一種利用酒精廢液和作物秸稈制備飼料蛋白的方法
【專利摘要】本發(fā)明針對(duì)作物秸稈飼料化利用度不高、酒精廢液污染嚴(yán)重的現(xiàn)狀，公開了一種利用酒精廢液和作物秸稈制備飼料蛋白的方法，以滿足秸稈綜合利用、畜牧業(yè)飼料蛋白需求、酒精廢液無(wú)害化處理及利用的客觀需求。本發(fā)明采用“氨化+復(fù)合酶解+多菌種三步固態(tài)發(fā)酵”工藝制得纖維素、木聚糖降解度高、飼料蛋白含量高的飼料蛋白產(chǎn)品，產(chǎn)品中富含益生菌、維生素、酶及氨基酸、短肽、優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分，具有促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、提高飼料利用率、增強(qiáng)免疫力、改進(jìn)腸道微生態(tài)、防止疾病等優(yōu)點(diǎn)；本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了作物秸稈的飼用資源化高值利用和酒精廢液的無(wú)害化處理及資源化利用，具有廣闊的應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】 一種利用酒精廢液和作物秸稈制備飼料蛋白的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，屬于飼料加工領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002]蛋白質(zhì)原料是飼料工業(yè)發(fā)展的基礎(chǔ)，我國(guó)蛋白質(zhì)原料的緊缺和價(jià)格高漲已經(jīng)成為制約畜牧業(yè)發(fā)展的瓶頸之一。目前隨著人們生活水平的提高和對(duì)生活質(zhì)量的重視，對(duì)肉、蛋、奶、水產(chǎn)品的需求日益增多，糧食和飼料生產(chǎn)面臨嚴(yán)峻考驗(yàn)，飼料蛋白資源將日益匱乏，因此提高糧食向畜牧產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化效率和飼料的利用率，拓展飼料資源，開發(fā)非常規(guī)飼料已迫在眉睫。而緩解矛盾的重要策略就是針對(duì)現(xiàn)有蛋白源，提高其利用率，盡可能地挖掘飼料的可利用營(yíng)養(yǎng)成分，從根本上緩解飼料原料供應(yīng)緊張的局面。
[0003]我國(guó)每年在生產(chǎn)大量糧食的同時(shí)，秸桿產(chǎn)量也非常的大，作物秸桿中大約有65%-80%的干物質(zhì)能為動(dòng)物提供所需的能量。但對(duì)于大部分的秸桿產(chǎn)區(qū)，通常是在農(nóng)作物收割后將秸桿直接焚燒或用來(lái)作為生活燃料，秸桿用作飼料的占很少一部分，造成環(huán)境的污染和秸桿資源的大量浪費(fèi)。近幾年，隨著我國(guó)畜牧業(yè)向規(guī)模化方向的快速發(fā)展，飼料資源日益緊張，出現(xiàn)了牲畜與人爭(zhēng)奪糧食的嚴(yán)重現(xiàn)象。為了解決畜禽與人爭(zhēng)糧，同時(shí)又大力發(fā)展畜牧業(yè)的問(wèn)題，拓廣飼料來(lái)源和提高飼料質(zhì)量是首要解決的問(wèn)題。秸桿是一種非常規(guī)性飼料資源，其質(zhì)地粗糙堅(jiān)硬、適口性較差、消化利用率低、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值不高，但經(jīng)合理加工后，可提高采食量、消化率和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，飼喂草食動(dòng)物或作為配制全價(jià)飼料的基料，對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)、發(fā)育和增重、提高飼料報(bào)酬和經(jīng)濟(jì)效益有良好的作用。因此利用秸桿纖維素生產(chǎn)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高的飼料具有廣闊前景。
[0004]酒精是重要的工業(yè)原料，我國(guó)年產(chǎn)900萬(wàn)噸以上，占世界第三位。隨著國(guó)民經(jīng)濟(jì)的增長(zhǎng)，酒精的需求量還會(huì)增加。但是在生產(chǎn)過(guò)程中每噸酒精要排出13?15m3蒸餾廢液，全國(guó)排放量超過(guò)13500萬(wàn)噸，成為食品發(fā)醉行業(yè)中污染環(huán)境最嚴(yán)重的行業(yè)。由于酒精燕餾廢液中含有大量未被利用的營(yíng)養(yǎng)成分一一蛋白質(zhì)、脂肪、搪類、礦物質(zhì)等，因此設(shè)法將蒸餾廢液回收用以制取蛋白飼料，就成為科技人員的努力方向。目前酒精廢液轉(zhuǎn)變?yōu)轱暳隙嗖捎霉桃悍蛛x、濃縮干燥的工藝，產(chǎn)生大量的污水，能耗嚴(yán)重，利用酒精廢液開發(fā)節(jié)能型飼料化全利用成為酒精行業(yè)發(fā)展最具應(yīng)用價(jià)值的利用途徑。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明針對(duì)作物秸桿飼料化利用度不高、酒精廢液污染嚴(yán)重的現(xiàn)狀，提供一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，以滿足秸桿綜合利用、畜牧業(yè)飼料蛋白需求、酒精廢液無(wú)害化處理及利用的客觀需求。
[0006]本發(fā)明上述目的是通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的:
本發(fā)明提供一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，其特征在于具體包括以下步驟: (1)秸桿粉碎:選取無(wú)霉變的秸桿，清除泥土等雜志，粉碎過(guò)40目篩；
(2)固液分離:酒精廢液自然沉降固液分離，得上清液和發(fā)酵酒糟；
(3)秸桿氨化:加入秸桿3?5%的氨水，加入酒精廢液上清液，調(diào)整含水率至60?70%，混合均勻，置于密閉環(huán)境下氨化3?5天；
(4)秸桿酶解:調(diào)整氨化后的秸桿pH4.0?5.0，加入纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶，力口酶量為4?5%、2?3%、I?2%，混合均勻，酶解16?24h，酶解溫度控制在40?50°C ；
(5)配制固體培養(yǎng)基:將酶解后的秸桿與發(fā)酵酒糟混合，并添加玉米漿、麩皮、豆餅粉、尿素、硫酸銨等，用上清液調(diào)整培養(yǎng)基含水量120?150%，調(diào)整初始pH為7.0左右；
(6)曲霉活化:取新鮮麩皮，用60目篩子篩去細(xì)粉，按麩皮:水=1:1.0?1.3比例加入水，拌勻至無(wú)干粉又無(wú)結(jié)團(tuán)現(xiàn)象。拌勻后，分裝入2000mL三角瓶中，每只2000mL三角瓶裝濕麩皮約10g,在0.1MPa表壓下滅菌40?60min,冷卻至35°C,每一個(gè)三角瓶中接入I一2環(huán)已活化好的斜面米曲霉cv-8、黑曲霉sp-1孢子，培養(yǎng)基品溫控制在(35±1)°C.每隔12 — 24h搖瓶一次，孢子長(zhǎng)出后停止制備孢子懸浮液；
(7)—次固體發(fā)酵:將米曲霉、黑曲霉按2?3%、6?10%的比例接種到混合配料中，拌勻35?40°C培養(yǎng)，通風(fēng)培養(yǎng)3?5天；
(8)產(chǎn)朊假絲酵母活化:將產(chǎn)朊假絲酵母接到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，30°C，180r/min轉(zhuǎn)速下恒溫?fù)u瓶24小時(shí)；然后以1:100比例，將種子液接到Y(jié)H)培養(yǎng)基中，得到釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母液體種子；
(9)枯草芽孢桿菌活化:采用LB培養(yǎng)基在28?32°C條件下培養(yǎng)24h，制得液體種子；
(10)二次固體發(fā)酵:將產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌按3?5%、2?3%接種比例接種至培養(yǎng)基，28°C左右培養(yǎng)2?3天；
(11)三次固體發(fā)酵:將固體乳酸菌粉按3?5%的接種比例接種至培養(yǎng)基，26?30°C厭氧培養(yǎng)24h左右；
(12)干燥:發(fā)酵結(jié)束后低溫通風(fēng)干燥；
(13)粉碎:將干燥后的發(fā)酵飼料粉碎即得成品。
[0007]上述秸桿可以是小麥秸桿、玉米秸桿、稻草秸桿中的一種或幾種。
[0008]上述步驟(5)中固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基組分為:秸桿降解產(chǎn)物36?44%、酒糟27?33%、玉米漿9?11%、麩皮3.5?4.5%、豆餅粉9?11%、尿素2.5?3.5%、硫酸銨2.5?3.5%，各組分之和為100%。
[0009]上述步驟(7 )中固體培養(yǎng)基無(wú)需滅菌。
[0010]本發(fā)明提供一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，產(chǎn)品中真蛋白含量約為42?48%，蛋白含量提高12.85%以上，且發(fā)酵飼料中含有大量的有益活菌、多種維生素、酶及氨基酸、短肽、優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分。發(fā)酵后秸桿纖維素降解為25.41%，降解率為52.6% ;半纖維素降解為7.82%,降解率為58.6% ;發(fā)酵產(chǎn)物氨基酸組成齊全，各項(xiàng)氨基酸數(shù)值總和占樣品總重量的10.54%。
[0011]本發(fā)明提供一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，其優(yōu)點(diǎn)在于:
(I)通過(guò)秸桿的氨化處理和復(fù)合酶解，將微生物不易利用的纖維素、木聚糖等降解為還原糖，經(jīng)測(cè)定復(fù)合酶解后作物秸桿中的還原糖含量超過(guò)40%，最高達(dá)到42.56%，比目前報(bào)道的單純氨化處理或復(fù)合酶解處理法提高20%以上，還原糖含量提高為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供了充足的碳源；(2)黑曲霉和米曲霉是目前已知降解秸桿作用最顯著的菌株，霉菌與酒糟中的酵母菌混合培養(yǎng)的互惠共生關(guān)系使秸桿蛋白含量有較大提高，酵母菌不僅可以起去阻遏作用，而且對(duì)真菌的生長(zhǎng)有正效，分析原因米曲霉、黑曲霉等霉菌同化淀粉和纖維素的能力強(qiáng)，可將秸桿飼料的結(jié)構(gòu)性碳水化合物降解為酵母可利用的單糖、雙糖等單糖類物質(zhì)，使酒糟中的酵母得以良好的生長(zhǎng)；此外，在多菌混合發(fā)酵中，酶促作用生成的糖立即被發(fā)酵糖的微生物所利用，這樣就維持了降解物的濃度，消除了酶合成作用受到的降解物的阻遏作用，也解除了反應(yīng)終產(chǎn)物對(duì)酶的反饋抑制，縮短了發(fā)酵過(guò)程；(3)采用多菌混菌發(fā)酵，組合菌株發(fā)酵增加了發(fā)酵中的許多基因功能，通過(guò)不同代謝能力的組合，完成單個(gè)菌種難以完成的復(fù)雜代謝作用，通過(guò)微生物之間的互惠和偏利生提高生產(chǎn)效率，釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母的存在促進(jìn)了霉菌的降解作用，酵母的大量繁殖增加了產(chǎn)品中的菌體蛋白，枯草芽孢桿菌提高了產(chǎn)品中益生菌含量，提高了產(chǎn)品的功效；乳酸菌產(chǎn)生乳酸等則可改善發(fā)酵飼料的適口性。協(xié)同發(fā)酵形式對(duì)各種原料的有效轉(zhuǎn)化、蛋白飼料的品質(zhì)提高起到了重要的積極作用；(4)采用分段發(fā)酵，發(fā)酵菌株對(duì)溫度、pH、通氧等要求不同，不同的反應(yīng)控制條件，提高了菌體的生長(zhǎng)速率，縮短了發(fā)酵時(shí)間；(5)產(chǎn)品中富含益生菌、維生素、酶及氨基酸、短肽、優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分，具有促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、提高飼料利用率、增強(qiáng)免疫力、改進(jìn)腸道微生態(tài)、防止疾病、減少環(huán)境污染等優(yōu)點(diǎn)；(6)采用固態(tài)發(fā)酵，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，無(wú)環(huán)境污染。

【具體實(shí)施方式】
[0012] 實(shí)施例1:
一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，具體制備步驟如下:
(1)稻草秸桿粉碎:選取無(wú)霉變的秸桿，清除泥土等雜志，粉碎過(guò)40目篩；
(2)固液分離:酒精廢液自然沉降固液分離，得上清液和發(fā)酵酒糟；
(3)秸桿氨化:加入秸桿4%的氨水，加入酒精廢液上清液，調(diào)整含水率至60?70%，混合均勻，置于密閉環(huán)境下氨化3?5天；
(4)秸桿酶解:調(diào)整氨化后的秸桿pH4.0?5.0，加入纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶，力口酶量為4%、3%、1%，混合均勻，酶解16?24h，酶解溫度控制在40?50°C ；
(5)配制固體培養(yǎng)基:按酶解后的秸桿41%、酒糟27%、玉米漿11%、麩皮5%、豆餅粉9%、尿素3.5%、硫酸銨3.5%混合，用上清液調(diào)整培養(yǎng)基含水量120?150%，調(diào)整初始pH為7.0左右；
(6)曲霉活化:取新鮮麩皮，用60目篩子篩去細(xì)粉，按麩皮:水=1:1.0?1.3比例加入水，拌勻至無(wú)干粉又無(wú)結(jié)團(tuán)現(xiàn)象。拌勻后，分裝入2000mL三角瓶中，每只2000mL三角瓶裝濕麩皮約10g,在0.1MPa表壓下滅菌40?60min,冷卻至35°C,每一個(gè)三角瓶中接入I一2環(huán)已活化好的斜面米曲霉cv-8、黑曲霉sp-1孢子，培養(yǎng)基品溫控制在(35±1)°C.每隔12 — 24h搖瓶一次，孢子長(zhǎng)出后停止制備孢子懸浮液；
(7)—次固體發(fā)酵:將米曲霉、黑曲霉按2.5%、8%的比例接種到混合配料中，拌勻35?40°C培養(yǎng)，通風(fēng)培養(yǎng)3?5天；
(8)產(chǎn)朊假絲酵母活化:將產(chǎn)朊假絲酵母接到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，30°C，180r/min轉(zhuǎn)速下恒溫?fù)u瓶24小時(shí)；然后以1:100比例，將種子液接到Y(jié)H)培養(yǎng)基中，得到釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母液體種子； (9)枯草芽孢桿菌活化:采用LB培養(yǎng)基在28?32°C條件下培養(yǎng)24h，制得液體種子；
(10)二次固體發(fā)酵:將產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌按4%、2.5%接種比例接種至培養(yǎng)基，28°C左右培養(yǎng)2?3天；
(11)三次固體發(fā)酵:將固體乳酸菌粉按4%的接種比例接種至培養(yǎng)基，26?30°C厭氧培養(yǎng)24h左右；
(12)干燥:發(fā)酵結(jié)束后低溫通風(fēng)干燥；
(13)粉碎:將干燥后的發(fā)酵飼料粉碎即得成品。
[0013]實(shí)施例2:
一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，具體制備步驟如下:
(O小麥秸桿粉碎:選取無(wú)霉變的秸桿，清除泥土等雜志，粉碎過(guò)40目篩；
(2)固液分離:酒精廢液自然沉降固液分離，得上清液和發(fā)酵酒糟；
(3)秸桿氨化:加入秸桿5%的氨水，加入酒精廢液上清液，調(diào)整含水率至60?70%，混合均勻，置于密閉環(huán)境下氨化3?5天；
(4)秸桿酶解:調(diào)整氨化后的秸桿pH4.0?5.0，加入纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶，力口酶量為5%、3%、2%，混合均勻，酶解16?24h，酶解溫度控制在40?50°C ；
(5)配制固體培養(yǎng)基:按酶解后的秸桿38%、酒糟33%、玉米漿9%、麩皮4.5%、豆餅粉9%、尿素3.5%、硫酸銨3%混合，用上清液調(diào)整培養(yǎng)基含水量120?150%，調(diào)整初始pH為7.0左右；
(6)曲霉活化:取新鮮麩皮，用60目篩子篩去細(xì)粉，按麩皮:水=1:1.0?1.3比例加入水，拌勻至無(wú)干粉又無(wú)結(jié)團(tuán)現(xiàn)象。拌勻后，分裝入2000mL三角瓶中，每只2000mL三角瓶裝濕麩皮約10g,在0.1MPa表壓下滅菌40?60min,冷卻至35°C,每一個(gè)三角瓶中接入I一2環(huán)已活化好的斜面米曲霉cv-8、黑曲霉sp-1孢子，培養(yǎng)基品溫控制在(35±1)°C.每隔12 — 24h搖瓶一次，孢子長(zhǎng)出后停止制備孢子懸浮液；
(7)—次固體發(fā)酵:將米曲霉、黑曲霉按2?3%、6?10%的比例接種到混合配料中，拌勻35?40°C培養(yǎng)，通風(fēng)培養(yǎng)3?5天；
(8)產(chǎn)朊假絲酵母活化:將產(chǎn)朊假絲酵母接到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，30°C，180r/min轉(zhuǎn)速下恒溫?fù)u瓶24小時(shí)；然后以1:100比例，將種子液接到Y(jié)H)培養(yǎng)基中，得到釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母液體種子；
(9)枯草芽孢桿菌活化:采用LB培養(yǎng)基在28?32°C條件下培養(yǎng)24h，制得液體種子；
(10)二次固體發(fā)酵:將產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌按5%、3%接種比例接種至培養(yǎng)基，28°C左右培養(yǎng)2?3天；
(11)三次固體發(fā)酵:將固體乳酸菌粉按5%的接種比例接種至培養(yǎng)基，26?30°C厭氧培養(yǎng)24h左右；
(12)干燥:發(fā)酵結(jié)束后低溫通風(fēng)干燥；
(13)粉碎:將干燥后的發(fā)酵飼料粉碎即得成品。
[0014]實(shí)施例3:
一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，具體制備步驟如下:
(1)玉米秸桿粉碎:選取無(wú)霉變的秸桿，清除泥土等雜志，粉碎過(guò)40目篩；
(2)固液分離:酒精廢液自然沉降固液分離，得上清液和發(fā)酵酒糟； (3)秸桿氨化:加入秸桿3%的氨水，加入酒精廢液上清液，調(diào)整含水率至60?70%，混合均勻，置于密閉環(huán)境下氨化3?5天；
(4)秸桿酶解:調(diào)整氨化后的秸桿pH4.0?5.0，加入纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶，力口酶量為4%、2%、1%，混合均勻，酶解16?24h，酶解溫度控制在40?50°C ；
(5)配制固體培養(yǎng)基:按酶解后的秸桿40%、酒糟30%、玉米漿10%、麩皮4%、豆餅粉10%、尿素3%、硫酸銨3%混合，用上清液調(diào)整培養(yǎng)基含水量120?150%，調(diào)整初始pH為7.0左右；
(6)曲霉活化:取新鮮麩皮，用60目篩子篩去細(xì)粉，按麩皮:水=1:1.0?1.3比例加入水，拌勻至無(wú)干粉又無(wú)結(jié)團(tuán)現(xiàn)象。拌勻后，分裝入2000mL三角瓶中，每只2000mL三角瓶裝濕麩皮約10g,在0.1MPa表壓下滅菌40?60min,冷卻至35°C,每一個(gè)三角瓶中接入I一2環(huán)已活化好的斜面米曲霉cv-8、黑曲霉sp-1孢子，培養(yǎng)基品溫控制在(35±1)°C.每隔12 — 24h搖瓶一次，孢子長(zhǎng)出后停止制備孢子懸浮液；
(7)一次固體發(fā)酵:將米曲霉、黑曲霉按2%、6%的比例接種到混合配料中，拌勻35?40°C培養(yǎng)，通風(fēng)培養(yǎng)3?5天；
(8)產(chǎn)朊假絲酵母活化:將產(chǎn)朊假絲酵母接到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，30°C，180r/min轉(zhuǎn)速下恒溫?fù)u瓶24小時(shí)；然后以1:100比例，將種子液接到Y(jié)H)培養(yǎng)基中，得到釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母液體種子；
(9)枯草芽孢桿菌活化:采用LB培養(yǎng)基在28?32°C條件下培養(yǎng)24h，制得液體種子；
(10)二次固體發(fā)酵:將產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌按3%、2%接種比例接種至培養(yǎng)基，28°C左右培養(yǎng)2?3天；
(11)三次固體發(fā)酵:將固體乳酸菌粉按3?5%的接種比例接種至培養(yǎng)基，26?30°C厭氧培養(yǎng)24h左右；
(12)干燥:發(fā)酵結(jié)束后低溫通風(fēng)干燥；
(13)粉碎:將干燥后的發(fā)酵飼料粉碎即得成品。
[0015]以上實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對(duì)其進(jìn)行限制；盡管參照前述實(shí)施例對(duì)被發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，但對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，依然可以對(duì)前述實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換；而對(duì)這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明所要求保護(hù)的技術(shù)方案的精神和范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，其特征在于具體包括以下步驟: (1)秸桿粉碎:選取無(wú)霉變的秸桿，清除泥土等雜志，粉碎過(guò)40目篩； (2)固液分離:酒精廢液自然沉降固液分離，得上清液和發(fā)酵酒糟； (3)秸桿氨化:加入秸桿3?5%的氨水，加入酒精廢液上清液，調(diào)整含水率至60?70%，混合均勻，置于密閉環(huán)境下氨化3?5天； (4)秸桿酶解:調(diào)整氨化后的秸桿pH4.0?5.0，加入纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶，力口酶量為4?5%、2?3%、I?2%，混合均勻，酶解16?24h，酶解溫度控制在40?50°C ； (5)配制固體培養(yǎng)基:將酶解后的秸桿與發(fā)酵酒糟混合，并添加玉米漿、麩皮、豆餅粉、尿素、硫酸銨等，用上清液調(diào)整培養(yǎng)基含水量120?150%，調(diào)整初始pH為7.0左右； (6)曲霉活化:取新鮮麩皮，用60目篩子篩去細(xì)粉，按麩皮:水=1:1.0?1.3比例加入水，拌勻至無(wú)干粉又無(wú)結(jié)團(tuán)現(xiàn)象；拌勻后，分裝入2000mL三角瓶中，每只2000mL三角瓶裝濕麩皮約10g,在0.1MPa表壓下滅菌40?60min,冷卻至35°C,每一個(gè)三角瓶中接入I一2環(huán)已活化好的斜面米曲霉cv-8、黑曲霉sp-1孢子，培養(yǎng)基品溫控制在(35±1)°C.每隔12 — 24h搖瓶一次，孢子長(zhǎng)出后停止制備孢子懸浮液； (7)—次固體發(fā)酵:將米曲霉、黑曲霉按2?3%、6?10%的比例接種到混合配料中，拌勻35?40°C培養(yǎng)，通風(fēng)培養(yǎng)3?5天； (8)產(chǎn)朊假絲酵母活化:將產(chǎn)朊假絲酵母接到Y(jié)PD培養(yǎng)基中，30°C，180r/min轉(zhuǎn)速下恒溫?fù)u瓶24小時(shí)；然后以1:100比例，將種子液接到Y(jié)H)培養(yǎng)基中，得到釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母液體種子； (9)枯草芽孢桿菌活化:采用LB培養(yǎng)基在28?32°C條件下培養(yǎng)24h，制得液體種子； (10)二次固體發(fā)酵:將產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌按3?5%、2?3%接種比例接種至培養(yǎng)基，28°C左右培養(yǎng)2?3天； (11)三次固體發(fā)酵:將固體乳酸菌粉按3?5%的接種比例接種至培養(yǎng)基，26?30°C厭氧培養(yǎng)24h左右； (12)干燥:發(fā)酵結(jié)束后低溫通風(fēng)干燥； (13)粉碎:將干燥后的發(fā)酵飼料粉碎即得成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，其特征在于所述作物秸桿是小麥秸桿、玉米秸桿、稻草秸桿中的一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，其特征在于所述步驟(5)中固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基組分為:秸桿降解產(chǎn)物36?44%、酒糟27?33%、玉米漿9?11%、麩皮3.5?4.5%、豆餅粉9?11%、尿素2.5?3.5%、硫酸銨2.5?3.5%，各組分之和為100%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用酒精廢液和作物秸桿制備飼料蛋白的方法，其特征在于所述步驟(7)中固體培養(yǎng)基無(wú)需滅菌。
【文檔編號(hào)】A23K1/06GK104256057SQ201410518207
【公開日】2015年1月7日 申請(qǐng)日期:2014年10月1日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月1日
【發(fā)明者】董書閣, 侯文燕, 張術(shù)聰 申請(qǐng)人:青島嘉瑞生物技術(shù)有限公司