本發(fā)明涉及殺蟲(chóng)劑開(kāi)發(fā),尤其涉及基于cry4aa和cry11ba的殺蟲(chóng)劑及其應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、蚊蟲(chóng)作為媒介參與瘧疾、登革熱、基孔肯雅熱、腦炎和絲蟲(chóng)病等嚴(yán)重疾病的傳播,對(duì)其防治一直是研究熱點(diǎn)。減少這些疾病傳播的最有效方法之一是控制昆蟲(chóng)媒介,長(zhǎng)期以來(lái),化學(xué)方法是控制蚊蟲(chóng)種群的主要手段,然而蚊蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的抗性問(wèn)題已經(jīng)引起了廣泛關(guān)注。
2、中國(guó)專利cn115725627a公開(kāi)了一種構(gòu)建重組殺蟲(chóng)大腸桿菌以表達(dá)殺蚊毒蛋白的方法,包括以下步驟:以大腸桿菌為宿主菌,將蘇云金芽孢桿菌cry11ba的編碼基因插入到pet-30a載體的bamhi和ndei酶切位點(diǎn)之間得到重組載體,再將重組載體導(dǎo)入宿主菌中,即得。該重組殺蟲(chóng)大腸桿菌可以通過(guò)發(fā)酵罐進(jìn)行大量發(fā)酵,得到乳油,干粉等形式的商業(yè)化可濕性粉劑,對(duì)害蟲(chóng)具有特異性強(qiáng),殺蟲(chóng)效力高的效果,對(duì)環(huán)境,人畜友好;對(duì)疾病傳播媒介中的蚊子具有較高毒性,是野外及城市蚊蟲(chóng)防治的重要生物防治菌株;該菌種生長(zhǎng)能力強(qiáng),制備毒素速度快,蛋白產(chǎn)量高。
3、但是現(xiàn)有技術(shù)中仍缺少蚊蟲(chóng)防治效果更優(yōu)的生物制劑。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供基于cry4aa和cry11ba的殺蟲(chóng)劑及其應(yīng)用,用于蚊蟲(chóng)防治能夠產(chǎn)生高毒性水平。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明提供以下技術(shù)方案:
3、本發(fā)明提供了一種殺蟲(chóng)劑,所述殺蟲(chóng)劑中含有蛋白cry4aa和蛋白cry11ba;
4、所述蛋白cry4aa的氨基酸序列如seq?id?no.1所示;
5、所述蛋白cry11ba的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。
6、本發(fā)明還提供了一種菌株在制備殺蟲(chóng)劑中的應(yīng)用,所述菌株能夠表達(dá)cry4aa基因和cry11ba基因;
7、所述cry4aa基因的核苷酸序列如seq?id?no.3所示;
8、所述cry11ba基因的核苷酸序列如seq?id?no.4所示。
9、優(yōu)選的,所述菌株為蘇云金芽孢桿菌。
10、優(yōu)選的,所述菌株的應(yīng)用濃度在1013cfu/g以上。
11、本發(fā)明還提供了一種殺蟲(chóng)劑,所述殺蟲(chóng)劑中含有能夠表達(dá)cry4aa基因的菌株和能夠表達(dá)cry11ba基因的菌株;
12、所述cry4aa基因的核苷酸序列如seq?id?no.3所示;
13、所述cry11ba基因的核苷酸序列如seq?id?no.4所示。
14、優(yōu)選的,所述菌株為蘇云金芽孢桿菌。
15、優(yōu)選的,所述菌株以粉末菌劑的形式存在于殺蟲(chóng)劑中。
16、優(yōu)選的,所述殺蟲(chóng)劑中菌株的有效活菌濃度在1013cfu/g以上。
17、本發(fā)明還提供了上述殺蟲(chóng)劑在制備滅蚊產(chǎn)品中的應(yīng)用,所述滅蚊產(chǎn)品為殺滅蚊子幼蟲(chóng)的產(chǎn)品。
18、本發(fā)明還提供了上述殺蟲(chóng)劑在制備滅蚊產(chǎn)品中的應(yīng)用,所述滅蚊產(chǎn)品為殺滅蚊子成蟲(chóng)的產(chǎn)品。
19、本發(fā)明的有益效果:
20、本發(fā)明通過(guò)結(jié)合氨基酸序列如seq?id?no.1所示的cry4aa蛋白與seq?id?no.2所示的cry11ba蛋白,利用二者的協(xié)同效應(yīng),成功開(kāi)發(fā)了一種高毒力的生物殺蟲(chóng)劑,有效地增強(qiáng)了對(duì)蚊成蟲(chóng)的殺滅能力,提供一種更為高效的生物性蚊蟲(chóng)控制制劑,以應(yīng)對(duì)現(xiàn)有生物殺蟲(chóng)劑在蚊蟲(chóng)防治效果上的局限性。
21、本發(fā)明實(shí)驗(yàn)證明,所提供的生物殺蟲(chóng)劑能夠達(dá)到高毒性水平,在蚊子幼蟲(chóng)或蚊子成蟲(chóng)殺滅實(shí)驗(yàn)中實(shí)現(xiàn)最高的死亡率,能夠有效控制蚊蟲(chóng)種群、減少疾病傳播。在殺蟲(chóng)劑產(chǎn)品制備中能夠避免化學(xué)殺蚊劑對(duì)環(huán)境、嬰幼兒或其他敏感人群的傷害,具有優(yōu)異的應(yīng)用前景。
1.一種殺蟲(chóng)劑,其特征在于,所述殺蟲(chóng)劑中含有蛋白cry4aa和蛋白cry11ba;
2.一種菌株在制備殺蟲(chóng)劑中的應(yīng)用,其特征在于,所述菌株能夠表達(dá)cry4aa基因和cry11ba基因;
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,所述菌株為蘇云金芽孢桿菌。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,所述菌株的應(yīng)用濃度在1013cfu/g以上。
5.一種殺蟲(chóng)劑,其特征在于,所述殺蟲(chóng)劑中含有能夠表達(dá)cry4aa基因的菌株和能夠表達(dá)cry11ba基因的菌株;
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的殺蟲(chóng)劑,其特征在于,所述菌株為蘇云金芽孢桿菌。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的殺蟲(chóng)劑,其特征在于,所述菌株以粉末菌劑的形式存在于殺蟲(chóng)劑中。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的殺蟲(chóng)劑,其特征在于,所述殺蟲(chóng)劑中菌株的有效活菌濃度在1013cfu/g以上。
9.權(quán)利要求1或權(quán)利要求5所述的殺蟲(chóng)劑在制備滅蚊產(chǎn)品中的應(yīng)用,其特征在于,所述滅蚊產(chǎn)品為殺滅蚊子幼蟲(chóng)的產(chǎn)品。
10.權(quán)利要求1或權(quán)利要求5所述的殺蟲(chóng)劑在制備滅蚊產(chǎn)品中的應(yīng)用,其特征在于,所述滅蚊產(chǎn)品為殺滅蚊子成蟲(chóng)的產(chǎn)品。