本發(fā)明涉及一種甘薯組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基及其制備方法。
背景技術(shù):
甘薯莖尖脫毒組織培養(yǎng)是指由甘薯的無毒或脫毒的莖尖誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織并再生出植株的過程,此過程主要是在固體培養(yǎng)基上進行,但是傳統(tǒng)的固體培養(yǎng)基的ph值調(diào)節(jié)不便,在使用傳統(tǒng)的固體培養(yǎng)基時,出苗率低,由于莖尖形成愈傷組織的能力差,幼苗生長慢,因而使得培養(yǎng)周期大大延長,增加了生產(chǎn)成本。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明旨在解決現(xiàn)有技術(shù)的不足,而提供一種甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基及其制備方法。
本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的,采用以下技術(shù)方案:一種甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基,其特征在于,由如下重量份數(shù)的原料組成:
作為優(yōu)選,所述母液ⅰ由如下重量份數(shù)的原料組成:
作為優(yōu)選,所述母液ⅱ由如下重量份數(shù)的原料組成:
作為優(yōu)選,所述ph值采用氫氧化鈉和鹽酸進行調(diào)節(jié)。
本發(fā)明提供一種甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)根據(jù)配方分別稱取母液ⅰ和母液ⅱ,并將其混合配制成基礎(chǔ)培養(yǎng)基;
(2)向步驟(1)中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基按配方依次加入甘氨酸、鹽酸硫胺素、肌糖、蔗糖、溴甲酚紫和吲哚-3-乙酸配制成完全培養(yǎng)基;
(3)向步驟(2)中的完全培養(yǎng)基加入瓊脂,并調(diào)整培養(yǎng)基的ph值為5.8;
(4)室溫下對培養(yǎng)基進行攪拌混合,然后進行分裝并進行高壓蒸汽滅菌,其中滅菌條件壓強為103.0kpa,溫度為130℃,反應(yīng)時間為10-15min,高壓蒸汽滅菌后制備得到所需的甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基。
本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明通過添加溴甲酚紫,便于對固體培養(yǎng)基ph值進行調(diào)節(jié),通過添加蔗糖,大大提高了莖尖出苗率,通過加入吲哚-3-乙酸,提高了莖尖形成愈傷組織的能力,幼苗生長快,因而使得培養(yǎng)周期大大縮短,節(jié)約了生產(chǎn)成本。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明:
實施例1
一種甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基,由如下重量份數(shù)的原料組成:
制備方法:以制備甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基為例對本實施例提供的一種甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基的制備方法闡述如下:
(1)根據(jù)配方分別稱取10份硝酸鉀、25份硝酸銨、5份硫酸鎂、3份氯化鈣、0.01份碘化鉀、0.02份硫酸銅、0.4份乙二胺四乙酸二鈉、0.02份氯化鈷、0.2份硫酸亞鐵,并將其混合配制成基礎(chǔ)培養(yǎng)基;
(2)向步驟(1)中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基按配方依次加入3份甘氨酸、0.3份鹽酸硫胺素、50份肌糖、80份蔗糖、1份溴甲酚紫和0.2份吲哚-3-乙酸配制成完全培養(yǎng)基;
(3)向步驟(2)中的完全培養(yǎng)基加入100份瓊脂,并調(diào)整培養(yǎng)基的ph值為5.8;
(4)室溫下對培養(yǎng)基進行攪拌混合后,然后進行分裝并進行高壓蒸汽滅菌,其中滅菌條件壓強為103.0kpa,溫度為130℃,反應(yīng)時間為10min,高壓蒸汽滅菌后制備得到所需的甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基。
實施例2
一種甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基,由如下重量份數(shù)的原料組成:
制備方法:以制備甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基為例對本實施例提供的一種甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基的制備方法闡述如下:
(1)根據(jù)配方分別稱取15份硝酸鉀、30份硝酸銨、8份硫酸鎂、5份氯化鈣、0.03份碘化鉀、0.04份硫酸銅、0.7份乙二胺四乙酸二鈉、0.02份氯化鈷、0.4份硫酸亞鐵,并將其混合配制成基礎(chǔ)培養(yǎng)基;
(2)向步驟(1)中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基按配方依次加入6份甘氨酸、0.5份鹽酸硫胺素、65份肌糖、100份蔗糖、3份溴甲酚紫和0.4份吲哚-3-乙酸配制成完全培養(yǎng)基;
(3)向步驟(2)中的完全培養(yǎng)基加入200份瓊脂,并調(diào)整培養(yǎng)基的ph值為5.8;
(4)室溫下對培養(yǎng)基進行攪拌混合,然后進行分裝并進行高壓蒸汽滅菌,其中滅菌條件壓強為103.0kpa,溫度為130℃,反應(yīng)時間為15min,高壓蒸汽滅菌后制備得到所需的甘薯莖尖脫毒用固體培養(yǎng)基。
上面對本發(fā)明進行了示例性描述,顯然本發(fā)明具體實現(xiàn)并不受上述方式的限制,只要采用了本發(fā)明的方法構(gòu)思和技術(shù)方案進行的各種改進,或未經(jīng)改進直接應(yīng)用于其它場合的,均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。