本發(fā)明涉及貝類采樣，具體涉及一種東風(fēng)螺活體取樣方法。

背景技術(shù)：

1、東風(fēng)螺屬于軟體動物門(mollusca)、腹足綱(gastropada)、前鰓亞綱(prosobranchia)、新腹足目(nerobanchia)、東風(fēng)螺科(babyloniidae)的動物，俗稱花螺、旺螺、黃螺、鳳螺等，是一種具有極高營養(yǎng)價值的水產(chǎn)動物，其中方斑東風(fēng)螺(babyloniaareolata)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)在海南、福建、廣東等地已具有一定規(guī)模，對其生長性狀、抗病、食物轉(zhuǎn)化率、耐低鹽等重要經(jīng)濟性狀的選擇育種工作正在進行并取得了一定的進展。然而，長期以來，東風(fēng)螺的實驗過程中存在取樣后成活率低的問題，即對該個體進行重測序等實驗后，該個體很可能無法繼續(xù)成活，導(dǎo)致其優(yōu)良性狀難以傳給下一代，這對東風(fēng)螺育種工作和各種相關(guān)實驗的開展造成了不良影響。

2、若取樣后無法成活或成活率低，則在基因組選擇育種的過程中，取樣后的個體經(jīng)過重測序，成本較大，其中具有優(yōu)良性狀的個體不能繼續(xù)傳代，只能用同一家系的其他個體進行傳代，這樣的育種過程會導(dǎo)致遺傳增益低下且成本高昂。

3、基于此，本發(fā)明的目的在于提供一種東風(fēng)螺成活率高的活體取樣方法，并使取樣大小可以達(dá)到重測序等實驗的要求，對育種等科研工作的開展具有尤為重要的作用。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對上述提出的問題，本發(fā)明提供一種東風(fēng)螺成活率高的活體取樣方法。

2、為實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)：

3、一種東風(fēng)螺活體取樣方法，包括：

4、步驟1)：挑選健康且活力正常的東風(fēng)螺，放置于提前消毒過的容器內(nèi)，使用2.5％的海水酒精麻醉；

5、步驟2)：待其足肌伸展，處于麻醉狀態(tài)后，用消毒過的工具(其中工具可選用剪刀、刀片等)取水管或足肌后部、側(cè)面的任一部位，隨后使用酒精消毒，再涂上紅霉素軟膏，置于紫外消毒過的海水中解除麻醉；從東風(fēng)螺活體上取下的組織樣可用于重測序等相關(guān)實驗中。

6、步驟3)：用紫外消毒后的海水無沙培養(yǎng)7天，每天換一次水并清洗養(yǎng)殖容器，海水溫度和鹽度與解除麻醉時相同；

7、步驟4)：第七天鋪沙并投喂，若螺可以正常鉆沙和攝食，則表明活體取樣基本成功，可轉(zhuǎn)為普通海水培養(yǎng)。約3周再生組織可以長出，并于5周左右長成，長成后傷口完全恢復(fù)，東風(fēng)螺生存狀態(tài)可完全恢復(fù)正常。

8、作為一種可能的實施方式，進一步，步驟1)中挑選的東風(fēng)螺體長2cm以上。

9、作為一種可能的實施方式，進一步，步驟1)中海水酒精中使用的海水提前進行紫外消毒。

10、作為一種可能的實施方式，進一步，步驟2)中使用75％酒精進行消毒。

11、作為一種可能的實施方式，進一步，步驟2)中在溫度25±1℃、鹽度28±1ppt的紫外消毒過的海水中解除麻醉。

12、作為一種可能的實施方式，進一步，步驟2)中取水管的一半或足肌后部、側(cè)面的任一部位；其中足肌后部、側(cè)面的取樣大小約等于水管大小的一半。

13、作為一種可能的實施方式，進一步，步驟4)中所鋪的沙需經(jīng)過消毒處理。

14、作為一種可能的實施方式，進一步，步驟4)中若螺狀態(tài)不佳，則繼續(xù)用紫外消毒后的海水無沙培養(yǎng)2-3天，每天換一次水并清洗養(yǎng)殖容器，海水溫度和鹽度與解除麻醉時相同。

15、本發(fā)明的有益效果如下：

16、本發(fā)明方法能夠?qū)|風(fēng)螺進行活體取樣，樣本成活率高達(dá)95％以上，能夠滿足反復(fù)取樣，可有效克服現(xiàn)有東風(fēng)螺取樣成活率極低的問題，對育種等科研工作的開展具有重要幫助。

技術(shù)特征：

1.一種東風(fēng)螺活體取樣方法，其特征在于，包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種東風(fēng)螺活體取樣方法，其特征在于，步驟1)中挑選的東風(fēng)螺體長2cm以上。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種東風(fēng)螺活體取樣方法，其特征在于，步驟1)中海水酒精中使用的海水提前進行紫外消毒。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種東風(fēng)螺活體取樣方法，其特征在于，步驟2)中使用75％酒精進行消毒。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種東風(fēng)螺活體取樣方法，其特征在于，步驟2)中在溫度25±1℃、鹽度28±1ppt的紫外消毒過的海水中解除麻醉。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種東風(fēng)螺活體取樣方法，其特征在于，步驟2)中取水管的一半或足肌后部、側(cè)面的任一部位；其中足肌后部、側(cè)面的取樣大小約等于水管大小的一半。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種東風(fēng)螺活體取樣方法，其特征在于，步驟4)中所鋪的沙需經(jīng)過消毒處理。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種東風(fēng)螺活體取樣方法，其特征在于，步驟4)中若螺狀態(tài)不佳，則繼續(xù)用紫外消毒后的海水無沙培養(yǎng)2-3天，期間每天換一次水并清洗養(yǎng)殖容器，海水溫度和鹽度與解除麻醉時相同。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種東風(fēng)螺活體取樣方法，包括：挑選健康且活力正常的東風(fēng)螺，放置于提前使用高錳酸鉀消毒過的容器內(nèi)，使用2.5％的海水酒精麻醉，處于麻醉狀態(tài)后，用消毒過的剪刀取水管的一半或足肌后部、側(cè)面的任一部位，約等于水管大小的一半，隨后使用75％酒精消毒，再涂上紅霉素軟膏，置于紫外消毒過的海水中解除麻醉，隨后無沙培養(yǎng)7天，第七天鋪沙并投喂，若螺可以正常鉆沙和攝食，則表明活體取樣基本成功。約3周再生組織可以長出并于5周左右長成，長成后傷口完全恢復(fù)，東風(fēng)螺生存狀態(tài)可完全恢復(fù)正常。本發(fā)明方法可使東風(fēng)螺活體取樣成活率高達(dá)95％以上，對于體長2cm以上的螺，所取樣品可用于重測序，對東風(fēng)螺育種等各種實驗的開展有重要的幫助。

技術(shù)研發(fā)人員：柯才煥,聶林蔚,游偉偉,駱軒
受保護的技術(shù)使用者：廈門大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10