一種茶籽粕脫毒方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種茶籽粕脫毒方法，包括步驟：使用黑曲霉(Aspergillus niger)和乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)混合發(fā)酵茶籽粕原料。該方法的具體步驟為：茶籽粕中加入3-5倍重量份的水，攪拌均勻，60℃-90℃處理1-3h；分別培養(yǎng)黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種；調(diào)節(jié)預(yù)處理過(guò)的茶籽粕pH至6.5-7.5，加入甘蔗糖蜜，60℃-90℃熱處理1h后接種，發(fā)酵72h后發(fā)酵產(chǎn)物干燥粉碎后即得脫毒茶籽粕。本發(fā)明使用黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種發(fā)酵，具有優(yōu)異的協(xié)同性能，發(fā)酵后茶皂苷含量降低顯著，小分子肽含量顯著提高。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種茶籽粕脫毒方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種茶籽柏脫毒方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 油茶是中國(guó)特有的一種純天然高級(jí)油料植物，占全國(guó)木本食用油料的80%以上。 我國(guó)油茶面積約有5500萬(wàn)畝，油茶籽年產(chǎn)量約為100萬(wàn)噸，年產(chǎn)茶油高達(dá)20萬(wàn)噸，預(yù)估產(chǎn) 值為110億元。按照油茶茶籽含油量26 %?39%，得油率70 %計(jì)算，油茶籽柏年產(chǎn)量70萬(wàn) 噸左右，而且今年來(lái)茶油產(chǎn)量逐年增長(zhǎng)，導(dǎo)致茶籽柏產(chǎn)量也進(jìn)入了增長(zhǎng)快車(chē)道。
[0003] 茶油生產(chǎn)中產(chǎn)生的茶籽柏中茶皂素、多酚類(lèi)物質(zhì)等抗?fàn)I養(yǎng)因子含量過(guò)高，不適 宜直接用于動(dòng)物飼料，大部分被用作清塘劑、肥料、燃料，甚至廢棄，少量用于茶皂素的提 取，造成了資源的極大浪費(fèi)。茶籽柏一般含0.5%?7%的粗脂肪、10%?20%的蛋白質(zhì)、 15%?25%的粗纖維、30%?60%的糖類(lèi)物質(zhì)、20%?50%的無(wú)氮浸出物。油茶籽柏蛋白 質(zhì)中含有18種氨基酸，包括畜禽生長(zhǎng)所需的10種必需氨基酸，其中蘇氨酸、谷氨酸、組氨酸 和精氨酸等含量較為豐富。同時(shí)，礦物質(zhì)和微量元素 Ca、K、Mg、Fe、Mn等含量也較為豐富。 如果除去油茶籽柏中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，就可以使其變成一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高的飼料原料。
[0004] 茶皂苷是茶籽柏中的主要毒性物質(zhì)，其毒性主要表現(xiàn)為溶血性。溶血性是其苷元 與紅細(xì)胞壁上膽留醇結(jié)合生成不溶于水的復(fù)合物沉淀，破壞細(xì)胞滲透壓，使紅細(xì)胞發(fā)生崩 解，進(jìn)而導(dǎo)致溶血現(xiàn)象。皂苷有無(wú)溶血活性與皂苷元有關(guān)，活性強(qiáng)弱與糖分子的大小、糖分 子之間的連接、糖分子上的取代基等有關(guān)，此外還與皂苷的濃度有關(guān)。因此本領(lǐng)域技術(shù)人員 致力于開(kāi)發(fā)一種能夠顯著降低茶皂苷含量，改善茶籽柏動(dòng)物飼料用品質(zhì)的技術(shù)。
[0005] 甘蔗糖蜜是制糖工業(yè)中將壓榨出的甘蔗汁液，經(jīng)加熱、中和、沉淀、過(guò)濾、濃縮、結(jié) 晶等制糖工序后所剩下的濃稠液體，俗稱(chēng)糖稀，屬于液體能量飼料。甘蔗糖蜜能刺激瘤胃 (反芻動(dòng)物的第一胃）活動(dòng)，增進(jìn)食欲，從而增加草料和干物質(zhì)攝入量并幫助消化。糖蜜的 美味使草料的攝入增加。其他味道差的成分味道被糖蜜掩蓋，從而保證了重要元素的攝入。 甘蔗糖蜜作為一種糖工業(yè)中的天然副產(chǎn)品，是很好的能量來(lái)源和生命活動(dòng)調(diào)節(jié)者。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 有鑒于現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種茶籽柏脫毒 的方法。
[0007] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種茶籽柏脫毒方法，包括步驟：
[0008] 使用黑曲霉（Aspergillus niger)和乳酸乳球菌（Lactococcus Iactis)混合發(fā) 酵茶籽柏原料。
[0009] 優(yōu)選地，所述方法的具體步驟為：
[0010] (1)茶籽柏預(yù)處理
[0011] 茶籽柏中加入3-5倍重量份的水，攪拌均勻，60°C -90°c處理l-3h ;
[0012] ⑵菌種培養(yǎng)
[0013] 分別培養(yǎng)黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種；
[0014] ⑶半固體發(fā)酵
[0015] 調(diào)節(jié)步驟（1)中預(yù)處理過(guò)的茶籽柏pH至6. 5-7. 5,加入甘蔗糖蜜，60°C -90°C熱處 理Ih后接種步驟（2)中所得菌種，發(fā)酵72h ;
[0016] ⑷干燥粉碎
[0017] 將步驟（3)發(fā)酵產(chǎn)物干燥粉碎后即得脫毒茶籽柏。
[0018] 優(yōu)選地，步驟（1)中，茶籽柏預(yù)處理過(guò)程中pH為9-12 ;更優(yōu)選地為10-11。
[0019] 優(yōu)選地，步驟（2)中，黑曲霉菌種培養(yǎng)條件為：蔗糖2.5 % (w/v)，酵母粉0.3 % (w/ v)，蛋白胨 1.0% (w/v) ,K2HPO4 0.1% (w/v)，MgS04.7H20 0.01% (w/v)，25°C培養(yǎng) 1-2 天。
[0020] 優(yōu)選地，步驟（2)中，乳酸乳球菌菌種培養(yǎng)條件為：蛋白胨1.0% (w/v)，牛肉膏 1.0% (w/v)，酵母抽提物 0.5% (w/v)，葡萄糖 2% (w/v)，K2HP04 0.2% (w/v)，MgS04*7H20 0· 002% (w/v)，37°C厭氧培養(yǎng) 12-24 小時(shí)。
[0021] 優(yōu)選地，步驟（3)中，黑曲霉菌種接種量為5-10% (v/v)。
[0022] 優(yōu)選地，步驟（3)中，乳酸乳球菌菌種接種量為20-30% (v/v)。
[0023] 優(yōu)選地，步驟（3)中，甘鹿糖蜜的添加量為茶籽柏質(zhì)量的5-10%。
[0024] 技術(shù)效果
[0025] 本發(fā)明的技術(shù)方案，由于茶籽柏中茶皂素的存在，使得茶籽柏粘性較大，本發(fā)明人 在研究意外地發(fā)現(xiàn)，在堿性條件下高溫處理茶籽柏，能夠極大的降低茶籽柏原料的粘度，使 得后續(xù)的半固體發(fā)酵能夠順利的進(jìn)行。
[0026] 本發(fā)明使用黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種發(fā)酵，具有優(yōu)異的協(xié)同性能，發(fā)酵后茶 皂苷含量降低顯著，小分子肽含量顯著提高。
[0027] 本發(fā)明使用甘蔗糖蜜作為發(fā)酵培養(yǎng)基的原料，不僅價(jià)格低廉，而且能夠完全滿(mǎn)足 發(fā)酵過(guò)成中的營(yíng)養(yǎng)需求，非常適合作為黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種混合發(fā)酵的碳源，無(wú) 需再添加其它成分，簡(jiǎn)化了發(fā)酵工藝。前期的研究結(jié)果表明，以黑曲霉和乳酸乳球菌進(jìn)行混 合發(fā)酵，使用甘蔗糖蜜作為碳源，發(fā)酵產(chǎn)物中，小分子肽的含量明顯高于以葡萄糖（高出約 20% )和蔗糖（高出約10% )作為碳源進(jìn)行發(fā)酵。

【具體實(shí)施方式】
[0028] 在本發(fā)明的實(shí)施例中，有關(guān)數(shù)據(jù)按照下述方法進(jìn)行檢測(cè)：
[0029] 粗蛋白含量檢測(cè)方法參考：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T6432-94《飼料中粗蛋白測(cè)定方法》；
[0030] 水溶性蛋白檢測(cè)方法參考：農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T1205-2006《大豆水溶性蛋白含量 的測(cè)定》執(zhí)行；
[0031] 小分子肽含量檢測(cè)方法參考：按照輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)QB/T2653-2004《大豆肽粉》執(zhí) 行；
[0032] 茶皂素含量檢測(cè)方法參考：鐘世安等，反相高效液相色譜法測(cè)定茶籽餅中茶皂素 [J]，理化檢驗(yàn)，2008 ;
[0033] 纖維素含量檢測(cè)方法參考：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009. 10-23。
[0034] 黑曲霉（Aspergillus niger)和乳酸乳球菌（Lactococcus Iactis)購(gòu)自北京北 納凱創(chuàng)生物技術(shù)有限公司。
[0035] 實(shí)施例I
[0036] (1)茶籽柏預(yù)處理
[0037] 5公斤茶籽柏中加入20公斤的水，攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH為10,90°C處理Ih ;
[0038] (2)菌種培養(yǎng)
[0039] 黑曲霉囷種的培養(yǎng)：
[0040] 鹿糖 2. 5% (w/v)，酵母粉 0· 3% (w/v)，蛋白胨 I. 0% (w/v) ,K2HPO4 0· 1% (w/v)， MgS04 · 7H20 0· 01% (w/v)，25°C培養(yǎng) 2 天。
[0041] 乳酸乳球菌培養(yǎng)：
[0042] 蛋白胨I. 0% (w/v)，牛肉膏L 0% (w/v)，酵母抽提物0· 5% (w/v)，葡萄糖2% (w/ v)，K2HPO4 0· 2% (w/v)，MgSO4 · 7H20 0· 002% (w/v)，37°C厭氧培養(yǎng) 24 小時(shí)。
[0043] (3)半固體發(fā)酵
[0044] 調(diào)節(jié)步驟（1)中預(yù)處理過(guò)的茶籽柏pH至6. 5,加入甘鹿糖蜜500g，9(TC熱處理Ih 后接種黑曲霉菌種液2. 5L，乳酸乳球菌菌種液5L，發(fā)酵72h ;
[0045] (4)干燥粉碎
[0046] 將步驟（3)發(fā)酵產(chǎn)物干燥粉碎后即得脫毒茶籽柏。
[0047] 以未發(fā)酵的茶籽柏為對(duì)照，進(jìn)行檢測(cè)，設(shè)定對(duì)照組中各項(xiàng)目含量為100%，檢測(cè)結(jié) 果如表1所示。
[0048] 表 1
[0049]

【權(quán)利要求】
1. 一種茶籽柏脫毒方法，其特征在于，包括步驟：使用黑曲霉（Aspergillus niger)和 乳酸乳球菌（Lactococcus lactis)混合發(fā)酵茶籽柏原料。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述方法的具體步驟為： (1) 茶籽柏預(yù)處理 茶籽柏中加入3-5倍重量份的水，攪拌均勻，60°C -90°C處理l_3h ; (2) 菌種培養(yǎng) 分別培養(yǎng)黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種； (3) 半固體發(fā)酵 調(diào)節(jié)步驟（1)中預(yù)處理過(guò)的茶籽柏pH至6. 5-7. 5,加入甘蔗糖蜜，60°C _90°C熱處理lh 后接種步驟（2)中所得菌種，發(fā)酵72h ; (4) 干燥粉碎 將步驟（3)發(fā)酵產(chǎn)物干燥粉碎后即得脫毒茶籽柏。
3. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟（1)中，茶籽柏預(yù)處理過(guò)程中pH為9-12;更優(yōu) 選地為10-11。
4. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟⑵中，黑曲霉菌種培養(yǎng)條件為：鹿糖2. 5% (w/v)，酵母粉 0· 3% (w/v)，蛋白胨 1. 0% (w/v)，Κ2ΗΡ04 0· 1 % (w/v)，MgS04 · 7H20 0· 01 % (w/v)，25°C 培養(yǎng) 1-2 天。
5. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟⑵中，乳酸乳球菌菌種培養(yǎng)條件為：蛋白胨 1.0% (w/v)，牛肉膏 1.0% (w/v)，酵母抽提物 0.5% (w/v)，葡萄糖 2% (w/v)，K2HP04 0.2% (w/v)，MgS04 · 7H20 0· 002% (w/v)，37°C厭氧培養(yǎng) 12-24 小時(shí)。
6. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟（3)中，黑曲霉菌種接種量為5-10% (v/v)。
7. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟（3)中，乳酸乳球菌菌種接種量為20-30% (v/ v)。
8. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟（3)中，甘蔗糖蜜的添加量為茶籽柏質(zhì)量的 5-10%。
【文檔編號(hào)】A23K1/14GK104286383SQ201410487785
【公開(kāi)日】2015年1月21日 申請(qǐng)日期:2014年9月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月16日
【發(fā)明者】楊鐘華 申請(qǐng)人:瑞安市普羅生物科技有限公司