一種松杉靈芝菌種的栽培方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種松杉靈芝菌種的栽培方法，具體涉及真菌的培養(yǎng)和加工的【技術(shù)領(lǐng)域】，該方法包括制作母種、制作原種、接種栽培、出芝管理四個(gè)步驟。本發(fā)明制備松杉靈芝菌種活性成分高，抗腫瘤功能好，具有很好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，本發(fā)明是一種經(jīng)濟(jì)實(shí)用、成本低、效果好的培養(yǎng)方法；以糧食類原料為主的培養(yǎng)料，添加腐殖酸減少土壤的重金屬對(duì)菌種的毒害，采用模擬野生松杉靈芝的生長(zhǎng)環(huán)境技術(shù)，提高了松杉靈芝的產(chǎn)量和品質(zhì)，在松杉靈芝產(chǎn)品安全性上有了保證。有利于傳統(tǒng)中藥松杉靈芝產(chǎn)品走向標(biāo)準(zhǔn)化、產(chǎn)業(yè)化、國(guó)際化的道路；使得松杉靈芝品質(zhì)、有效成分含量上得到顯著提高，取得良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
【專利說明】一種松杉靈芝菌種的栽培方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于真菌的培養(yǎng)和加工的【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其是涉及一種松杉靈芝菌種的栽培方法。

【背景技術(shù)】
[0002]松杉靈芝收錄在我國(guó)中藥藥典中，與赤芝、紫芝一起被廣泛應(yīng)用于抗腫瘤藥品及保健食品當(dāng)中。經(jīng)過多年的波動(dòng)式發(fā)展，松杉靈芝已經(jīng)從單向出口發(fā)展到多種加工產(chǎn)品內(nèi)外銷售的局面。而野生松杉靈芝由于其獨(dú)特的生長(zhǎng)環(huán)境、綠色安全的傳統(tǒng)觀念受到人們的追捧，而價(jià)格也一直居高不下。目前，關(guān)于松杉靈芝的專利申請(qǐng)主要是關(guān)于松杉靈芝的提取、多糖制備、子實(shí)體分子標(biāo)記或已有菌種的栽培方法。采用木段、玉米芯、棉子殼、雜草為原料生產(chǎn)的松杉靈芝，其品質(zhì)往往參差不齊，有效成分各不相同。用純棉籽殼種植產(chǎn)量偏低、藥性下降，而用雜草、中藥渣做為原料生產(chǎn)靈芝安全性不穩(wěn)定。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的問題是提供一種松杉靈芝菌種的栽培方法，該方法制備的松杉靈芝菌種活性成分高，抗腫瘤功能好，具有很好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，提高了松杉靈芝的產(chǎn)量和品質(zhì)，為松杉靈芝產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供了新途徑。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
[0005]一種松杉靈芝菌種的栽培方法，包括以下步驟:
[0006](I)制作母種:采集組織分離的菌種松杉靈芝，將菌種接至經(jīng)過消毒的短椴木空穴內(nèi)，置于30°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿短椴木空穴即得生產(chǎn)母種，其中所述短椴木空穴上培養(yǎng)基的的配方按質(zhì)量百分比計(jì)為破碎的小麥20-30份、小麥麩皮2-5份、瓊脂2-5份、碳酸鈣0.3-0.7份、乳酸鈣0.4-0.6份、硫酸鎂0.15-0.25份、維生素0.01-0.03份、腐殖酸0.10-0.15份，含水量55-60% ；
[0007](2)制作原種:將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種，其中原種袋的培養(yǎng)基原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為小麥麩皮70-75份、高粱糠15-20份、碳酸鈣2-4份、黃芪提取液0.01-0.03份、當(dāng)歸提取液0.01-0.04份，含水量55-60% ；
[0008](3)接種栽培:將原種無菌接入栽培料袋中，在25°C培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)至菌絲完成后熟期，隔一天進(jìn)行一次頻率為15MHz的高壓脈沖直流電放電，模擬森林環(huán)境中的自然雷電，促進(jìn)菌種的增長(zhǎng)，其中栽培料的培養(yǎng)基原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為木肩68-72份、高粱糠20-24份、碳酸鈣2_5份，腐殖酸0.1-0.3份，含水量60-65% ；
[0009](4)出芝管理:調(diào)節(jié)溫度為25 °C、濕度85-90 %、閃光頻率為1HZ的光照100-2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，閃光頻率為100HZ的光照400_5001ux，通氣，保持0)2含量小于1200ppm，至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘孢子，從而得到孢子、新鮮子實(shí)體，干燥后可得到干燥的子實(shí)體以及松杉靈芝菌絲體。
[0010]所述步驟(2)中黃芪提取液、當(dāng)歸提取液為利用粉碎以后的黃芪、當(dāng)歸，經(jīng)過高溫、高壓提取成含生藥重量組分為10%的提取液體。
[0011]所述步驟(3)中的培養(yǎng)室的空氣相對(duì)濕度為60-70%。
[0012]本發(fā)明制備松杉靈芝菌種活性成分高，抗腫瘤功能好，具有很好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，本發(fā)明是一種經(jīng)濟(jì)實(shí)用、成本低、效果好的培養(yǎng)方法；以糧食類原料為主的培養(yǎng)料，添加腐殖酸減少土壤的重金屬對(duì)菌種的毒害，采用模擬野生松杉靈芝的生長(zhǎng)環(huán)境技術(shù)，提高了松杉靈芝的產(chǎn)量和品質(zhì)，從根本上解決松杉靈芝生產(chǎn)與林業(yè)生態(tài)平衡之間的矛盾，也為松杉靈芝產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供了新途徑；在松杉靈芝產(chǎn)品安全性上有了保證。有利于傳統(tǒng)中藥松杉靈芝產(chǎn)品走向標(biāo)準(zhǔn)化、產(chǎn)業(yè)化、國(guó)際化的道路；使得松杉靈芝品質(zhì)、有效成分含量上得到顯著提高，取得良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

【具體實(shí)施方式】
[0013]實(shí)施例1
[0014]一種松杉靈芝菌種的栽培方法，包括以下步驟:
[0015](I)制作母種:采集組織分離的菌種松杉靈芝，將菌種接至經(jīng)過消毒的短椴木空穴內(nèi)，置于30°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿短椴木空穴即得生產(chǎn)母種，其中所述短椴木空穴上培養(yǎng)基的的配方為:破碎的小麥20kg、小麥麩皮5kg、瓊脂2kg、碳酸1? 0.3kg、乳酸鈣0.4kg、硫酸鎂0.15kg、維生素0.01kg、腐殖酸0.10kg，其余為水，含水量55-60% ；
[0016](2)制作原種:將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種，其中原種袋的培養(yǎng)基原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為小麥麩皮70kg、高粱糠20kg、碳酸鈣2kg、重量組分為10%的黃芪提取液0.00lkg、重量組分為10%當(dāng)歸提取液0.001kg，含水量55-60% ;其中，黃芪提取液、當(dāng)歸提取液為利用粉碎以后的黃芪、當(dāng)歸，經(jīng)過高溫、高壓提取成含生藥重量組分為10%的提取液體。
[0017](3)接種栽培:將原種無菌接入栽培料袋中，在25°C培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)至菌絲完成后熟期，隔一天進(jìn)行一次頻率為15MHz的高壓脈沖直流電放電，模擬森林環(huán)境中的自然雷電，促進(jìn)菌種的增長(zhǎng)，其中栽培料的培養(yǎng)基原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為木肩68kg、高粱糠24kg、碳酸1? 2kg，腐殖酸0.1kg，含水量60%，培養(yǎng)室的空氣相對(duì)濕度控制為60-70% ；
[0018](4)出芝管理:調(diào)節(jié)溫度為25 °C、濕度85-90 %、閃光頻率為1HZ的光照100-2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，閃光頻率為100HZ的光照400_5001ux，通氣，保持0)2含量小于1200ppm，至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘孢子，在菌柄0.5-lcm處割取，千萬不可連菌皮一起拔掉，以免引進(jìn)蟲害病害蔓延，得到孢子、新鮮子實(shí)體后放入烘干機(jī)干燥，含水量達(dá)到10%，可得到子實(shí)體總重量為9.8kg，得到松杉靈芝菌絲體57kg。
[0019]實(shí)施例2
[0020]一種松杉靈芝菌種的栽培方法，包括以下步驟:
[0021](I)制作母種:采集組織分離的菌種松杉靈芝，將菌種接至經(jīng)過消毒的短椴木空穴內(nèi)，置于30°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿短椴木空穴即得生產(chǎn)母種，其中所述短椴木空穴上培養(yǎng)基的的配方按質(zhì)量百分比計(jì)為破碎的小麥25kg、小麥麩皮3kg、瓊脂4kg、碳酸1? 0.5kg、乳酸1? 0.5kg、硫酸鎂0.20kg、維生素0.02kg、腐殖酸0.13kg，含水量55-60% ；
[0022](2)制作原種:將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種，其中原種袋的培養(yǎng)基原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為小麥麩皮72kg、高粱糠17kg、碳酸鈣3kg、重量組分為10%的黃芪提取液0.002kg、重量組分為10%的當(dāng)歸提取液0.003kg，含水量55-60% ；
[0023](3)接種栽培:將原種無菌接入栽培料袋中，在25°C培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)至菌絲完成后熟期，隔一天進(jìn)行一次頻率為15MHz的高壓脈沖直流電放電，模擬森林環(huán)境中的自然雷電，促進(jìn)菌種的增長(zhǎng)，其中栽培料的培養(yǎng)基原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為木肩70kg、高粱糠23kg、碳酸1? 3kg，腐殖酸0.2kg，含水量60-65%，培養(yǎng)室的空氣相對(duì)濕度控制為60-70% ；
[0024](4)出芝管理:調(diào)節(jié)溫度為25 °C、濕度85-90 %、閃光頻率為1HZ的光照100-2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，閃光頻率為100HZ的光照400_5001ux，通氣，保持0)2含量小于1200ppm，至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘孢子，在菌柄0.5-lcm處割取，千萬不可連菌皮一起拔掉，以免引進(jìn)蟲害病害蔓延，得到孢子、新鮮子實(shí)體后放入烘干機(jī)干燥，含水量達(dá)到10%，可得到子實(shí)體總重量為9.5kg，得到松杉靈芝菌絲體55kg。
[0025]實(shí)施例3
[0026]一種松杉靈芝菌種的栽培方法，包括以下步驟:
[0027](I)制作母種:采集組織分離的菌種松杉靈芝，將菌種接至經(jīng)過消毒的短椴木空穴內(nèi)，置于30°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿短椴木空穴即得生產(chǎn)母種，其中所述短椴木空穴上培養(yǎng)基的的配方按質(zhì)量百分比計(jì)為破碎的小麥30kg、小麥麩皮5kg、瓊脂5kg、碳酸1? 0.7kg、乳酸1? 0.6kg、硫酸鎂0.25kg、維生素0.03kg、腐殖酸0.15kg，含水量55-60% ；
[0028](2)制作原種:將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種，其中原種袋的培養(yǎng)基原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為小麥麩皮75kg、高粱糠20kg、碳酸鈣4kg、黃芪提取液0.03kg、重量組分為10%的當(dāng)歸提取液0.04kg，含水量 55-60kg ；
[0029](3)接種栽培:將原種無菌接入栽培料袋中，在25°C培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)至菌絲完成后熟期，隔一天進(jìn)行一次頻率為15MHz的高壓脈沖直流電放電，模擬森林環(huán)境中的自然雷電，促進(jìn)菌種的增長(zhǎng)，其中栽培料的培養(yǎng)基原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為木肩72kg、高粱糠22kg、碳酸1? 5kg，腐殖酸0.3kg，含水量60-65%，培養(yǎng)室的空氣相對(duì)濕度控制為60-70% ；
[0030](4)出芝管理:調(diào)節(jié)溫度為25 °C、濕度85-90 %、閃光頻率為1HZ的光照100-2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，閃光頻率為100HZ的光照400_5001ux，通氣，保持0)2含量小于1200ppm，至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘孢子，在菌柄0.5-lcm處割取，千萬不可連菌皮一起拔掉，以免引進(jìn)蟲害病害蔓延，得到孢子、新鮮子實(shí)體后放入烘干機(jī)干燥，含水量達(dá)到10%，可得到子實(shí)體總重量為9.7kg，得到松杉靈芝菌絲體60kg。
[0031]以上對(duì)本發(fā)明的三個(gè)實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)說明，但所述內(nèi)容僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，不能被認(rèn)為用于限定本發(fā)明的實(shí)施范圍。凡依本發(fā)明申請(qǐng)范圍所作的均等變化與改進(jìn)等，均應(yīng)仍歸屬于本發(fā)明的專利涵蓋范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種松杉靈芝菌種的栽培方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)制作母種:采集組織分離的菌種松杉靈芝，將菌種接至經(jīng)過消毒的短椴木空穴內(nèi)，置于30°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿短椴木空穴即得生產(chǎn)母種，其中所述短椴木空穴上培養(yǎng)基的的配方按質(zhì)量百分比計(jì)為破碎的小麥20-30份、小麥麩皮2-5份、瓊脂2-5份、碳酸鈣0.3-0.7份、乳酸鈣0.4-0.6份、硫酸鎂0.15-0.25份、維生素0.01-0.03份、腐殖酸0.10-0.15份，含水量55-60% ； (2)制作原種:將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種，其中原種袋的培養(yǎng)基原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為小麥麩皮70-75份、高粱糠15-20份、碳酸鈣2-4份、黃芪提取液0.01-0.03份、當(dāng)歸提取液0.01-0.04份，含水量 55-60% ； (3)接種栽培:將原種無菌接入栽培料袋中，在25°C培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)至菌絲完成后熟期，隔一天進(jìn)行一次頻率為15MHz的高壓脈沖直流電放電，模擬森林環(huán)境中的自然雷電，促進(jìn)菌種的增長(zhǎng)，其中栽培料的培養(yǎng)基原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為木肩68-72份、高粱糠20-24份、碳酸鈣2_5份，腐殖酸0.1-0.3 份，含水量 60-65% ； (4)出芝管理:調(diào)節(jié)溫度為25°C、濕度85-90%、閃光頻率為1HZ的光照100_2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，閃光頻率為100HZ的光照400_5001ux，通氣，保持0)2含量小于1200ppm，至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘孢子，從而得到孢子、新鮮子實(shí)體，干燥后可得到干燥的子實(shí)體以及藥用松杉靈芝菌絲體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種松杉靈芝菌種的栽培方法，其特征在于:所述步驟(2)中黃芪提取液、當(dāng)歸提取液為利用粉碎以后的黃芪、當(dāng)歸，經(jīng)過高溫、高壓提取成含生藥重量組分為10 %的提取液體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種松杉靈芝菌種的栽培方法，其特征在于:所述步驟(3)中的培養(yǎng)室的空氣相對(duì)濕度為60-70%。
【文檔編號(hào)】C05G3/00GK104488551SQ201410789678
【公開日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2014年12月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月18日
【發(fā)明者】季延濱, 李濤 申請(qǐng)人:芝圣（天津）生物科技有限公司