一種預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其特征在于，主要步驟包括：a、外植體的獲取和消毒，b、不定芽誘導(dǎo)和母本后期觀察；c、組織培養(yǎng)；d、組培苗生根、煉苗；本發(fā)明通過(guò)逐步篩選和培養(yǎng)，能夠有效預(yù)防具有拜拉絲病毒組培苗上市；本發(fā)明可以節(jié)約時(shí)間，為新品種快速上市贏得了時(shí)間，具有極高的推廣價(jià)值。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法
[0001]

【技術(shù)領(lǐng)域】 本發(fā)明涉及植物栽培及育苗【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方 法。

【背景技術(shù)】
[0002] 雜交蘭在我國(guó)是指大花蕙蘭與國(guó)蘭之間經(jīng)過(guò)雜交培育出的蘭花新品種。它既具有 大花蕙蘭的花大、色艷、花期長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)，又具有國(guó)蘭的幽香、典雅和韻味。既可滿足歐美消 費(fèi)者的消費(fèi)需求，又符合中國(guó)、日本、韓國(guó)等亞洲人們的審美情趣；更重要的是，雜交蘭克服 了組培快繁和新品種選育等核心技術(shù)難題，能進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，能夠快速上量，滿足市場(chǎng)需 求。因此雜交蘭自投入市場(chǎng)以來(lái)，受到歐、美及日本、韓國(guó)、中國(guó)等亞洲消費(fèi)者的普遍青睞， 達(dá)到量?jī)r(jià)齊升的態(tài)勢(shì)，是市場(chǎng)前景非常廣闊的一個(gè)新興年宵花品種。
[0003] 但是雜交蘭組培快繁中極有可能將具有拜拉絲病的植株作為母本，繁殖出具有拜 拉絲病毒的后代。拜拉絲病毒組培苗銷(xiāo)售給種植戶(hù)后，會(huì)造成種植戶(hù)的巨大損失，同時(shí)也給 組培公司造成聲譽(yù)和經(jīng)濟(jì)上的負(fù)面影響。得了拜拉絲的雜交蘭葉片上出現(xiàn)長(zhǎng)條形斑紋，"似 中藥杜仲折斷后用力拉長(zhǎng)的絲狀體。該病至今仍屬無(wú)法根治的病害，因而被稱(chēng)為蘭花的"艾 滋病"和"癌癥"。病毒病不僅至今無(wú)法根治，而且會(huì)遺傳和傳染。即使購(gòu)買(mǎi)時(shí)是健康苗，運(yùn)輸 中或銷(xiāo)售時(shí)與病毒苗混放，都有潛伏拉絲病毒的可能。同時(shí)，拜拉絲病株具有一定潛伏期， 拜拉絲病毒侵染后，雜交蘭葉片并不即時(shí)出現(xiàn)病癥，有時(shí)要隔一二代后顯現(xiàn)病癥，要在其新 芽展葉時(shí)或新芽伸長(zhǎng)期，征狀才顯露于新葉上。這就給識(shí)別拜拉絲病毒植株帶來(lái)難以解決 的困難。
[0004] 本課題組經(jīng)過(guò)兩年研究，總結(jié)出一套預(yù)防拜拉絲病毒的新品種開(kāi)發(fā)程序，能夠有 效預(yù)防具有拜拉絲病毒組培苗上市。同時(shí)，可以節(jié)約時(shí)間，為新品種快速上市贏得了時(shí)間。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明旨在為擴(kuò)大銷(xiāo)售時(shí)間提供一種催花的方法，使文心蘭提前開(kāi)花。
[0006] 本發(fā)明目的通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)予以實(shí)現(xiàn)： 一種預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其中主要步驟包括： a、 外植體的獲取和消毒，選出2-10株健康的雜交蘭母本，從每株雜交蘭母本上取1-3 個(gè)新芽，將雜交蘭新芽從基部切下，每株給予相應(yīng)編號(hào)，先將雜交蘭新芽最外層2-3層葉片 剝掉，用飽和洗衣粉溶液浸泡20-30min，流水沖洗10-30min，再在超凈工作臺(tái)上，將外層葉 片全部剝掉，露出莖尖和側(cè)芽，并用刀片將芽基部黑色部分切除，然后用1. 0%次氯酸鈉溶 液浸泡10_30min，無(wú)菌水沖洗5-6次，用滅菌濾紙吸干表面水分備用； b、 不定芽誘導(dǎo)和母本后期觀察；將上述外植體從中間縱切成0-4塊，較小新芽不 用縱切，每塊至少含有1個(gè)側(cè)芽或頂芽，將小塊插入不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中放置于培養(yǎng)室 內(nèi)暗培養(yǎng)2d，然后轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定芽，并做好相應(yīng)編號(hào)；不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為： MS+6-BA0. 5-3. Omg/L+2. 5% 白糖 +5-10% 土豆泥 +0? 7% 卡拉膠，pH5. 6-5. 8.培養(yǎng)室溫度為 20-25°C，光照時(shí)間為10-16h/d，光照強(qiáng)度為60-100iim〇l m-2s-l ;觀察母本后新長(zhǎng)出的第 二、三個(gè)芽上是否有拜拉絲病毒感染，將前期無(wú)拜拉絲后期表現(xiàn)出拜拉絲感染的母本選出， 銷(xiāo)毀，并將編號(hào)記錄下來(lái)；將利用感染拜拉絲病毒母本上的芽誘導(dǎo)出來(lái)的叢生芽全部選出、 銷(xiāo)毀； c、 繼代增殖；將剩余母本后代誘導(dǎo)出來(lái)的不定芽，轉(zhuǎn)到MS+6-BAl-3mg/L+2. 5%白糖+ 5-10% 土豆泥+0. 7%卡拉膠，pH5. 6-5. 8的培養(yǎng)基上繼代增殖，繼代間隔為20-30天； d、 組培苗生根、煉苗；將叢生芽繼代6-8代后，挑選高3-5cm并且粗壯的單芽，從基部切 下，轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上生根；生根培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 1-0. 5mg/L+IBA0. 5-lmg/L+香蕉 汁1%-5%+白糖2%+卡拉膠0. 7%+2g/l活性炭，pH5. 6-5. 8 ;培養(yǎng)條件不變；經(jīng)過(guò)30d，新根長(zhǎng) 出3條以上，根長(zhǎng)3cm以上時(shí)，將組培苗移到溫室大棚煉苗7-15d ;煉苗條件為前兩天拉雙 層遮陰網(wǎng)，兩天后單層遮陰網(wǎng)。
[0007] 所采用的雜交蘭母本為經(jīng)過(guò)半年適地種植，為比較粗壯、無(wú)病蟲(chóng)害并且觀察雜交 蘭新芽沒(méi)有拜拉絲病毒的植株，每株做好編號(hào)。
[0008] 所述適地種植為：按照該品種生長(zhǎng)習(xí)性，盡量滿足該品種栽培所需環(huán)境進(jìn)行溫室 大棚種植，每盆雜交蘭之間間隔40-70cm，防止彼此摩擦并保證空氣流通。
[0009] 每取一個(gè)外植體，將刀片蘸酒精并用火燒過(guò)后，再取另外一個(gè)外植體。
[0010] 本發(fā)明的有益效果：1、通過(guò)逐步篩選和培養(yǎng)，能夠有效預(yù)防具有拜拉絲病毒組培 苗上市；2、本發(fā)明可以節(jié)約時(shí)間，為新品種快速上市贏得了時(shí)間；3、每取一個(gè)外植體，將刀 片蘸酒精并用火燒過(guò)后，再取另外一個(gè)外植體，將刀片進(jìn)行消毒，保證了外植體之間不交叉 感染；4、外植體消毒采用飽和洗衣粉溶液浸泡后沖洗干凈再用次氯酸鈉浸泡，通過(guò)此處理 方法可以有效的將新芽所攜帶的病原菌消滅干凈；5、每盆雜交蘭之間間隔40-70cm，可以 有效防止彼此摩擦交叉感染并保證空氣流通；6、生根培養(yǎng)基上加有香蕉汁，可以有效促進(jìn) 組培苗的生根，提高了組培苗生根的數(shù)量；7、將組培苗移到溫室大棚煉苗7-15d ;煉苗條件 為前兩天拉雙層遮陰網(wǎng)，兩天后單層遮陰網(wǎng)，可以實(shí)現(xiàn)組培苗到大棚栽培的順利過(guò)渡。

【具體實(shí)施方式】
[0011] 下面結(jié)合具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。
[0012] 實(shí)施例1 一種預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其中主要步驟包括： a、 外植體的獲取和消毒，選2株健康的雜交蘭母本，從每株雜交蘭母本上取2個(gè)新芽， 將雜交蘭新芽從基部切下，每株編號(hào)為A、B，雜交蘭切下的新芽為外植體，編號(hào)為AOl、A02 ; B01、B02 (每取一個(gè)外植體，將刀片蘸酒精并用火燒過(guò)后，再取另外一個(gè)外植體)，分別將外 植體A01、A02、B01、B02的最外層2-3層葉片剝掉，用飽和洗衣粉溶液浸泡20-30min，流水 沖洗10-30min，再在超凈工作臺(tái)上，將外層葉片全部剝掉，露出莖尖和側(cè)芽，并用刀片將芽 基部黑色部分切除，然后用1. 0%次氯酸鈉溶液浸泡10_30min，無(wú)菌水沖洗5-6次，用滅菌濾 紙吸干表面水分備用； b、 不定芽誘導(dǎo)和母本后期觀察；將外植體A01、A02 ;B01、B02根據(jù)大小從中間縱切成 0-4塊，較小外植體不用縱切，每塊至少含有1個(gè)側(cè)芽或頂芽，將小塊分別插入不定芽誘導(dǎo) 培養(yǎng)基中放置于培養(yǎng)室內(nèi)暗培養(yǎng)2d，然后轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定芽，并做好編號(hào)AO 1C， A01D，A02C，B01C，B01D，B02C，B02D ;所采用的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+6-BA0. 5-3. Omg/ L+2. 5%白糖+5-10% 土豆泥+0. 7%卡拉膠，pH5. 6-5. 8.培養(yǎng)室溫度為20-25°C，光照時(shí)間為 10-1611/(1，光照強(qiáng)度為60-10011111〇1111-2 8-1;觀察母本4、8后新長(zhǎng)出的第二、三個(gè)芽上是否 有拜拉絲病毒感染，如發(fā)現(xiàn)B新長(zhǎng)出的芽上有拜拉絲病毒感染，將B母本選出，銷(xiāo)毀，并將利 用感染拜拉絲病毒母本上的芽誘導(dǎo)出來(lái)的叢生芽B01C，B01D，B02C，B02D ;全部選出、銷(xiāo)毀； c、 繼代增殖；將剩余母本后代誘導(dǎo)出來(lái)的不定芽A01C，A01D，A02C，轉(zhuǎn)到 MS+6-BAl-3mg/L+2. 5%白糖+ 5-10% 土豆泥+0. 7%卡拉膠，pH5. 6-5. 8的培養(yǎng)基上繼代增 殖，繼代增殖間隔為20天； d、 組培苗生根、煉苗；將叢生芽繼代6-8代后，挑選高3-5cm并且粗壯的單芽，從基部切 下，轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上生根；生根培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 1-0. 5mg/L+IBA0. 5-lmg/L+香蕉 汁1%-5%+白糖2%+卡拉膠0. 7%+2g/l活性炭，pH5. 6-5. 8 ;培養(yǎng)條件不變；經(jīng)過(guò)30d，新根長(zhǎng) 出3條以上，根長(zhǎng)3cm以上時(shí)，將組培苗移到溫室大棚煉苗7-15d ;煉苗條件為前兩天拉雙 層遮陰網(wǎng)，兩天后單層遮陰網(wǎng)。
[0013] 實(shí)施例2 一種預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其中主要步驟包括： a、 外植體的獲取和消毒，選4株健康的雜交蘭母本，從每株雜交蘭母本上取1個(gè)新芽， 將雜交蘭新芽從基部切下，每株編號(hào)為A、B、C、D，雜交蘭切下的新芽為外植體，編號(hào)為AOl、 B01、C01、DOl (每取一個(gè)外植體，將刀片蘸酒精并用火燒過(guò)后，再取另外一個(gè)外植體)，分別 將外植體AOl、BOl、COl、DOl的最外層2-3層葉片剝掉，用飽和洗衣粉溶液浸泡20-30min， 流水沖洗10_30min，再在超凈工作臺(tái)上，將外層葉片全部剝掉，露出莖尖和側(cè)芽，并用刀片 將芽基部黑色部分切除，然后用1. 〇%次氯酸鈉溶液浸泡10_30min，無(wú)菌水沖洗5-6次，用滅 菌濾紙吸干表面水分備用； b、 不定芽誘導(dǎo)和母本后期觀察；將外植體A01、B01、C01、DOl根據(jù)大小從中間縱切 成0-4塊，較小外植體不用縱切，每塊至少含有1個(gè)側(cè)芽或頂芽，將小塊分別插入不定 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中放置于培養(yǎng)室內(nèi)暗培養(yǎng)2d，然后轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定芽，并做好編 號(hào)A01C，A01D，B01C，B01D，C01C，C01D，D01C，DOlD ;所采用的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為： MS+6-BA0. 5-3. Omg/L+2. 5% 白糖 +5-10% 土豆泥 +0? 7% 卡拉膠，pH5. 6-5. 8.培養(yǎng)室溫度為 20-251：，光照時(shí)間為10-1611/(1，光照強(qiáng)度為 60-10011111〇1111-28-1;觀察母本4、8、(：、0后新 長(zhǎng)出的第二、三個(gè)芽上是否有拜拉絲病毒感染，如發(fā)現(xiàn)C新長(zhǎng)出的芽上有拜拉絲病毒感染， 將母本C選出，銷(xiāo)毀，并將利用感染拜拉絲病毒母本上的芽誘導(dǎo)出來(lái)的叢生芽C01C，COlD全 部選出、銷(xiāo)毀； c、 繼代增殖；將剩余母本后代誘導(dǎo)出來(lái)的不定芽A01C，A01D，B01C，B01D，D01C，DOlD 轉(zhuǎn)到MS+6-BAl-3mg/L+2. 5%白糖+ 5-10% 土豆泥+0. 7%卡拉膠，pH5. 6-5. 8的培養(yǎng)基上繼 代增殖，繼代增殖間隔為30天； d、 組培苗生根、煉苗；將叢生芽繼代6-8代后，挑選高3-5cm并且粗壯的單芽，從基部切 下，轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上生根；生根培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 1-0. 5mg/L+IBA0. 5-lmg/L+香蕉 汁1%-5%+白糖2%+卡拉膠0. 7%+2g/l活性炭，pH5. 6-5. 8 ;培養(yǎng)條件不變；經(jīng)過(guò)30d，新根長(zhǎng) 出3條以上，根長(zhǎng)3cm以上時(shí)，將組培苗移到溫室大棚煉苗7-15d ;煉苗條件為前兩天拉雙 層遮陰網(wǎng)，兩天后單層遮陰網(wǎng)。
[0014] 實(shí)施例3 一種預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其中主要步驟包括： a、 外植體的獲取和消毒，選4株健康的雜交蘭母本，從每株雜交蘭母本上取1個(gè)新芽， 將雜交蘭新芽從基部切下，每株編號(hào)為A、B、C、D，雜交蘭切下的新芽為外植體，編號(hào)為AOl、 B01、C01、DOl (每取一個(gè)外植體，將刀片蘸酒精并用火燒過(guò)后，再取另外一個(gè)外植體)，分別 將外植體AOl、BOl、COl、DOl的最外層2-3層葉片剝掉，用飽和洗衣粉溶液浸泡20-30min， 流水沖洗10_30min，再在超凈工作臺(tái)上，將外層葉片全部剝掉，露出莖尖和側(cè)芽，并用刀片 將芽基部黑色部分切除，然后用1. 〇%次氯酸鈉溶液浸泡10_30min，無(wú)菌水沖洗5-6次，用滅 菌濾紙吸干表面水分備用； b、 不定芽誘導(dǎo)和母本后期觀察；將外植體A01、B01、C01、DOl根據(jù)大小從中間縱切 成0-4塊，較小外植體不用縱切，每塊至少含有1個(gè)側(cè)芽或頂芽，將小塊分別插入不定 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中放置于培養(yǎng)室內(nèi)暗培養(yǎng)2d，然后轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定芽，并做好編 號(hào)A01C，A01D，B01C，B01D，C01C，C01D，D01C，DOlD ;所采用的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為： MS+6-BA0. 5-3. Omg/L+2. 5% 白糖 +5-10% 土豆泥 +0? 7% 卡拉膠，pH5. 6-5. 8.培養(yǎng)室溫度為 20-25°C，光照時(shí)間為10_16h/d，光照強(qiáng)度為60-100iimol m-2s-l ;觀察母本A、B、C、D后新 長(zhǎng)出的第二、三個(gè)芽上是否有拜拉絲病毒感染，4個(gè)母本上都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)拜拉絲病毒感染的現(xiàn) 象； c、 繼代增殖；將母本后代誘導(dǎo)出來(lái)的不定芽A01C，A01D，B01C，B01D，C01C，C01D， D01C，DOlD 轉(zhuǎn)到 MS+6-BAl-3mg/L+2. 5% 白糖 + 5-10% 土豆泥 +0. 7% 卡拉膠，pH5. 6-5. 8 的培 養(yǎng)基上繼代增殖，繼代增殖間隔為25天； d、 組培苗生根、煉苗；將叢生芽繼代6-8代后，挑選高3-5cm并且粗壯的單芽，從基部切 下，轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上生根；生根培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 1-0. 5mg/L+IBA0. 5-lmg/L+香蕉 汁1%-5%+白糖2%+卡拉膠0. 7%+2g/l活性炭，pH5. 6-5. 8 ;培養(yǎng)條件不變；經(jīng)過(guò)30d，新根長(zhǎng) 出3條以上，根長(zhǎng)3cm以上時(shí)，將組培苗移到溫室大棚煉苗7-15d ;煉苗條件為前兩天拉雙 層遮陰網(wǎng)，兩天后單層遮陰網(wǎng)。
[0015] 對(duì)比例1 a、 外植體的獲取，選3株健康的雜交蘭母本，從每株雜交蘭母本上取1個(gè)新芽，將雜交 蘭新芽從基部切下，每株編號(hào)為A、B、C，雜交蘭切下的新芽為外植體，編號(hào)為AOl、BOl、COl (每取一個(gè)外植體，將刀片蘸酒精并用火燒過(guò)后，再取另外一個(gè)外植體)，分別將外植體A01、 B0UC01的最外層2-3層葉片剝掉，無(wú)消毒過(guò)程； b、 不定芽誘導(dǎo)和母本后期觀察；將外植體A01、B01、C01、DOl根據(jù)大小從中間縱切 成0-4塊，較小外植體不用縱切，每塊至少含有1個(gè)側(cè)芽或頂芽，將小塊分別插入不定 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中放置于培養(yǎng)室內(nèi)暗培養(yǎng)2d，然后轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定芽，并做好編 號(hào)A01C，A01D，B01C，B01D，C01C，C01D，D01C，DOlD ;所采用的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為： MS+6-BA0. 5-3. Omg/L+2. 5% 白糖 +5-10% 土豆泥 +0? 7% 卡拉膠，pH5. 6-5. 8.培養(yǎng)室溫度為 20-25°C，光照時(shí)間為10_16h/d，光照強(qiáng)度為60-100iimol m-2s-l ;觀察母本A、B、C、D后新 長(zhǎng)出的第二、三個(gè)芽上是否有拜拉絲病毒感染，如發(fā)現(xiàn)C新長(zhǎng)出的芽上有拜拉絲病毒感染， 將母本C選出，銷(xiāo)毀，并將利用感染拜拉絲病毒母本上的芽誘導(dǎo)出來(lái)的叢生芽C01C，COlD全 部選出、銷(xiāo)毀； C、繼代增殖；將剩余母本后代誘導(dǎo)出來(lái)的不定芽A01C，A01D，B01C，B01D，D01C，DOlD 轉(zhuǎn)到MS+6-BAl-3mg/L+2. 5%白糖+ 5-10% 土豆泥+0. 7%卡拉膠，pH5. 6-5. 8的培養(yǎng)基上繼 代增殖，繼代增殖間隔為30天； d、組培苗生根、煉苗；將叢生芽繼代6-8代后，挑選高3-5cm并且粗壯的單芽，從基部切 下，轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上生根；生根培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 1-0. 5mg/L+IBA0. 5-lmg/L+香蕉 汁1%-5%+白糖2%+卡拉膠0. 7%+2g/l活性炭，pH5. 6-5. 8 ;培養(yǎng)條件不變；經(jīng)過(guò)30d，新根長(zhǎng) 出3條以上，根長(zhǎng)3cm以上時(shí)，將組培苗移到溫室大棚煉苗7-15d ;煉苗條件為前兩天拉雙 層遮陰網(wǎng)，兩天后單層遮陰網(wǎng)。
[0016] 對(duì)比例2 通過(guò)新芽生長(zhǎng)分出的新苗栽培，不經(jīng)過(guò)外植體培養(yǎng)。
[0017] 將以上實(shí)施例培養(yǎng)的秧苗在溫室大棚煉苗后移至花盆栽培，通過(guò)以下表格對(duì)實(shí)施 例中的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和對(duì)比如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其特征在于，主要步驟包括： a、 外植體的獲取和消毒，選出2-10株健康的雜交蘭母本，從每株雜交蘭母本上取1-3 個(gè)新芽，將雜交蘭新芽從基部切下，每株給予相應(yīng)編號(hào)，先將雜交蘭新芽最外層2-3層葉片 剝掉，用飽和洗衣粉溶液浸泡20-30min，流水沖洗10-30min，再在超凈工作臺(tái)上，將外層葉 片全部剝掉，露出莖尖和側(cè)芽，并用刀片將芽基部黑色部分切除，然后用1. 0%次氯酸鈉溶 液浸泡10_30min，無(wú)菌水沖洗5-6次，用滅菌濾紙吸干表面水分備用； b、 不定芽誘導(dǎo)和母本后期觀察；將上述外植體從中間縱切成0-4塊，較小新芽不用縱 切，每塊至少含有1個(gè)側(cè)芽或頂芽，將小塊插入不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中放置于培養(yǎng)室內(nèi)暗培 養(yǎng)2d，然后轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定芽，并做好相應(yīng)編號(hào)；觀察母本后新長(zhǎng)出的第二、三個(gè) 芽上是否有拜拉絲病毒感染，將前期無(wú)拜拉絲后期表現(xiàn)出拜拉絲感染的母本選出，銷(xiāo)毀，并 將編號(hào)記錄下來(lái)；將利用感染拜拉絲病毒母本上的芽誘導(dǎo)出來(lái)的叢生芽全部選出、銷(xiāo)毀； c、 繼代增殖；將剩余母本后代誘導(dǎo)出來(lái)的不定芽，轉(zhuǎn)到不定芽培養(yǎng)基上繼代增殖，繼代 間隔為20-30天； d、 組培苗生根、煉苗；將叢生芽繼代6-8代后，挑選高3-5cm并且粗壯的單芽，從基部切 下，轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上生根，培養(yǎng)條件不變；經(jīng)過(guò)30d，新根長(zhǎng)出3條以上，根長(zhǎng)3cm以上時(shí)， 將組培苗移到溫室大棚煉苗7-15d ;煉苗條件為前兩天拉雙層遮陰網(wǎng)，兩天后單層遮陰網(wǎng)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其特征在于：所采用的 雜交蘭母本為經(jīng)過(guò)半年適地種植，為比較粗壯、無(wú)病蟲(chóng)害并且觀察雜交蘭新芽沒(méi)有拜拉絲 病毒的植株，每株做好編號(hào)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其特征在于所述適地種 植為：按照該品種生長(zhǎng)習(xí)性，盡量滿足該品種栽培所需環(huán)境進(jìn)行溫室大棚種植，每盆雜交蘭 之間間隔40-70cm，防止彼此摩擦并保證空氣流通。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其特征在于：每取一個(gè) 外植體，將刀片蘸酒精并用火燒過(guò)后，再取另外一個(gè)外植體。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的的預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其特征在于：不定芽 誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+6-BA0. 5-3. Omg/L+2. 5% 白糖 +5-10% 土豆泥 +0. 7% 卡拉膠，pH5. 6-5. 8， 培養(yǎng)室溫度為20-25°C，光照時(shí)間為10_16h/d，光照強(qiáng)度為60-100μπιο1 m-2s-l。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的的預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其特征在于：不定芽 培養(yǎng)基為MS+6-BAl-3mg/L+2. 5%白糖+ 5-10% 土豆泥+0. 7%卡拉膠，pH5. 6-5. 8的培養(yǎng)基， 培養(yǎng)室溫度為20-25°C，光照時(shí)間為10_16h/d，光照強(qiáng)度為60-100ymol m-2s-l。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的的預(yù)防雜交蘭拜拉絲病毒的育苗方法，其特征在于：生根培 養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0. 1-0. 5mg/L+IBA0. 5-lmg/L+ 香蕉汁 1%-5%+ 白糖 2%+ 卡拉膠 0· 7%+2g/ 1 活性炭，ρΗ5· 6-5. 8。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104255492SQ201410480231
【公開(kāi)日】2015年1月7日 申請(qǐng)日期:2014年9月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月19日
【發(fā)明者】范俊強(qiáng), 尹金華, 張善信, 傅海平 申請(qǐng)人:東莞市生物技術(shù)研究所, 東莞職業(yè)技術(shù)學(xué)院, 東莞市訊禾園藝科技有限公司