本發(fā)明涉及微生物制劑的，尤其涉及一種水霉抑制劑及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、在淡水養(yǎng)殖業(yè)中，水霉(saprolegnia)作為一種廣泛存在的真菌性疾病，長(zhǎng)期以來對(duì)水生動(dòng)物的健康構(gòu)成了嚴(yán)重威脅，特別是在低溫季節(jié)，其致病性尤為顯著。水霉能夠感染水生動(dòng)物的各個(gè)生活階段，且對(duì)寄主無嚴(yán)格的選擇性，這使得其防控難度大大增加。水霉感染過程中，通過其特有的效應(yīng)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，能夠抑制宿主的防御反應(yīng)，導(dǎo)致表皮細(xì)胞損傷及組織腐爛，進(jìn)而引發(fā)水產(chǎn)動(dòng)物游動(dòng)緩慢、活力減弱乃至死亡，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失。

2、草魚(ctenopharyngodon?idella)，作為中國傳統(tǒng)的淡水養(yǎng)殖魚類之一，因其廣泛的適應(yīng)性和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，在國內(nèi)養(yǎng)殖規(guī)模巨大。然而，草魚同樣面臨著水霉病的嚴(yán)重挑戰(zhàn)，尤其是在環(huán)境脅迫和免疫力下降的情況下，極易遭受水霉感染。水霉病的發(fā)生不僅影響草魚的生長(zhǎng)性能和品質(zhì)，還可能導(dǎo)致處于不同生長(zhǎng)階段的個(gè)體大量死亡，直接威脅到養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

3、隨著環(huán)保意識(shí)的增強(qiáng)和食品安全標(biāo)準(zhǔn)的提高，傳統(tǒng)化學(xué)藥物如孔雀石綠等因其潛在的毒性和環(huán)境殘留問題已被逐步禁用或限制使用。這一變化促使研究者們轉(zhuǎn)向更加安全、環(huán)保的生物防治方法，以探索替代性的水霉控制策略。近年來，越來越多的研究表明，自然界中存在多種具有水霉拮抗作用的微生物，如粘質(zhì)沙雷氏菌、氣單胞菌、假單胞菌、芽孢桿菌及放線菌等，這些微生物不僅能夠有效抑制水霉的生長(zhǎng)，還具備無殘留、環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)，顯示出巨大的應(yīng)用潛力。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種水霉抑制劑及其制備方法與應(yīng)用，用于抑制水霉對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的感染。

2、本發(fā)明的目的采用以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

3、第一方面，本發(fā)明提供一種水霉抑制劑，包括：雙孢菇多糖和黑附球菌(epicoccumnigrum)z01；

4、黑附球菌z01的保藏號(hào)為cctccno：m2024967。

5、進(jìn)一步的，所述水霉抑制劑中雙孢菇多糖的濃度為100-500mg/l，黑附球菌z01的孢子濃度為1.0-8.0×108個(gè)/ml。

6、進(jìn)一步的，所述的水霉抑制劑還包括：

7、副干酪乳桿菌(lacticaseibacillusparacasei)ly02，所述水霉抑制劑中副干酪乳桿菌ly02的濃度為1.0-5.0×109cfu/ml。

8、進(jìn)一步的，所述的水霉抑制劑還包括：

9、麥角硫因，所述水霉抑制劑中麥角硫因的濃度為300-500μmol/l。

10、第二方面，本發(fā)明提供一種水霉抑制劑的制備方法，包括以下步驟：

11、將黑附球菌z01接種于馬鈴薯葡萄糖肉湯培養(yǎng)基中，并置于175rpm、25℃的搖床中培養(yǎng)5d后，用3層無菌紗布過濾，得到濾液為黑附球菌z01培養(yǎng)液；黑附球菌z01培養(yǎng)液；

12、將雙孢菇多糖加入黑附球菌z01培養(yǎng)液，并混合均勻，獲得水霉抑制劑。

13、進(jìn)一步的，所述的水霉抑制劑的制備方法還包括：

14、將副干酪乳桿菌ly02接種于德氏乳桿菌液體培養(yǎng)基中，并置于搖床中培養(yǎng)，用3層無菌紗布過濾，獲得副干酪乳桿菌ly02培養(yǎng)液；

15、將副干酪乳桿菌ly02培養(yǎng)液加入黑附球菌z01培養(yǎng)液，并混合均勻，獲得水霉抑制劑。

16、進(jìn)一步的，所述的水霉抑制劑的制備方法還包括：將麥角硫因加入黑附球菌z01培養(yǎng)液，并混合均勻，獲得水霉抑制劑。

17、進(jìn)一步的，所述黑附球菌z01的培養(yǎng)液的od600是1.2-1.5。

18、進(jìn)一步的，所述副干酪乳桿菌ly02培養(yǎng)液的od600為1.2-1.5。

19、第三方面，本發(fā)明還提供一種水霉抑制劑在治療或預(yù)防真菌感染中的應(yīng)用，所述水霉抑制劑為上述的水霉抑制劑。

20、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果至少包括：

21、本發(fā)明的水霉抑制劑能夠有效抑制真菌的活力和繁殖能力，特別是能夠預(yù)防由水霉致病菌引起的水霉病?？梢?，本發(fā)明不僅豐富了生防菌的種類，還拓寬了生防菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中水霉病害防控領(lǐng)域的應(yīng)用。進(jìn)一步的，本發(fā)明不僅為淡水養(yǎng)殖動(dòng)物水霉病的防治提供了新的解決方法，還有效避免了藥殘問題。

技術(shù)特征：

1.一種水霉抑制劑，其特征在于，包括：雙孢菇多糖和黑附球菌(epicoccumnigrum)z01；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水霉抑制劑，其特征在于，所述水霉抑制劑中雙孢菇多糖的濃度為100-500mg/l，黑附球菌z01的孢子濃度為1.0-8.0×108個(gè)/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水霉抑制劑，其特征在于，還包括：

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水霉抑制劑，其特征在于，還包括：

5.一種水霉抑制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的水霉抑制劑的制備方法，其特征在于，還包括：

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的水霉抑制劑的制備方法，其特征在于，還包括：

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的水霉抑制劑的制備方法，其特征在于，所述黑附球菌z01的培養(yǎng)液od600是1.2-1.5。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的水霉抑制劑的制備方法，其特征在于，所述副干酪乳桿菌ly02培養(yǎng)液的od600為1.2-1.5。

10.一種水霉抑制劑在治療或預(yù)防真菌感染中的應(yīng)用，所述水霉抑制劑為權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的水霉抑制劑。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種水霉抑制劑及其制備方法與應(yīng)用，其中，水霉抑制劑包括雙孢菇多糖、黑附球菌(Epicoccumnigrum)Z01、副干酪乳桿菌(Lacticaseibacillusparacasei)LY02、麥角硫因；黑附球菌Z01的保藏號(hào)為CCTCCNO：M2024967。所述水霉抑制劑中雙孢菇多糖的濃度為100?500mg/L，黑附球菌Z01的孢子濃度為1.0?8.0×10<supgt;8</supgt;個(gè)/mL。所述水霉抑制劑中副干酪乳桿菌LY02的濃度為1.0?5.0×10<supgt;9</supgt;CFU/mL。所述水霉抑制劑中麥角硫因的濃度為300?500μmol/L。本發(fā)明能夠有效抑制水霉對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的感染。

技術(shù)研發(fā)人員：楊移斌,朱霞,艾曉輝,何豪
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/5