng)基備用。
[0011] 在無菌條件下從特效復(fù)合功能菌原菌種斜面上挑取少許菌苔放在所述的斜面固 體培養(yǎng)基上進(jìn)行活化，在培養(yǎng)溫度25-35C下培養(yǎng)22-26小時，經(jīng)檢查無雜菌、菌體生長整 齊，再置25-35C溫箱內(nèi)培養(yǎng)24-28小時，肉眼觀察，菌苔豐滿，涂片、染色檢查無雜菌，芽抱 大小一致的，可放冰箱中存放備用（3-5C為宜）。
[001引 b ;擴大培養(yǎng)
[0013] 擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基的制備：分別稱取W重量百分?jǐn)?shù)表示的0. 3-0. 8%玉米 粉、0. 3-0. 8%大豆粉、0. 2-0. 5%葡萄糖、0. 2-0. 5%骨粉、0. 1-0. 4%花生油，再用氨氧化軸 或鹽酸的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至7. 0-8. 0。在溫度115-125°C、0. IlM化壓力下 滅菌25-35分鐘，冷卻得到用于擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基。
[0014] 將步驟a活化的菌體接入擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基中，在溫度25-35C下用搖床W 150-300r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行培養(yǎng)8-12小時。
[001引 C、發(fā)酵培養(yǎng)
[0016] 發(fā)酵培養(yǎng)基的制備；分別稱取W重量百分?jǐn)?shù)表示的1.5-2. 5%大豆粉、1.8-3% 玉米粉、0. 3-0. 8 %骨粉、0. 1-0. 4 %花生油、0. 2-0. 8 %氯化巧、0. 01-0. 08 %磯酸二氨鐘， 0. 01-0. 16 %磯酸氨二鐘，再用氨氧化軸或鹽酸的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至 7. 0-8. 0。在溫度12rC、0. IlM化壓力下滅菌30mim，冷卻得到用于發(fā)酵的發(fā)酵培養(yǎng)基。
[0017] 將上述發(fā)酵培養(yǎng)液裝到發(fā)酵罐中（發(fā)酵罐容積的50-75% )，接入1-10%經(jīng)步驟b 擴大培養(yǎng)的菌體，加入增效劑0. 2-1. 8%，在25-35C溫度下進(jìn)行發(fā)酵，并且進(jìn)行如下控制， 直至發(fā)酵結(jié)束；
[0018] (a)芽抱桿菌細(xì)胞生長延滯期；攬拌速度150-18化/min,罐壓0. 05MPa，接種后化 內(nèi)通氣量為1 : 0. 7-0.9(每分鐘進(jìn)出體積之比）；
[0019] (b)在對數(shù)生長期：攬拌速度180-22化/min,通氣量逐浙增大至1 : 1. 5。
[0020] (C)在發(fā)酵培養(yǎng)過程中，采用間歇流加補料的工藝，流加液為在發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ) 上添0. 1% -0. 5%硫酸饋（按重量百分比計），W提高發(fā)酵效率，實現(xiàn)高產(chǎn)。一般發(fā)酵培養(yǎng) 周期為24-48小時，在芽抱70-80%形成，個別芽抱開始脫落時，即可放罐。
[002。 D、活性菌粉的制備
[002引向經(jīng)C步驟得到的發(fā)酵液中加入粒度為0. 09mm的輕質(zhì)碳酸巧或白炭黑W吸附桿 菌芽抱，后在<65°C溫度下烘干。烘干時不斷翻動，使受熱均勻。當(dāng)含水率<5%時，即可 進(jìn)行粉碎，檢測合格后包裝、存儲備用。
[0023] E、將助劑0. 1-0. 5 %加入3-10倍水?dāng)埌柚镣耆芙獯茫?br> [0024] F、將母粒置入攬拌機中，攬拌同時在母粒表面噴入已制配好的助劑水溶液5分鐘 后將制配好的菌粉均勻噴在攬拌中的母粒表面后再攬拌20-30分鐘即可稱量包裝，制得成 品。
[00巧]包括活性腐植酸20-50 %，有機物料0-20 %、特效復(fù)合功能菌0. 2-3 %、增效劑 0.2-1. 8%、無機氮磯鐘30-60%、微量元素0.2-3%、助劑0. 1-0. 5%。
[0026] 所述的有機物料為氨基酸液、殼聚糖、可溶有機廢液的一種兩種或所述原料任意 種混合物。
[0027] 所述的無機氮磯鐘為尿素、硫酸饋、磯酸一饋、磯酸二饋、硫酸鐘、氯化鐘中的一種 或兩種或所述原料任意種混合物。
[0028] 所述的微量元素分為硫酸鎮(zhèn)、磯酸一巧、硫酸猛、硫酸鋒、硫酸銅、硫酸亞鐵、測砂 中的一種或兩種或所述原料任意種混合物。
[0029] 所述的特效復(fù)合功能菌為膠凍樣芽抱桿菌炬aciIlus muciIaginosus Krassilrdkov)、巨大芽胞桿菌炬aciIlus megaterium)、枯草芽抱桿菌炬aciIlus Subtillis))及酵母菌（microzyme)，其重量比 0.8-1. 2 : 1.2-1. 8 : 1-1.5 : 1.5-2. 5。
[0030] 所述的助劑為聚氧己帰駿酸醋、聚氧己帰焼基離、芳基賴酸鹽（或醋）、甲基纖維 素、十二焼基硫離、十二焼基苯賴酸軸、十二焼基硫酸軸、玉米油、大豆油、按油精中的一種 或兩種或所述原料任意種混合物。
[0031] 所述的增效劑為賴氨酸0. 2-3g/L、山梨糖醇100-500g/L、海藻糖eOO-lOOOg/ U硫酸鉆0. 023-0. 12g/L、硫酸鋒0. 1-0. 45g/L、酵母砸0. 1-0. 5g/L、甘露聚糖酶 100000-200000U/L;在發(fā)酵前按照0. 2-1.8% (v/w)的添加量，添加到慘混后的物料中；添 加前，需要先配制成水溶液，再添加到物料中。
[0032] 本發(fā)明提供的一種高活性腐植酸復(fù)合微生物服料及其制備方法，是一種高效腐植 酸復(fù)合微生物服料，特點是集有機服、無機服和生物服料于一身的H合一新型服料產(chǎn)品，產(chǎn) 品具有提高±壤有機質(zhì)含量，改善±壤團粒結(jié)構(gòu)，活化植物根際±壤微生態(tài)環(huán)境，提高±壤 保服保水能力；固定大氣中的氮素、分解±壤中被固定的難W利用的磯、鐘元素；提供速效 無機營養(yǎng)，提高服料利用率，可減少化服用量10-20 %，減少服料對±壤的污染，促進(jìn)作物生 長發(fā)育，增強抗逆性。本發(fā)明采用的復(fù)合生物發(fā)酵劑在自然環(huán)境中存活和繁殖能力較高，在 較為寬泛的繁殖介質(zhì)、溫度等條件下表現(xiàn)出優(yōu)良的繁殖力，而且經(jīng)復(fù)合生物發(fā)酵劑發(fā)酵后 的產(chǎn)品有益菌數(shù)量多，發(fā)酵時間短，存活時間長。

【具體實施方式】
[0033] 下面結(jié)合實施例，對本發(fā)明的【具體實施方式】作進(jìn)一步詳細(xì)描述。但本發(fā)明的實施 方案并不局限于該些實例。
[0034] 實施例1 :
[0035] 一種高活性腐植酸復(fù)合微生物服料包括活性腐植酸45%，有機物料15%、特效復(fù) 合功能菌1. 4%、增效劑1. 3%、無機氮磯鐘35%、微量元素2%、助劑0. 3%。其制備方法 為：
[0036] A ;活性腐植酸的提??；按專利號200610131953. 7中的方法制備活性腐植酸，備 用；
[0037] B ;噴漿造粒：將制備好的活性腐植酸45%、有機物料15%、無機氮磯鐘35%、微量 元素2%-起加入攬拌槽中，加入3倍水混合攬拌至完全混合的料漿，用粟將混合的料漿送 入噴漿造粒干燥機內(nèi)進(jìn)行造粒，15(TC高溫干燥后即得腐植酸復(fù)合微生物服料母粒，母粒含 水量控制在10% ;
[00測 C、菌種活化
[0039] a;培養(yǎng)基的制備：分別稱取氯化軸、牛肉膏、蛋白腺，其比例為；1 : 1 : 2混合后 加入蒸觸水或自來水溶解，用氨氧化軸的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至7. 5,然后加 入瓊脂2倍，加熱溶化后再在12(TC、0. IlMPa壓力下滅菌30min，冷卻后制成斜面固體培養(yǎng) 基備用。
[0040] 在無菌條件下從特效復(fù)合功能菌原菌種斜面上挑取少許菌苔放在所述的斜面固 體培養(yǎng)基上進(jìn)行活化，在培養(yǎng)溫度3(TC下培養(yǎng)24小時，經(jīng)檢查無雜菌、菌體生長整齊，再置 3(TC溫箱內(nèi)培養(yǎng)26小時，肉眼觀察，菌苔豐滿，涂片、染色檢查無雜菌，芽抱大小一致的，可 放冰箱中存放備用（4C為宜）。
[00川 b ;擴大培養(yǎng)
[0042] 擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基的制備：分別稱取W重量百分?jǐn)?shù)表示的0.5%玉米粉、 0. 5%大豆粉、0. 3%葡萄糖、0. 3%骨粉、0. 3%花生油，再用氨氧化軸或鹽酸的稀溶液將該 培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至7. 5。在溫度12(TC、0. IlMPa壓力下滅菌30分鐘，冷卻得到用于擴 大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基。
[0043] 將步驟a活化的菌體接入擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基中，在溫度3(TC下用搖床W 20化/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行培養(yǎng)10小時。
[0044] C、發(fā)酵培養(yǎng)
[0045] 發(fā)酵培養(yǎng)基的制備；分別稱取W重量百分?jǐn)?shù)表示的2%大豆粉、2%玉米粉、0. 5% 骨粉、0.3%花生油、0.5%氯化巧、0.05%磯酸二氨鐘，0. 1%磯酸氨二鐘，再用氨氧化軸或 鹽酸的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至7. 5。在溫度12rC、0. IlM化壓力下滅菌30mim， 冷卻得到用于發(fā)酵的發(fā)酵培養(yǎng)基。
[0046] 將上述發(fā)酵培養(yǎng)液裝到發(fā)酵罐中（發(fā)酵罐容積的65 % )，接入8 %經(jīng)步驟b擴大培 養(yǎng)的菌體，加入增效劑1. 3%，在3(TC溫度下進(jìn)行發(fā)酵，并且進(jìn)行如下控制，直至發(fā)酵結(jié)束；
[0047] (a)芽抱桿菌細(xì)胞生長延滯期；攬拌速度16化/min,罐壓0. 05MPa，接種后化內(nèi)通 氣量為1 : 0.8 (每分鐘進(jìn)出體積之比）；
[0048] (b)在對數(shù)生長期：攬拌速度20化/min,通氣量逐浙增大至1 : 1. 5。
[0049] (C)在發(fā)酵培養(yǎng)過程中，采用間歇流加補料的工藝，流加液為在發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ) 上添0.3%硫酸饋（按重量百分比計），W提高發(fā)酵效率，實現(xiàn)高產(chǎn)。一般發(fā)酵培養(yǎng)周期為 26小時，在芽抱75%形成，個別芽抱開始脫落時，即可放罐。
[0050] D、活性菌粉的制備
[0051] 向經(jīng)C步驟得到的發(fā)酵液中加入粒度為0. 09mm的輕質(zhì)碳酸巧或白炭黑W吸附桿 菌芽抱，后在55C溫度下烘干。烘干時不斷翻動，使受熱均勻。當(dāng)含水率3%時，即可進(jìn)行 粉碎，檢測合格后包裝、存儲備用。
[0052] E、將助劑0. 3 %加入5倍水?dāng)埌柚镣耆芙獯茫?br> [0053] F、將母粒置入攬拌機中，攬拌同時在母粒表面噴入已制配好的助劑水溶液5分鐘 后將制配好的菌粉均勻噴在攬拌中的母粒表面后再攬拌25分鐘即可稱量包裝，制得成品。
[0054] 所述的有機物料為氨基酸液、殼聚糖、可溶有機廢液混合物。
[0055] 所述的無機氮磯鐘為；尿素、硫酸饋、磯酸一饋、硫酸鐘、氯化鐘混合物。
[0056] 所述的微量元素分為硫酸鎮(zhèn)、磯酸一巧、硫酸猛、硫酸鋒、硫酸銅、硫酸亞鐵、測砂 的混合物。
[0057] 所述的特效復(fù)合功能菌為膠凍樣芽抱桿菌炬aciIlus muciIaginosus Krassilrdkov)、巨大芽胞桿菌炬aciIlus megaterium)、枯草芽抱桿菌炬aciIlus Subtillis))及酵母菌（microzyme),其重量比 1 : 1.5 : 1.2 : 2。
[005引所述的活化劑為；已酸二己氨基己醇醋、巧隙-3-己酸、巧隙下酸、6-予氨基腺嘿 嶺的混合物。
[0059] 所述的助劑為聚氧己帰駿酸醋、芳基賴酸鹽（或醋）、甲基纖維素、十二焼基硫離、 十二焼基硫酸軸、玉米油、大豆油、按油精的混合物。
[0060] 所述的增效劑為；賴氨酸0. 28g/L、山梨糖醇150g/L、海藻糖300g/L、硫酸鉆 0. 03g/L、硫酸鋒0. 3g/L、酵母砸0. Ig/L、甘露聚糖酶110000U/L ;混合均勻，加入水至完全 溶解；在發(fā)酵前按照1. 2% v/w的添加量，添加到慘混后的物料中；添加前，需要先配制成水 溶液，再添加到物料中。
[00川 實施例2
[0062] -種高活性腐植酸復(fù)合微生物服料包括活性腐植酸40%，有機物料13%、特效復(fù) 合功能菌1 %、增效劑0. 3%、無機氮磯鐘45%、微量元素0. 5%、助劑0. 2%。其制備方法 為：
[0063] A ;活性腐植酸的提??；按專利號200610131953. 7中的方法制備活性腐植酸，備 用；
[0064] B ;噴漿造粒：將制備好的活性腐植酸40%、有機物料13%、無機氮磯鐘45%、微量 元素0. 5%-起加入攬拌槽中，加入5倍水混合攬拌至完全混合的料漿，用粟將混合的料漿 送入噴漿造粒干燥機內(nèi)進(jìn)行造粒，20(TC高溫干燥后即得腐植酸復(fù)合微生物服料母粒，母粒 含水量控制在8% ;
[0065] C、菌種活化
[0066] a;培養(yǎng)基的制備：分別稱取氯化軸、牛肉膏、蛋白腺，其比例為；2 : 1.5 : 3混合 后加入蒸觸水或自來水溶解，用氨氧化軸稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至7,然后加入 瓊脂3倍，加熱溶化后再在115°C、0. 1 IMPa壓力下滅菌25min，冷卻后制成斜面固體培養(yǎng)基 備用；
[0067] 在無菌條件下從特效復(fù)合功能菌原菌種斜面上挑取少許菌苔放在所述的斜面固 體培養(yǎng)基上進(jìn)行活化，在培養(yǎng)溫度35C下培養(yǎng)26小時，經(jīng)檢查無雜菌、菌體生長整齊，再置 35C溫箱內(nèi)培養(yǎng)24小時，肉眼觀察，菌苔豐滿，涂片、染色檢查無雜菌，芽抱大小一致的，可 放冰箱中存放備用（3°C為宜）；
[006引 b ;擴大培養(yǎng)
[0069] 擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基的制備：分別稱取W重量百分?jǐn)?shù)表示的0.8%玉米粉、 0. 6%大豆粉、0. 4%葡萄糖、0. 4%骨粉、0. 2%花生油，再用氨氧化軸或鹽酸的稀溶液將該 培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至7 ;在溫度115°C、0. IlM化壓力下滅菌25分鐘，冷卻得到用于擴大 培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基；
[0070] 將步驟a活化的菌體接入擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基中，在溫度35C下用搖床W 180/ min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行培養(yǎng)9小時；
[0071] C、發(fā)酵培養(yǎng)
[0072] 發(fā)酵培養(yǎng)基的制備；分別稱取W重量百分?jǐn)?shù)表示的1.5%大豆粉、3%玉米粉、 0. 7%骨粉、0. 2%花生油、0. 7%氯化巧、0. 08%磯酸二氨鐘，0. 08%磯酸氨二鐘，再用氨氧 化軸或鹽酸的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至7 ;在溫度12rC、0. IlMPa壓力下滅菌 30mim，冷卻得到用于發(fā)酵的發(fā)酵培養(yǎng)基；
[0073] 將上述發(fā)酵培養(yǎng)液裝到發(fā)酵罐中（發(fā)酵罐容積的70% )，接入5%經(jīng)步驟b擴大培 養(yǎng)的菌體，加入增效劑0. 3%，在35C溫度下進(jìn)行發(fā)酵，并且進(jìn)行如下控制，直至發(fā)酵結(jié)束；
[0074] (a)芽抱桿菌細(xì)胞生長延滯期；攬拌速度17化/min,罐壓0. 05MPa，接種后化內(nèi)通 氣量為1 : 0.9 (每分鐘進(jìn)出體積之比）；
[00巧](b)在對數(shù)生長期：攬拌速度19化/min,通氣量逐浙增大至1 : 1. 5。
[0076] (C)在發(fā)酵培養(yǎng)過程中，采用間歇流加補料的工藝，流加液為在發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ) 上添0.4%硫酸饋（按重量百分比計），W提高發(fā)酵效率，實現(xiàn)高產(chǎn)。一般發(fā)酵培養(yǎng)周期為 24小時，在芽抱70%形成，個別芽抱開始脫落時，即可放罐。
[0077] D、活性菌粉的制備
[0078] 向經(jīng)C步驟得到的發(fā)酵液中加入粒度為0. 09mm的輕質(zhì)碳酸巧或白炭黑W吸附桿 菌芽抱，后在5(TC溫度下烘；烘干時不斷翻動，使受熱均勻；當(dāng)含水率4%時，即可進(jìn)行粉 碎，檢測合格后包裝、存儲備用；
[0079] E、將助劑0. 2 %加入3倍水?dāng)埌柚镣耆芙獯茫?br> [0080] F、將母粒置入攬拌機中，攬拌同時在母粒表面噴入已制配好的助劑水溶液5分鐘 后將制配好的菌粉均勻噴在攬拌中的母粒表面后再攬拌20分鐘即可稱量包裝，制得成品。
[0081] 所述的有機物料為氨基酸液、殼聚糖的混合物。
[0082] 所述的無機氮磯鐘為尿素、硫酸饋、磯酸一饋、氯化鐘的混合物。
[0083] 所述的微量元素分為硫酸鎮(zhèn)、磯酸一巧、硫酸猛、硫酸鋒、硫酸銅、硫酸亞鐵、測砂 中混合物。
[0084] 所述的特效復(fù)合功能菌為膠凍樣芽抱桿菌炬aciIlus muciIaginosus Krassilrdkov)、巨大芽胞桿菌炬aciIlus megaterium)、枯草芽抱桿菌炬aciIlus Subtillis))及酵母菌（microzyme),其重量比 0. 8 : 1.4 : 1 : 1.5。
[0085] 所述的助劑為聚氧己帰駿酸醋、聚氧己帰焼基離、芳基賴酸鹽（或醋）、甲基纖維 素、十二焼基硫離、十二焼基苯賴酸軸、十二焼基硫酸軸、玉米油、大豆油、按油精中的一種 或兩種或所述原料任意種混合物。所述的增效劑為：賴氨酸1. 5g/L、山梨糖醇320g/L、海藻 糖600g/L、硫酸鉆0. 08g/L、硫酸鋒0. 25g/L、酵母砸0. 3g/L、甘露聚糖酶160000U/L ;混合 均勻，加入水至完全溶解；在發(fā)酵前按照1. 0% v/w的添加量，添加到慘混后的物料中；添加 前，需要先配制成水溶液，再添加到物料中。
[0086] 實施例3 :
[0087] -種高活性腐植酸復(fù)合微生物服料包括活性腐植酸35%，有機物料22%、特效復(fù) 合功能菌1 %、增效劑1 %、無機氮磯鐘40%、微量元素0.5%、助劑0.5%。其制備方法為：
[0088] A ;活性腐植酸的提取；按專利號200610131953. 7中的方法制備活性腐植酸，備 用；
[0089] B ;噴漿造粒：將制備好的活性腐植酸35%、有機物料22%、無機氮磯鐘40%、微量 元素0. 7%-起加入攬拌槽中，加入5倍水混合攬拌至完全混合的料漿，用粟將混合的料漿 送入噴漿造粒干燥機內(nèi)進(jìn)行造粒，30(TC高溫干燥后即得腐植酸復(fù)合微生物服料母粒，母粒 含水量控制在8% ;
[0090] C、菌種活化
[00川 a;培養(yǎng)基的制備：分別稱取氯化軸、牛肉膏、蛋白腺，其比例為；3 : 2 : 2混合后 加入蒸觸水或自來水溶解，用鹽酸的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至8,然后加入瓊脂1 倍，加熱溶化后再在125°C、0. IlMPa壓力下滅菌30min，冷卻后制成斜面固體培養(yǎng)基備用；
[0092] 在無菌條件下從特效復(fù)合功能菌原菌種斜面上挑取少許菌苔放在所述的斜面固 體培養(yǎng)基上進(jìn)行活化，在培養(yǎng)溫度25C下培養(yǎng)22小時，經(jīng)檢查無雜菌、菌體生長整齊，再置 25C溫箱內(nèi)培養(yǎng)28小時，肉眼觀察，菌苔豐滿，涂片、染色檢查無雜菌，芽抱大小一致的，可 放冰箱中存放備用巧°C為宜）；
[0093] b ;擴大培養(yǎng)
[0094] 擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基的制備：分別稱取W重量百分?jǐn)?shù)表示的0. 4%玉米粉、 0. 7%大豆粉、0. 5%葡萄糖、0. 2%骨粉、0. 4%花生油，再用氨氧化軸或鹽酸的稀溶液將該 培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至8.0 ;在溫度125°C、0. IlMPa壓力下滅菌35分鐘，冷卻得到用于擴 大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基；
[0095] 將步驟a活化的菌體接入擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基中，在溫度35 C下用搖床W 28化/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行培養(yǎng)12小時；
[0096] C、發(fā)酵培養(yǎng)
[0097] 發(fā)酵培養(yǎng)基的制備；分別稱取W重量百分?jǐn)?shù)表示的2. 5%大豆粉、1. 8%玉米粉、 0. 3%骨粉、0. 4%花生油、0. 3%氯化巧、0. 03%磯酸二氨鐘，0. 16%磯酸氨二鐘，再用鹽酸 的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的抑調(diào)節(jié)至8 ;在溫度12rC、0. IlM化壓力下滅菌30mim，冷卻得 到用于發(fā)酵的發(fā)酵培養(yǎng)基；
[0098] 將上述發(fā)酵培養(yǎng)液裝到發(fā)酵罐中（發(fā)酵罐容積的50 % )，接入6 %經(jīng)步驟b擴大培 養(yǎng)的菌體，加入增效劑1 %，在25C溫度下進(jìn)行發(fā)酵，并且進(jìn)行如下控制，直至發(fā)酵結(jié)束；
[0099] (a)芽抱桿菌細(xì)胞生長延滯期；攬拌速度15化/min,罐壓0. 05MPa，接種后化內(nèi)通 氣量為1 : 0.7 (每分鐘進(jìn)出體積之比）；
[0100] (b)在對數(shù)生長期：攬拌速度18化/min,通氣量逐浙增大至1 : 1. 5。
[0101] (C)在發(fā)酵培養(yǎng)過程中，采用間歇流加補料的工藝，流加液為在發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ) 上添0.1%硫酸饋（按重量百分比計），W提高發(fā)酵效率，實現(xiàn)高產(chǎn)。一般發(fā)酵培養(yǎng)周期為 28小時，在芽抱80 %形成，個別芽抱開始脫落時，即可放罐。
[0102] D、活性菌粉的制備
[0103] 向經(jīng)C步驟得到的發(fā)酵液中加入粒度為0. 09mm的輕質(zhì)碳酸巧或白炭黑W吸附桿 菌芽抱，后在45C溫度下烘；烘干時不斷翻動，使受熱均勻；當(dāng)含水率5%時，即可進(jìn)行粉 碎，檢測合格后包裝、存儲備用；
[0104] E、將助劑0. 5%加入3-10倍水?dāng)埌柚镣耆芙獯茫?br> [0105] F、將母粒置入攬拌機中，攬拌同時在母粒表面噴入已制配好的助劑水溶液5分鐘 后將制配好的菌粉均勻噴在攬拌中的母粒表面后再攬拌30分鐘即可稱量包裝，制得成品。
[0106] 所述的有機物料為殼聚糖、可溶有機廢液的混合物。
[0107] 所述的無機氮磯鐘為尿素、硫酸饋、磯酸一饋、氯化鐘的混合物。
[0108] 所述的微量元素分為磯酸一巧、硫酸猛、硫酸鋒、硫酸亞鐵、測砂的混合物。
[0109] 所述的特效復(fù)合功能菌為膠凍樣芽抱桿菌炬aciIlus muciIaginosus Krassilrdkov)、巨大芽胞桿菌炬aciIlus megaterium)、枯草芽抱桿菌炬aciIlus Subtillis))及酵母菌（microzyme),其重量比 0.9 : 1.6 : 1.3 : 2.1。
[0110] 所述的助劑為聚氧己帰駿酸醋、芳基賴酸鹽（或醋）、甲基纖維素、二焼基苯賴酸 軸、玉米油的混合物。
[0111] 所述的增效劑為；賴氨酸3g/L、山梨糖醇500g/L、海藻糖lOOOg/L、硫酸鉆0. Ig/L、 硫酸鋒0. 45g/L、酵母砸0. 45g/L、甘露聚糖酶200000U/L ;混合均勻，加入水至完全溶解；在 發(fā)酵前按照0. 7% v/w的添加量，添加到慘混后的物料中；添加前，需要先配制成水溶液，再 添加到物料中。
[0112] 下面結(jié)合具體實施例做進(jìn)一步說明。
[011引 實施例1 ;
[0114] 試驗處理：①復(fù)合服40kg/畝（1. 49kg/小區(qū)），②高活性腐植酸復(fù)合微生物服料 4化g/畝（NPK與復(fù)合服等含量，1.49kg/小區(qū)），服料施在馬鈴墓播種溝內(nèi)側(cè)。小區(qū)面積 24. 75m2 (3. 3 X 7. 5m)，每個處理3個重復(fù)，隨機排列。2013年5月20日播種，覆膜種植，2013 年9月20日收獲。試驗地點在內(nèi)蒙古準(zhǔn)格爾集雨補灌試驗站試驗地。
[0115] 基礎(chǔ)±壤性質(zhì)；pH7. 8,有機質(zhì) 10. 2mg/kg，全氮 0. 095g/kg，有效磯 5. 78mg/kg，有 效鐘 98. 72mg/kg。
[0116] 對馬鈴墓產(chǎn)量及地上部生物量的影響；在試驗所用服料量的條件下，施用高活性 腐植酸復(fù)合微生物服的馬鈴墓產(chǎn)量比施用等含量N P K的復(fù)合服的產(chǎn)量提高了 18. 7%。相 應(yīng)地，地上部生物量分別提高了 10. 3%和41. 8% (表1)。
[0117] 表1高活性腐植酸復(fù)合微生物服料對馬鈴墓產(chǎn)量及地上部生物量的影響（鮮重， kg/ 畝）
[011 引

【權(quán)利要求】
1. 一種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料及其制備方法，其特征在于：制備方法為： A :活性腐植酸的提取：按專利號200610131953. 7中的方法制備活性腐植酸，備用； B :噴漿造粒：將制備好的活性腐植酸20-50%、有機物料0-20%、無機氮磷鉀30-60%、 微量元素〇. 2-3%-起加入攪拌槽中，加入2-5倍水混合攪拌至完全混合的料漿，用泵將混 合的料漿送入噴漿造粒干燥機內(nèi)進(jìn)行造粒，100-300°C高溫干燥后即得腐植酸復(fù)合微生物 肥料母粒，母粒含水量控制在12%以下； C、 菌種活化 a:培養(yǎng)基的制備：分別稱取氯化鈉、牛肉膏、蛋白胨，其比例為：1_3 : 1-2 : 2-4混 合后加入蒸餾水或自來水溶解，用氫氧化鈉或鹽酸的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的pH調(diào)節(jié)至 7. 0-8. 0,然后加入瓊脂1-3倍，加熱溶化后再在115-125°C、0· llMPa壓力下滅菌25-35min， 冷卻后制成斜面固體培養(yǎng)基備用； 在無菌條件下從特效復(fù)合功能菌原菌種斜面上挑取少許菌苔放在所述的斜面固體培 養(yǎng)基上進(jìn)行活化，在培養(yǎng)溫度25-35°C下培養(yǎng)22-26小時，經(jīng)檢查無雜菌、菌體生長整齊，再 置25-35°C溫箱內(nèi)培養(yǎng)24-28小時，肉眼觀察，菌苔豐滿，涂片、染色檢查無雜菌，芽孢大小 一致的，可放冰箱中存放備用（3-5°C為宜）； b :擴大培養(yǎng) 擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基的制備：分別稱取以重量百分?jǐn)?shù)表示的〇. 3-0. 8%玉米粉、 0. 3-0. 8%大豆粉、0. 2-0. 5%葡萄糖、0. 2-0. 5%骨粉、0. 1-0. 4%花生油，再用氫氧化鈉或 鹽酸的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的pH調(diào)節(jié)至7. 0-8.0 ;在溫度115-125°C、0. llMPa壓力下滅 菌25-35分鐘，冷卻得到用于擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基； 將步驟a活化的菌體接入擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基中，在溫度25-35 °C下用搖床以 150-300r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行培養(yǎng)8-12小時； c、發(fā)酵培養(yǎng) 發(fā)酵培養(yǎng)基的制備：分別稱取以重量百分?jǐn)?shù)表示的1.5-2. 5 %大豆粉、1.8-3 %玉 米粉、0. 3-0. 8 %骨粉、0. 1-0. 4 %花生油、0. 2-0. 8 %氯化鈣、0. 01-0. 08 %磷酸二氫鉀， 0. 01-0. 16%磷酸氫二鉀，再用氫氧化鈉或鹽酸的稀溶液將該培養(yǎng)基溶液的pH調(diào)節(jié)至 7. 0-8. 0 ;在溫度121 °C、0. llMPa壓力下滅菌30mim，冷卻得到用于發(fā)酵的發(fā)酵培養(yǎng)基； 將上述發(fā)酵培養(yǎng)液裝到發(fā)酵罐中（發(fā)酵罐容積的50-75% )，接入1-10%經(jīng)步驟b擴大 培養(yǎng)的菌體，加入增效劑〇. 2-1. 8%，在25-35°C溫度下進(jìn)行發(fā)酵，并且進(jìn)行如下控制，直至 發(fā)酵結(jié)束； (a) 芽孢桿菌細(xì)胞生長延滯期：攪拌速度150-180r/min，罐壓0. 05MPa，接種后4h內(nèi)通 氣量為1 : 0.7-0. 9 (每分鐘進(jìn)出體積之比）； (b) 在對數(shù)生長期：攪拌速度180-220r/min，通氣量逐浙增大至1 : 1. 5。 (c) 在發(fā)酵培養(yǎng)過程中，采用間歇流加補料的工藝，流加液為在發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添 0.1%-0.5%硫酸銨（按重量百分比計），以提高發(fā)酵效率，實現(xiàn)高產(chǎn)。一般發(fā)酵培養(yǎng)周期 為24-48小時，在芽孢70-80%形成，個別芽孢開始脫落時，即可放罐； D、 活性囷粉的制備 向經(jīng)C步驟得到的發(fā)酵液中加入粒度為0. 09_的輕質(zhì)碳酸鈣或白炭黑以吸附桿菌芽 孢，后在< 65°C溫度下烘；烘干時不斷翻動，使受熱均勻；當(dāng)含水率< 5%時，即可進(jìn)行粉 碎，檢測合格后包裝、存儲備用； E、 將助劑0. 1-0. 5%加入3-10倍水?dāng)嚢柚镣耆芙獯茫? F、 將母粒置入攪拌機中，攪拌同時在母粒表面噴入已制配好的助劑水溶液5分鐘后將 制配好的菌粉均勻噴在攪拌中的母粒表面后再攪拌20-30分鐘即可稱量包裝，制得成品。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料，其特征在于：包括活性 腐植酸20-50%，有機物料0-20%、特效復(fù)合功能菌0· 2-3%、增效劑0· 2-1. 8%、無機氮磷 鉀 30-60%、微量元素 0· 2-3%、助劑 0· 1-0. 5%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料，其特征在于：所述的有 機物料為氨基酸液、殼聚糖、可溶有機廢液的一種兩種或所述原料任意種混合物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料，其特征在于：所述的無機 氮磷鉀為尿素、硫酸銨、磷酸一銨、磷酸二銨、硫酸鉀、氯化鉀中的一種或兩種或所述原料任 意種混合物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料，其特征在于：所述的微量 元素分為硫酸鎂、磷酸一鈣、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、硫酸亞鐵、硼砂中的一種或兩種或所 述原料任意種混合物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料，其特征在于：所述 的特效復(fù)合功能菌為膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus Krassilnikov)、巨大 芽胞桿菌（Bacillus megaterium)、枯草芽抱桿菌（Bacillus Subtillis))及酵母菌 〇1^。1'〇271116)，其重量比0.8-1.2:1.2-1.8:1-1.5:1.5-2.5。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料，其特征在于：所述的助 劑為聚氧乙烯羧酸酯、聚氧乙烯烷基醚、芳基磺酸鹽（或酯）、甲基纖維素、十二烷基硫醚、 十二烷基苯磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉、玉米油、大豆油、桉油精中的一種或兩種或所述原料 任意種混合物。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種高活性腐植酸復(fù)合微生物肥料，其特征在于：所述的增效 劑為賴氨酸〇· 2-3g/L、山梨糖醇100-500g/L、海藻糖600-1000g/L、硫酸鈷0· 023-0. 12g/ L、硫酸鋅0. 1-0. 45g/L、酵母硒0. 1-0. 5g/L、甘露聚糖酶100000-200000U/L ;在發(fā)酵前按照 0.2-1.8% (v/w)的添加量，添加到摻混后的物料中；添加前，需要先配制成水溶液，再添加 到物料中。
【文檔編號】C05G3/04GK104262047SQ201410471790
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月17日
【發(fā)明者】高覓, 仝寶生, 章學(xué)梅, 任鵬, 袁紅利 申請人:內(nèi)蒙古永業(yè)生物技術(shù)有限責(zé)任公司