一種液體培育蛹蟲草子座的方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于食藥用菌的栽培，特別是一種液體培育蛹蟲草子座的方法。是將蛹蟲草(Cordyceps militaris)菌種接種到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，包括菌絲體的培養(yǎng)、子實(shí)體的培養(yǎng)等工藝步驟，本發(fā)明解決了現(xiàn)有技術(shù)存在的生產(chǎn)周期長(zhǎng)、能耗高、安全隱患大等技術(shù)難題，具有生產(chǎn)周期縮短、蟲草子座有效成分含量高、生長(zhǎng)條件易于控制，便于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。
【專利說明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食藥用菌的栽培，特別是一種液體培育蛹蟲草子座的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 蛹蟲草為子囊菌亞門，麥角菌目，麥角菌科、蟲草屬的模式種，又名北冬蟲夏草、北 蛹蟲草、蟲草等。世界性分布天然資源數(shù)量很少。由子座（即草部分）與菌核（即蟲的尸體 部分）兩部分組成的復(fù)合體。中醫(yī)認(rèn)為，蟲草入肺腎二經(jīng)，既能補(bǔ)肺陰，又能補(bǔ)腎陽，主治腎 虛，陽瘺遺精，腰膝酸痛，病后虛弱，久咳虛弱，勞咳痰血，自汗盜汗等，是唯一的一種能同時(shí) 平衡、調(diào)節(jié)陰陽的中藥?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，其獨(dú)特的藥理作用源于含有蟲草菌素和蟲草多糖。
[0003] 目前，蛹蟲草已在人工條件下育成了完整子座。通常采用兩種方法，一種是在滅菌 處理后的大米（玉米、小麥、青稞等）為主料的固體培養(yǎng)基上（有時(shí)添加營(yíng)養(yǎng)液）接種培養(yǎng) 單一的蛹蟲草子座（子實(shí)體）；另一種是接種活體蠶蛹幼體培養(yǎng)帶蟲體的子座，其過程是蠶 蛹接種后蟲草菌絲體向蟲體內(nèi)蔓延，于是蛹蟲就會(huì)被真菌感染，分解蛹體內(nèi)的組織，以蛹體 內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)作為其生長(zhǎng)發(fā)育的物質(zhì)和能量來源，最后將蛹體內(nèi)部完全分解，當(dāng)蛹蟲草的菌絲 把蛹體內(nèi)的各種組織和器官分解完畢后，菌絲體由營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)開始轉(zhuǎn)為生殖生長(zhǎng)，最后扭結(jié) 后從蛹體空殼的頭部、胸部、近尾部等處伸出，形成橘黃色或橘紅色的頂部略膨大的呈棒狀 的子座（子實(shí)體）。
[0004] 上述兩種生產(chǎn)工藝存在如下缺陷：
[0005] 1、生產(chǎn)周期長(zhǎng)，能耗大。栽培周期一般40-50天；
[0006] 2、由于大米等原料來源廣泛，品質(zhì)難控制，被環(huán)境污染的原料生產(chǎn)蟲草子座往往 存在諸多食品安全隱患（如農(nóng)藥殘留、重金屬、微生物超標(biāo)等）；而蟲體蟲草又存在受季節(jié) 限制（只有產(chǎn)蠶蛹的春季和秋季可以生產(chǎn)）、接種污染率高、成品得率低等問題。
[0007] 3、固體培養(yǎng)基中添加各種配方的營(yíng)養(yǎng)液雖然可以促進(jìn)蛹蟲草的生長(zhǎng)，但同時(shí)，營(yíng) 養(yǎng)液多元化學(xué)組分的隨意添加也增加了外源藥物性污染的幾率，會(huì)直接影響蟲草有效物質(zhì) 成分（如，蟲草素等）的品質(zhì)。目前，我家尚未頒布統(tǒng)一的蛹蟲草質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。以蟲草素 指標(biāo)為例，在天津、浙江、廣東等省市出臺(tái)的地方標(biāo)準(zhǔn)中，僅對(duì)蟲草素的總含量有要求，而蟲 草素的測(cè)定是通過腺苷及其類似物的含量（高效液相色譜法）確定的。在沒有明確規(guī)范 要求下，人們通過添加腺嘌呤、腺苷等前體物質(zhì)，甚至添加鏈霉素和激素類物質(zhì)（如秋水仙 素、0 _蛻皮激素）等外源性藥物可明顯提高產(chǎn)品蟲草素的檢測(cè)結(jié)果，但盡管很多前體及營(yíng) 養(yǎng)物質(zhì)能增加蟲草素的產(chǎn)量，但目前對(duì)它們的作用機(jī)制研宄的不夠深入，以腺嘌呤為例，它 是蟲草素的前體物質(zhì)，添加后是否是因?yàn)榧?xì)胞攝入量增加，從而提高蟲草素合成原料的含 量增加產(chǎn)率還有待研宄。因此，這種盲目添加外源物質(zhì)成分的做法潛在危險(xiǎn)性很大。
[0008] 目前，國(guó)內(nèi)關(guān)于蛹蟲草培育方面的授權(quán)專利和公開申請(qǐng)技術(shù)較多，但大多數(shù)都是 采用固體培養(yǎng)基（玉米、小麥、青稞等）或者活體蠶蛹接種培養(yǎng)的方法，比如，郭素萍等在 "一種北蟲草培育新方法"（申請(qǐng)?zhí)枺?01310311996. 3)中采用液體菌種接種固體培育栽培 盒培養(yǎng)基，經(jīng)過菌絲培養(yǎng)、轉(zhuǎn)色和出草管理生產(chǎn)北蟲草子座。鄒玉華在"一種富硒北冬蟲夏 草的培育方法"（申請(qǐng)?zhí)枺?00710010750. 7)中，通過在大米培養(yǎng)基中添加微量硒元素生產(chǎn) 富硒蛹蟲草。劉彥君等在"綠色北蟲草產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)方法"（申請(qǐng)?zhí)枺?01410079301.8)中，以 小麥、大米等為主要原料，用可以重復(fù)利用的塑料盆立體周年栽培綠色北蟲草。貴州大學(xué)康 冀川等在"提高蛹蟲草固體培養(yǎng)基中蟲草菌素含量的方法"（申請(qǐng)?zhí)?：200810068949.X)中， 通過將大米粒度為20目和14目按照1:2質(zhì)量比配合做培養(yǎng)基，添加特制的營(yíng)養(yǎng)液，按照傳 統(tǒng)固體發(fā)酵方法對(duì)蛹蟲草進(jìn)行培養(yǎng)，子座長(zhǎng)出后增加光照強(qiáng)度和時(shí)間，可以大幅提高蟲草 素含量。值得一提的是，陳國(guó)卿等在申請(qǐng)?zhí)枮?3105056. 1的發(fā)明專利"北冬蟲夏草菌人工 栽培子實(shí)體的方法"中，提到了將北冬蟲夏草接種液體培養(yǎng)基經(jīng)過培養(yǎng)可得到子實(shí)體的方 法，但是，在權(quán)利要求和實(shí)例說明中卻沒有進(jìn)一步提供具體的技術(shù)工藝、控制參數(shù)和生產(chǎn)效 果，可以理解為
【發(fā)明者】只是給出了液體培養(yǎng)蛹蟲草子實(shí)體的概念，并沒有具體的生產(chǎn)技術(shù) 和方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明的目的在于提供一種生長(zhǎng)周期短、條件易于控制的液體培育蛹蟲草子座的 方法，所制備的蛹蟲草子座有效成分含量高。
[0010] 本發(fā)明的整體技術(shù)構(gòu)思是：
[0011] -種液體培育蛹蟲草子座的方法，是將蛹蟲草（Cordycepsmilitaris)菌種接種 到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；包括以下步驟：
[0012] A、菌絲體的培養(yǎng)
[0013] 培養(yǎng)基采用如下原料配制：
[0014] 馬鈴薯220-250克；葡萄糖10-20克；磷酸二氫鉀0. 5-1克；硫酸鎂0. 5-1克； 維生素&20毫克；氯化鈉1. 5-1. 8克；蛋白胨3-4. 5克；水1000ml;占發(fā)酵培養(yǎng)基體積 30% -50%的顆粒狀附著物；pH= 7. 5 ;
[0015] 培養(yǎng)條件如下：
[0016] 溫度為21°C_27°C靜置48-72小時(shí)，在轉(zhuǎn)速為100-150rpm、溫度為21°C_27°C條件 下培養(yǎng)4-6天；
[0017]B、子實(shí)體的培養(yǎng)
[0018] Bl、后熟期
[0019] 培養(yǎng)條件如下：
[0020] 15°C_20°C靜置，環(huán)境濕度65% -75%，暗培養(yǎng)5-7天，待發(fā)酵液表層菌絲二次生長(zhǎng) 到完全覆蓋培養(yǎng)基表面后，移入培養(yǎng)室弱光轉(zhuǎn)色；
[0021] B2、逆境催蕾期
[0022] 環(huán)境空氣濕度90%以上，溫度20°C-24°C，光照強(qiáng)度50Lux-150Lux，1-2天后菌絲 開始轉(zhuǎn)為淡黃色，保持光照強(qiáng)度l〇〇LuX-550LuX，二氧化碳濃度小于0. 1 %，經(jīng)過5-7天出現(xiàn) 原基；
[0023] B3、生長(zhǎng)期
[0024] 當(dāng)原基分化為蟲草子座的形狀并生長(zhǎng)到l-2cm時(shí)保持光照強(qiáng)度為50Lux-100Lux， 溫度為10°c-22°c，空氣濕度不低于70%，二氧化碳濃度小于0. 1%，生長(zhǎng)調(diào)控10天左右， 生長(zhǎng)周期為30-35天；
[0025] 生產(chǎn)菌種選用CGMCCNo. 5. 856或ACCC51762中的一種。
[0026] 本發(fā)明的具體技術(shù)條件和工藝步驟還有：
[0027] 為從發(fā)酵液中得到需要的效用物質(zhì)，可以采用在培養(yǎng)基中添加微量元素的方法， 其中較為優(yōu)選的技術(shù)方案是，步驟A中的發(fā)酵培養(yǎng)基還包含有如下原料：
[0028] 亞砸酸納 40mg-50mg/1000ml。
[0029] 通過上述方法，可以在確保食品安全的前提下，提高發(fā)酵液中的硒元素的含量。
[0030] 顆粒狀附著物的作用是滿足蟲草子座生長(zhǎng)需要的物理支撐條件，可以采用多種現(xiàn) 有的材料，其中較為優(yōu)選的技術(shù)方案是，步驟A中顆粒狀附著物選用濾料陶粒。
[0031] 更為優(yōu)選的技術(shù)方案是，所述的濾料陶粒直徑0. 5-2. 0mm，堆積密度1250kg/m3。
[0032] 為滿足蟲草子座的生產(chǎn)需要，優(yōu)選的技術(shù)方案是，步驟B2中的每天光照時(shí)間累計(jì) 不小于10小時(shí)。白天可以利用自然的散射光，夜晚可以酌情利用日光燈補(bǔ)充光照2-4小 時(shí)，在此期間可加大通風(fēng)促進(jìn)子座原基發(fā)育。
[0033] 所述的步驟B3中每天光照時(shí)間累計(jì)不小于8小時(shí)，在此期間可采用自然通風(fēng)增 氧。
[0034] 本發(fā)明所取得的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著地技術(shù)進(jìn)步在于：
[0035] 1、生產(chǎn)周期縮短，較傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法生產(chǎn)周期縮短10-15天。
[0036] 2、通過液體發(fā)酵的生長(zhǎng)代謝轉(zhuǎn)化作用可以提高前體物質(zhì)的細(xì)胞攝入量，從而可以 通過單因子調(diào)控液體培養(yǎng)基配方的方法，在確保食品安全的前提下，提高蛹蟲草子座有效 成分含量，尤其是蟲草素、有益微量元素等，品質(zhì)有保障，經(jīng)檢測(cè)，有效成份蟲草素較傳統(tǒng)方 法培養(yǎng)的產(chǎn)品提高4倍以上。
[0037] 3、生長(zhǎng)條件易于控制，便于工業(yè)化生產(chǎn)。

【具體實(shí)施方式】
[0038] 以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述，但不作為對(duì)本發(fā)明的限定，本發(fā)明的保 護(hù)范圍以權(quán)利要求記載的內(nèi)容為準(zhǔn)，任何依據(jù)說明書所做出的等效技術(shù)手段替換，均不脫 離本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0039] 實(shí)施例1
[0040] -種液體培育蛹蟲草子座的方法，是將蛹蟲草（Cordycepsmilitaris)菌種接種 到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；包括以下步驟：
[0041] A、菌絲體的培養(yǎng)
[0042] 培養(yǎng)基采用如下原料配制：
[0043] 馬鈴薯220克；葡萄糖10克；磷酸二氫鉀0. 5克；硫酸鎂0. 5克；維生素&20毫 克；氯化鈉1. 5克；蛋白胨3克；水IOOOml;占發(fā)酵培養(yǎng)基體積30%的顆粒狀附著物；pH= 7. 5 ；
[0044] 培養(yǎng)條件如下：
[0045] 溫度為21°C靜置48小時(shí)，在轉(zhuǎn)速為100rpm、21°C條件下培養(yǎng)4天；
[0046] B、子實(shí)體的培養(yǎng)
[0047] Bl、后熟期
[0048] 培養(yǎng)條件如下：
[0049] 環(huán)境濕度65%，15°C靜置暗培養(yǎng)5天，待發(fā)酵液表層菌絲二次生長(zhǎng)到完全覆蓋培 養(yǎng)基表面后，移入培養(yǎng)室弱光轉(zhuǎn)色；
[0050] B2、逆境催蕾期
[0051] 環(huán)境空氣濕度90%以上，溫度20°C，光照強(qiáng)度50Lux-150Lux，1-2天后菌絲開始轉(zhuǎn) 為淡黃色，保持光照強(qiáng)度100LuX-500LuX，二氧化碳濃度小于0. 1 %，經(jīng)過5-7天出現(xiàn)原基；
[0052] B3、生長(zhǎng)期
[0053] 當(dāng)原基分化為蟲草子座的形狀并生長(zhǎng)到l-2cm時(shí)保持光照強(qiáng)度為50Lux，溫度為 l〇°C，空氣濕度不低于70%，二氧化碳濃度小于0. 1%，生長(zhǎng)調(diào)控10天左右，生長(zhǎng)周期為 30-35 天；
[0054] 生產(chǎn)菌種選用CGMCCNo. 5. 856。
[0055] 步驟A中的發(fā)酵培養(yǎng)基還包含有如下原料：
[0056] 亞硒酸鈉 40mg/1000ml。
[0057] 步驟A中顆粒狀附著物選用濾料陶粒，所述的濾料陶粒直徑0. 5-2. 0mm，堆積密度 1250kg/m3〇
[0058] 步驟B2中的每天光照時(shí)間累計(jì)不小于10小時(shí)。白天可以利用自然的散射光，夜 晚可以酌情利用日光燈補(bǔ)充光照2-4小時(shí)，在此期間可加大通風(fēng)促進(jìn)子座原基發(fā)育。
[0059] 所述的步驟B3中每天光照時(shí)間累計(jì)不小于8小時(shí)，在此期間可采用自然通風(fēng)增 氧。
[0060] 實(shí)施例2
[0061] 本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別在于：
[0062] A、菌絲體的培養(yǎng)
[0063] 培養(yǎng)基采用如下原料配制：
[0064] 馬鈴薯250克；葡萄糖20克；磷酸二氫鉀1克；硫酸鎂1克；維生素&20毫克；氯化 鈉1. 8克；蛋白胨4. 5克；水IOOOml;占發(fā)酵培養(yǎng)基體積50%的顆粒狀附著物；pH= 7. 5 ;
[0065] 培養(yǎng)條件如下：
[0066] 溫度為27°C靜置72小時(shí)，在轉(zhuǎn)速為150rpm、溫度為27°C條件下培養(yǎng)6天；
[0067] B、子實(shí)體的培養(yǎng)
[0068] Bl、后熟期
[0069] 培養(yǎng)條件如下：
[0070] 環(huán)境濕度75 %，20°C靜置暗培養(yǎng)7天，待發(fā)酵液表層菌絲二次生長(zhǎng)到完全覆蓋培 養(yǎng)基表面后，移入培養(yǎng)室弱光轉(zhuǎn)色；
[0071] B2、逆境催蕾期
[0072] 環(huán)境空氣濕度90%以上，溫度24°C，光照強(qiáng)度50Lux-150Lux，1-2天后菌絲開始轉(zhuǎn) 為淡黃色，保持光照強(qiáng)度100LuX-550LuX，二氧化碳濃度小于0. 1 %，經(jīng)過5-7天出現(xiàn)原基；
[0073] B3、生長(zhǎng)期
[0074] 當(dāng)原基分化為蟲草子座的形狀并生長(zhǎng)到l-2cm時(shí)保持光照強(qiáng)度為50LuX-100LuX， 溫度為22°C，空氣濕度不低于70 %，二氧化碳濃度小于0. 1 %，生長(zhǎng)調(diào)控10天左右，生長(zhǎng)周 期為30-35天；
[0075] 生產(chǎn)菌種選用ACCC51762中的一種。
[0076] 步驟A中的發(fā)酵培養(yǎng)基還包含有如下原料：
[0077] 亞硒酸鈉 50mg/1000ml。
[0078] 實(shí)施例3
[0079] 本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別在于：
[0080] -種液體培育蛹蟲草子座的方法，是將蛹蟲草（Cordycepsmilitaris)菌種接種 到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；包括以下步驟：
[0081] A、菌絲體的培養(yǎng)
[0082] 培養(yǎng)基采用如下原料配制：
[0083] 馬鈴薯230克；葡萄糖150克；磷酸二氫鉀0. 8克；硫酸鎂0. 8克；維生素&20毫 克；氯化鈉1. 7克；蛋白胨4克；水IOOOml;占發(fā)酵培養(yǎng)基體積40%的顆粒狀附著物；pH= 7. 5 ；
[0084]培養(yǎng)條件如下：
[0085] 溫度為24°C靜置60小時(shí)，在轉(zhuǎn)速為130rpm、溫度為24°C條件下培養(yǎng)5天；
[0086]B、子實(shí)體的培養(yǎng)
[0087] Bl、后熟期
[0088] 培養(yǎng)條件如下：
[0089] 環(huán)境濕度65% -75%，18°C靜置暗培養(yǎng)5-7天，待發(fā)酵液表層菌絲二次生長(zhǎng)到完全 覆蓋培養(yǎng)基表面后，移入培養(yǎng)室弱光轉(zhuǎn)色；
[0090] B2、逆境催蕾期
[0091]環(huán)境空氣濕度90%以上，溫度22°C，光照強(qiáng)度50Lux-150Lux，1-2天后菌絲開始轉(zhuǎn) 為淡黃色，保持光照強(qiáng)度100LuX-550LuX，二氧化碳濃度小于0. 1 %，經(jīng)過5-7天出現(xiàn)原基；
[0092] B3、生長(zhǎng)期
[0093] 當(dāng)原基分化為蟲草子座的形狀并生長(zhǎng)到l-2cm時(shí)保持光照強(qiáng)度為50Lux-100Lux， 溫度為16°C，空氣濕度不低于70%，二氧化碳濃度小于0. 1%，生長(zhǎng)調(diào)控10天左右，生長(zhǎng)周 期為30-35天；
[0094] 生產(chǎn)菌種選用CGMCCNo. 5. 856。
[0095] 步驟A中的發(fā)酵培養(yǎng)基還包含有如下原料：
[0096] 亞硒酸鈉 45mg/1000ml。
[0097] 實(shí)施例4
[0098] 本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別在于：
[0099] -種液體培育蛹蟲草子座的方法，是將蛹蟲草（Cordycepsmilitaris)菌種接種 到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；包括以下步驟：
[0100] A、菌絲體的培養(yǎng)
[0101] 培養(yǎng)基采用如下原料配制：
[0102] 馬鈴薯230克；葡萄糖18克；磷酸二氫鉀0. 6克；硫酸鎂0. 8克；維生素&20毫 克；氯化鈉1. 7克；蛋白胨4. 2克；水IOOOml;占發(fā)酵培養(yǎng)基體積45%的顆粒狀附著物；pH =7. 5 ；
[0103] 培養(yǎng)條件如下：
[0104]溫度為26°C靜置70小時(shí)，在轉(zhuǎn)速為140rpm、溫度為26°C條件下培養(yǎng)5天；
[0105]B、子實(shí)體的培養(yǎng)
[0106]BI、后熟期
[0107] 培養(yǎng)條件如下：
[0108] 環(huán)境濕度72%，18°C靜置暗培養(yǎng)5-7天，待發(fā)酵液表層菌絲二次生長(zhǎng)到完全覆蓋 培養(yǎng)基表面后，移入培養(yǎng)室弱光轉(zhuǎn)色；
[0109] B2、逆境催蕾期
[0110] 環(huán)境空氣濕度90%以上，溫度23°C，光照強(qiáng)度50Lux-150Lux，1-2天后菌絲開始轉(zhuǎn) 為淡黃色，保持光照強(qiáng)度100LuX-550LuX，二氧化碳濃度小于0. 1 %，經(jīng)過5-7天出現(xiàn)原基；
[0111] B3、生長(zhǎng)期
[0112] 當(dāng)原基分化為蟲草子座的形狀并生長(zhǎng)到l-2cm時(shí)保持光照強(qiáng)度為50LUX-100Lux， 溫度為10°c-22°c，空氣濕度不低于70%，二氧化碳濃度小于0. 1%，生長(zhǎng)調(diào)控10天左右， 生長(zhǎng)周期為30-35天；
[0113] 生產(chǎn)菌種選用ACCC51762中的一種。
[0114] 步驟A中的發(fā)酵培養(yǎng)基還包含有如下原料：
[0115] 亞硒酸鈉 48mg/1000ml。
[0116] 實(shí)施例5
[0117] 本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別在于：
[0118] -種液體培育蛹蟲草子座的方法，是將蛹蟲草（Cordycepsmilitaris)菌種接種 到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；包括以下步驟：
[0119] A、菌絲體的培養(yǎng)
[0120] 培養(yǎng)基采用如下原料配制：
[0121] 馬鈴薯240克；葡萄糖12克；磷酸二氫鉀0. 6克；硫酸鎂0. 9克；維生素&20毫 克；氯化鈉1. 7克；蛋白胨3. 8克；水IOOOml;占發(fā)酵培養(yǎng)基體積35%的顆粒狀附著物；pH =7. 5 ；
[0122] 培養(yǎng)條件如下：
[0123] 溫度為26°C靜置60小時(shí)，在轉(zhuǎn)速為130rpm、溫度為24°C條件下培養(yǎng)5天；
[0124] B、子實(shí)體的培養(yǎng)
[0125] Bl、后熟期
[0126] 培養(yǎng)條件如下：
[0127] 環(huán)境濕度70%，16°C靜置暗培養(yǎng)6天，待發(fā)酵液表層菌絲二次生長(zhǎng)到完全覆蓋培 養(yǎng)基表面后，移入培養(yǎng)室弱光轉(zhuǎn)色；
[0128] B2、逆境催蕾期
[0129] 環(huán)境空氣濕度90%以上，溫度23°C，光照強(qiáng)度50Lux-150Lux，1-2天后菌絲開始轉(zhuǎn) 為淡黃色，保持光照強(qiáng)度100LuX-550LuX，二氧化碳濃度小于0. 1 %，經(jīng)過5-7天出現(xiàn)原基；
[0130] B3、生長(zhǎng)期
[0131] 當(dāng)原基分化為蟲草子座的形狀并生長(zhǎng)到l-2cm時(shí)保持光照強(qiáng)度為50LUX-100Lux， 溫度為20°C，空氣濕度不低于70%，二氧化碳濃度小于0. 1 %，生長(zhǎng)調(diào)控10天左右，生長(zhǎng)周 期為30-35天；
[0132] 生產(chǎn)菌種選用CGMCCNo. 5. 856。
[0133] 申請(qǐng)人:委托上海農(nóng)業(yè)科學(xué)院.上海科立特農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)技術(shù)服務(wù)有限公司對(duì)利用 本發(fā)明中公開的方法所制備的蟲草進(jìn)行了檢測(cè)，檢測(cè)依據(jù)為中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) NY/T2116-2012 (蟲草制品中蟲草素和腺苷的測(cè)定高效液相色譜法），結(jié)果如下。
[0134]

【權(quán)利要求】
1. 一種液體培育蛹蟲草子座的方法，是將蛹蟲草（Cordyceps militaris)菌種接種到 培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；其特征在于包括以下步驟： A、 菌絲體的培養(yǎng) 培養(yǎng)基采用如下原料配制： 馬鈴薯220-250克；葡萄糖10-20克；磷酸二氫鉀0. 5-1克；硫酸鎂0. 5-1克；維生素 BP0毫克；氯化鈉1. 5-1. 8克；蛋白胨3-4. 5克；水1000ml ;占發(fā)酵培養(yǎng)基體積30% -50% 的顆粒狀附著物；pH = 7. 5 ; 培養(yǎng)條件如下： 溫度為21°C _27°C靜置48-72小時(shí)，在轉(zhuǎn)速為100-150rpm、溫度為21°C _27°C條件下培 養(yǎng)4-6天； B、 子實(shí)體的培養(yǎng) B1、后熟期 培養(yǎng)條件如下： 15°C _20°C靜置，環(huán)境濕度65% -75%，暗培養(yǎng)5-7天，待發(fā)酵液表層菌絲二次生長(zhǎng)到完 全覆蓋培養(yǎng)基表面后，移入培養(yǎng)室弱光轉(zhuǎn)色； B2、逆境催蕾期 環(huán)境空氣濕度90%以上，溫度20°C -24°C，光照強(qiáng)度50Lux-150Lux，1-2天后菌絲開始 轉(zhuǎn)為淡黃色，保持光照強(qiáng)度l〇〇LuX-550LuX，二氧化碳濃度小于0. 1%，經(jīng)過5-7天出現(xiàn)原 基； B3、生長(zhǎng)期 當(dāng)原基分化為蟲草子座的形狀并生長(zhǎng)到l-2cm時(shí)保持光照強(qiáng)度為50LuX-100LuX，溫度 為10°C -22°C，空氣濕度不低于70%，二氧化碳濃度小于0. 1%，生長(zhǎng)周期為30-35天； 生產(chǎn)菌種選用CGMCC No. 5. 856或ACCC51762中的一種。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的液體培育蛹蟲草子座的方法，其特征在于所述的步驟A中的 發(fā)酵培養(yǎng)基還包含有如下原料： 亞砸酸納 40mg-50mg/1000ml。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的液體培育蛹蟲草子座的方法，其特征在于所述的步驟A中顆 粒狀附著物選用濾料陶粒。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的液體培育蛹蟲草子座的方法，其特征在于所述的濾料陶粒直 徑 0. 5-2. 0mm，堆積密度 1250kg/m3。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的液體培育蛹蟲草子座的方法，其特征在于所述的步驟B2中的 每天光照時(shí)間累計(jì)不小于10小時(shí)。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的液體培育蛹蟲草子座的方法，其特征在于所述的步驟B3中每 天光照時(shí)間累計(jì)不小于8小時(shí)。
【文檔編號(hào)】A01G1/04GK104472208SQ201410632217
【公開日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年11月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月11日
【發(fā)明者】冀宏 申請(qǐng)人:冀宏