專(zhuān)利名稱(chēng)：植物種苗的增殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物種苗的一種增殖方法和將培育出的種苗加以馴化的方法。詳而言之，本發(fā)明涉及一種在同一培養(yǎng)箱中的同一培養(yǎng)基上進(jìn)行貫串于芽的再生、發(fā)根與馴化各項(xiàng)過(guò)程的連續(xù)培養(yǎng)，從而增殖種苗的方法以及一種比較適用于連續(xù)培養(yǎng)的、使培養(yǎng)出的種苗馴化的方法。
通過(guò)組織培養(yǎng)而增殖種苗，是產(chǎn)生優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的植物種苗的一種行之有效的方法，該方法采用未受病毒之類(lèi)病源體污染的種苗，使某一新裁培作物、某一難以發(fā)芽的種子作物、某一無(wú)性繁殖能力差的作物等作物的克隆化種苗(有遺傳同一性的種苗)大量繁殖。人們認(rèn)為，這種方法將發(fā)展成為未來(lái)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)技術(shù)的一大支柱。然而，用在培養(yǎng)箱內(nèi)對(duì)植物的細(xì)胞、組織或小植株進(jìn)行培養(yǎng)的方法來(lái)產(chǎn)生植物種苗，成本是昂貴的，因而，該方法的應(yīng)用范圍僅限于高級(jí)調(diào)理下的園藝植物，如蘭花、草莓、麝香石竹以及觀葉植物等。生產(chǎn)成本高的最主要原因是這些高級(jí)調(diào)理下的園藝植物大多靠手工生產(chǎn)，勞力費(fèi)占生產(chǎn)成本的65～70%。其次的原因是在組織培養(yǎng)期間植物的細(xì)胞、組織或小植株的生長(zhǎng)遲緩，由此而培養(yǎng)出來(lái)的、有銷(xiāo)售價(jià)值、有較好的生根能力并在其后的馴化過(guò)程中有較好生長(zhǎng)能力的種苗產(chǎn)量很低。
另一方面，人們一直認(rèn)為，基本上不可能使組織培養(yǎng)過(guò)程中的小植株連續(xù)地自養(yǎng)生長(zhǎng)，借以生產(chǎn)植物種苗，這是因?yàn)樾≈仓暝诮M織培養(yǎng)過(guò)程中其光合作用能力大減。之所以形成上述成見(jiàn)，是因?yàn)橹参锝M織培養(yǎng)技術(shù)是在微生物或動(dòng)物的細(xì)胞或組織培養(yǎng)技術(shù)的基礎(chǔ)之上發(fā)展起來(lái)的。于是，眾所周知，在現(xiàn)有技術(shù)中，小植株的生長(zhǎng)，是通過(guò)往培養(yǎng)基內(nèi)添加糖類(lèi)(蔗糖、葡萄糖、果糖等)作為碳源，以便讓小植株混合營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，即有異養(yǎng)特征的生長(zhǎng)。結(jié)果，在現(xiàn)有技術(shù)中有關(guān)提高生產(chǎn)率和降低生產(chǎn)成本的研究工作，曾經(jīng)要達(dá)到兩個(gè)目的最大限度地提高異養(yǎng)生長(zhǎng)和繁殖的效益并減少使用的勞力。作為沿上述方向從事的研究工作的進(jìn)展情況的一個(gè)典型實(shí)例，是如下的方法將小植株的大部分浸入培養(yǎng)箱內(nèi)含糖液體培養(yǎng)基中，一面往箱內(nèi)供氧，一面搖動(dòng)或轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)箱，以便提高小植株吸收糖、氧等養(yǎng)分的速度，類(lèi)似的方法，也可以列舉出一些。
在上述常規(guī)方法中，由于大量加糖，培養(yǎng)基在培養(yǎng)期間容易受外界污染，以致造成正在培養(yǎng)中的小植株在培養(yǎng)期間受污染而發(fā)霉致死。為避免出現(xiàn)這種情況，常規(guī)方法所要求的操作如此嚴(yán)格，以致培養(yǎng)箱、培養(yǎng)室等培養(yǎng)環(huán)境幾乎應(yīng)保持無(wú)菌。此外，人們認(rèn)為，主要通過(guò)上述那種異養(yǎng)生長(zhǎng)與繁殖而得到的經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的種苗被轉(zhuǎn)移到自養(yǎng)條件下進(jìn)行馴化時(shí)，培養(yǎng)出來(lái)的種苗遇到的是環(huán)境突變，致使馴化過(guò)程中長(zhǎng)根的速度下降，生長(zhǎng)也延緩。
此外，常規(guī)方法是讓培養(yǎng)出的種苗逐步馴化以便能適應(yīng)外界環(huán)境，特別是將種苗放到與先前培養(yǎng)階段所使用的容器有區(qū)別的容器中，然后逐步降低該裝置中的濕度。
然而，上述那種馴化過(guò)程，可能是在工業(yè)上的高效率地用組織培養(yǎng)來(lái)大量繁殖種苗的主要障礙。
而且，在常規(guī)的馴化過(guò)程中，培養(yǎng)出來(lái)的種苗仍然處于一種有明顯的異養(yǎng)特征的環(huán)境當(dāng)中，以致于令人擔(dān)心的是即便培養(yǎng)出來(lái)的種苗通過(guò)了馴化工序也不能在載植后充分適應(yīng)純屬光-自養(yǎng)的環(huán)境。
本發(fā)明的目的，在于提高一種增殖植物種苗的新方法和使培養(yǎng)出來(lái)的種苗馴化的新方法，這兩種方法都不存在上述現(xiàn)有技術(shù)所遇到的問(wèn)題。具體說(shuō)來(lái)，本發(fā)明旨在提供一種增殖植物種苗的方法，根據(jù)該方法，增殖植物種苗的培養(yǎng)工作，從芽的再生到發(fā)根和馴化的各個(gè)過(guò)程，均可在同一培養(yǎng)箱里的同一培養(yǎng)基上連續(xù)進(jìn)行，馴化期間的發(fā)根率以及馴化后植物種苗的生長(zhǎng)狀況都比較好，而且，為保持一種在培養(yǎng)期間不易出現(xiàn)污染的無(wú)菌環(huán)境而在操作方面受到的限制也寬松了;還提供一種馴化方法，該方法無(wú)需專(zhuān)用的馴化設(shè)備，因而對(duì)上述連續(xù)培養(yǎng)中的馴化階段是適宜的。
為實(shí)現(xiàn)上述第一項(xiàng)目的，要把植物的組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞放在培養(yǎng)箱中一種用不溶水的并有吸水性的基底浸漬在一種液體培養(yǎng)基內(nèi)而制備成的培養(yǎng)基上，隨后，在同一培養(yǎng)箱內(nèi)的同一培養(yǎng)基上對(duì)再生的芽進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng)。在這一連續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中，芽再生之前的導(dǎo)養(yǎng)培養(yǎng)要在含碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行;芽再生后的光-自養(yǎng)培養(yǎng)，要在有特定光照強(qiáng)度和特定CO2氣體的環(huán)境中進(jìn)行，這時(shí)的培養(yǎng)基內(nèi)上述碳源已基本上在前面講的異養(yǎng)培養(yǎng)階段消耗掉。
為實(shí)現(xiàn)上述第二項(xiàng)目的，要在對(duì)培養(yǎng)出的植物種苗進(jìn)行光-自養(yǎng)培養(yǎng)階段按一定要求向培養(yǎng)箱內(nèi)輸送CO2。
根據(jù)本發(fā)明的增殖植物種苗的方法，可獲得如下明顯效果可以在同一培養(yǎng)箱里的同一培養(yǎng)基上進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng)，從而增殖植物種苗，這就使全過(guò)程大為簡(jiǎn)化;此外，芽再生之后，在發(fā)根和馴化階段，通過(guò)光-自養(yǎng)培養(yǎng)，使生根率、馴化后的長(zhǎng)根率和馴化后植物種苗的生長(zhǎng)狀況都比較好，從而也大大提高了優(yōu)良植物種苗的產(chǎn)量;再者，培養(yǎng)期間的污染得到控制，這比保持培養(yǎng)箱無(wú)菌要更簡(jiǎn)便。
另外，按照本發(fā)明植物種苗的馴化方法，作為馴化階段的重要因素，是降低培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度，為創(chuàng)造光-自養(yǎng)環(huán)境而向培養(yǎng)箱內(nèi)送CO2氣體，同時(shí)也就降低了濕度，因而不必采用專(zhuān)門(mén)的馴化裝置。這個(gè)方法還可作為在同一培養(yǎng)箱中的同一培養(yǎng)基上培養(yǎng)植物種苗的培養(yǎng)過(guò)程的組成部分。況且，本發(fā)明的馴化方法使培養(yǎng)出的植物種苗的發(fā)根率大大提高。


圖1是本發(fā)明的對(duì)培養(yǎng)出的植物種苗進(jìn)行馴化的方法中在培養(yǎng)期間(1)至(6)步驟的流程示意圖。
圖2為植物的組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞在
圖1中(1)至(4)步驟中生長(zhǎng)狀態(tài)的示意圖。
前面說(shuō)過(guò)，本發(fā)明不僅提供一種增殖植物種苗的方法，而且還提供一種將培養(yǎng)出的植物種苗加以馴化的方法。
為此，本發(fā)明人通過(guò)研究工作發(fā)現(xiàn)，在開(kāi)始培養(yǎng)植物的組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞時(shí)，將組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞放在用液體培養(yǎng)基浸漬的不溶水并有吸水性的基底而制備的培養(yǎng)基上，并在同一培養(yǎng)箱內(nèi)的同一培養(yǎng)基上隨后進(jìn)行從再生、發(fā)根到馴化的各個(gè)過(guò)程的培養(yǎng)，這樣來(lái)增殖植物種苗，效果較好。
在按上述內(nèi)容進(jìn)行同一培養(yǎng)箱內(nèi)的同一培養(yǎng)基上的連續(xù)培養(yǎng)時(shí)，在培養(yǎng)階段的過(guò)程中，培養(yǎng)基內(nèi)所含碳源被消耗從而會(huì)妨礙植物的異養(yǎng)生長(zhǎng)。因此，在培養(yǎng)期的適當(dāng)時(shí)候有必要向培養(yǎng)基提供碳源，這是前面講到的常規(guī)技術(shù)的普遍認(rèn)識(shí)。然而，本發(fā)明的人卻發(fā)現(xiàn)，植物在芽再生之后出人意料地具有相當(dāng)強(qiáng)的自養(yǎng)生長(zhǎng)能力，這已經(jīng)與常規(guī)技術(shù)的普通認(rèn)識(shí)相悖了，而且，發(fā)根率、馴化期間的長(zhǎng)根率、馴化后的植物生長(zhǎng)狀況等等，由于下述情況而明顯地得到改善，這就是在能夠積極推動(dòng)上述自養(yǎng)生長(zhǎng)的培養(yǎng)環(huán)境中讓芽再生、發(fā)根和馴化。
本發(fā)明人還注意到，馴化過(guò)程中進(jìn)行完全光-自養(yǎng)培養(yǎng)時(shí)向培養(yǎng)箱內(nèi)加CO2是創(chuàng)造上述光-自養(yǎng)環(huán)境的要求。我們通過(guò)各種實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，這種加CO2氣體的辦法，可以取代馴化過(guò)程中那種常規(guī)的給培養(yǎng)箱降低濕度的做法。于是，我們實(shí)現(xiàn)了現(xiàn)在的這種使培養(yǎng)出的植物種苗得到馴化的方法。
下面，結(jié)合附圖來(lái)闡明本發(fā)明的方法。
圖1是本發(fā)明植物種苗增殖法在培養(yǎng)期間(1)至(6)步驟流程示意圖;圖2是植物的組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞在
圖1中(1)至(4)步驟生長(zhǎng)情況的示意圖。
本發(fā)明植物種苗增殖法的基本特征在于植物4的組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞是放在培養(yǎng)箱1中的一種培養(yǎng)基上開(kāi)始培養(yǎng)的，該培養(yǎng)基是用一種培養(yǎng)基3〔步驟(1)〕浸漬一種不溶水并有吸水性的基底制備而成，芽5的再生〔步驟(2)與(3)〕、發(fā)根〔步驟(4)〕與馴化〔步驟(5)〕等隨后的培養(yǎng)過(guò)程都在同一培養(yǎng)箱1內(nèi)并在同一培養(yǎng)基2上進(jìn)行，而且，在上述連續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中，芽5再生前，植物4的組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞放在含碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng);芽再生〔步驟(2)〕后，隨之而來(lái)的發(fā)根與馴化過(guò)程中則進(jìn)行光-自養(yǎng)培養(yǎng)，辦法是讓芽5在光照與送入CO2氣體的環(huán)境中在培養(yǎng)基2上面進(jìn)行光合作用，培養(yǎng)基2原有的碳源在芽再生之前的培養(yǎng)期間已基本上消耗掉。
而且，本發(fā)明中對(duì)培養(yǎng)出的植物種苗的馴化方法是作為上述連續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中的一個(gè)步驟，即步驟(5)付諸實(shí)施。
芽再生后，為了向培養(yǎng)箱1里送入CO2，可以把培養(yǎng)箱1的密封蓋12換成帶通氣孔6的箱蓋13，然后，如
圖1所示，由上述通氣孔6往箱內(nèi)送CO2氣體。另外，按需要的間隔，在有吸水性的基底2上切出割口C，這樣，有利于在完成培養(yǎng)工作后將植物種苗逐一分開(kāi)。
雖然本發(fā)明中增殖植物種苗的方法中用植物組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞作為原始材料，但這方面并無(wú)特別的限定，因而，植物一般繁殖所用的外殖片，如花器官、莖、葉、芽尖、球莖、根等的組織塊和愈傷組織等均可使用。
本發(fā)明的植物種苗馴化法使用的經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的種苗，是通過(guò)普通的組織培養(yǎng)而獲得的上述植物組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞。
用作不溶水的并有吸水性的基底，可以是經(jīng)過(guò)滅菌處理的珍珠巖、
石、玻璃棉、聚脂、土壤、吸水聚合物顆粒、陶瓷棉等顆粒狀或纖維狀載體。
所使用的培養(yǎng)基，是按需要向MS、NN等基本培養(yǎng)基中添加氨基酸或類(lèi)似物而制得的。
在開(kāi)始培養(yǎng)時(shí)，要浸漬進(jìn)不溶水的并有吸水性基底的培養(yǎng)基，最好用含碳源的，例如含蔗糖的培養(yǎng)基，碳源的含量應(yīng)當(dāng)是讓芽再生之前的異養(yǎng)培養(yǎng)達(dá)到要求而且在芽再生時(shí)培養(yǎng)基中的碳源基本上被消耗掉，也就是說(shuō)，碳源的含量大約為0.5-1.5%。因此，芽再生后的異養(yǎng)培養(yǎng)基本上是斷斷續(xù)續(xù)的，芽在有光照和CO2氣體的環(huán)境中進(jìn)行光合作用時(shí)，屬于自養(yǎng)培養(yǎng)。在這種情況下，為活化光合作用，光照強(qiáng)度的范圍最好從3000到20000勒克斯，供應(yīng)CO2氣體的濃度最好是300～1200ppm，氣體交換頻率為0.1～30次/小時(shí)。
順便提一句，芽再生后，不一定同時(shí)即向培養(yǎng)箱送入CO2氣體又按
圖1所示那樣按要求的強(qiáng)度開(kāi)始光照〔步驟(5)〕。因此，可以在芽5的葉子生長(zhǎng)、留在培養(yǎng)箱里的CO2濃度低于初期濃度時(shí)再開(kāi)始光照。
為加快發(fā)根等過(guò)程，最好在步驟(2)至步驟(3)的發(fā)根期間作如下環(huán)境中的培養(yǎng)，即培養(yǎng)基不含生長(zhǎng)素或只含極少生長(zhǎng)素，以便發(fā)根期有竟?fàn)幮浴＞唧w講，生長(zhǎng)素的含量最好在10-9至10-7M的范圍之內(nèi)。
按常規(guī)方法，馴化期間進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，要把經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的植物種苗轉(zhuǎn)移到另一個(gè)培養(yǎng)箱中的馴化培養(yǎng)基上，馴化培養(yǎng)時(shí)要逐步降低濕度。而按照本發(fā)明，進(jìn)行這個(gè)時(shí)期的培養(yǎng)工作的同時(shí)，向上述培養(yǎng)箱內(nèi)送入CO2氣體，將培養(yǎng)箱內(nèi)的水分排出，也就逐步減少了馴化培養(yǎng)基的水分和培養(yǎng)箱的濕度。
盡管本發(fā)明中植物種苗的增殖方法和對(duì)經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的植物種苗進(jìn)行馴化的方法對(duì)任何植物均適用，但這些方法尤其適于增殖薔薇屬植物的種苗。
可以列舉出一些屬于上面講的薔薇屬植物，它們是雜交茶玫瑰、大花玫瑰、花束玫瑰等大花與中花玫瑰;攀援雜交茶玫瑰、攀援薔薇等攀援類(lèi)玫瑰;深紅玫瑰、星狀玫瑰、灰姑娘等小型玫瑰。
〔實(shí)施例〕下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明加以說(shuō)明。但本發(fā)明決不限于這些實(shí)施例。
實(shí)施例1～3從消毒的小型玫瑰-深紅玫瑰的消毒枝條上收集側(cè)芽。將這些側(cè)芽放在用PH值為5.7、含1%蔗糖和0.1μM芐基腺嘌呤的無(wú)菌MS液體培養(yǎng)基浸漬的珍珠巖、玻璃棉和聚脂纖維上，然后，在溫度為25℃、光照16小時(shí)(10000勒克斯)、無(wú)光8小時(shí)的一個(gè)培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。在從開(kāi)始培養(yǎng)算起的第8周，當(dāng)培養(yǎng)基中蔗糖被消耗時(shí)，以10次/小時(shí)的交換頻率向箱內(nèi)供應(yīng)CO2濃度為500ppm的空氣。從開(kāi)始培養(yǎng)算起的第3周，向培養(yǎng)基添加0.01μM的萘乙酸。在連續(xù)培養(yǎng)4周后，從培養(yǎng)箱里取出植物種苗，然后載植入土。每個(gè)側(cè)芽所產(chǎn)生的芽數(shù)、發(fā)根率、長(zhǎng)根速度等結(jié)果，見(jiàn)表1。
對(duì)比實(shí)施例1按實(shí)施例1相同的方法培養(yǎng)小型玫瑰-深紅玫瑰的側(cè)芽，所不同的是采用了以瓊脂固化的培養(yǎng)基，光照期間的光強(qiáng)為1000勒克斯，未補(bǔ)給CO2氣體。其結(jié)果見(jiàn)表1。
對(duì)比實(shí)施例2按實(shí)施例1相同的方法培養(yǎng)小型玫瑰-深紅玫瑰的側(cè)芽，所不同的是采用了液體培養(yǎng)基，補(bǔ)給了氧氣，光照期間的光強(qiáng)為1500勒克斯，未補(bǔ)給CO2氣體。其結(jié)果見(jiàn)表1。
權(quán)利要求
1.一種增殖植物種苗的方法，包括先將植物的組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞放在一個(gè)培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，這時(shí)植物的組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞放在用培養(yǎng)基浸漬不溶水并有吸水性的基底而制得的培養(yǎng)基上，隨后在芽的再生、發(fā)根與馴化過(guò)程中都連續(xù)地在同一培養(yǎng)箱內(nèi)的同一培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的一種方法，還包括芽再生之前，在含碳源的培養(yǎng)基上對(duì)植物的組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)，在發(fā)根與馴化過(guò)程中則對(duì)再生出的芽進(jìn)行光-自養(yǎng)培養(yǎng)，這時(shí)讓芽在有一定光照強(qiáng)度和一定量CO2氣體補(bǔ)給的環(huán)境下的培養(yǎng)基中進(jìn)行光合作用，該培養(yǎng)基中的碳源在芽再生之前上面講的異養(yǎng)培養(yǎng)期間已基本上被消耗掉。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其特征在于光照強(qiáng)度的范圍是3000至20000勒克斯。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3的方法，其特征在于，送入CO2氣體的濃度為300至1200ppm，氣體交換頻率為0.1-30次/小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求2至4中任何一項(xiàng)的方法，其特征在于，發(fā)根期間的培養(yǎng)是在不含生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基或生長(zhǎng)素含量微小到足以使芽的發(fā)根階段具有竟?fàn)幜Φ呐囵B(yǎng)基上進(jìn)行的。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其特征在于，生長(zhǎng)素的含量為10-9至10-7M。
7.根據(jù)權(quán)利要求2的一種方法，其特征在于，在進(jìn)行馴化期培養(yǎng)的同時(shí)，通過(guò)向這個(gè)時(shí)期的培養(yǎng)箱內(nèi)通入CO2氣體將培養(yǎng)箱內(nèi)的水分排出而使得馴化培養(yǎng)基的水分和培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度逐漸減少。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任何一項(xiàng)的方法，其特征在于，不溶水并有吸水性的基底是一種顆粒狀或纖維狀載體。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任何一項(xiàng)的方法，其特征在于植物是薔薇屬(genus Rosa)。
10.一種使培養(yǎng)出的植物種苗馴化的方法，包括在培養(yǎng)箱中一種不含碳源的馴化培養(yǎng)基上對(duì)培養(yǎng)出的植物種苗進(jìn)行培養(yǎng)，同時(shí)，在一定光照強(qiáng)度和一定量的CO2氣體補(bǔ)給條件下使培養(yǎng)出的植物種苗進(jìn)行光合作用，同時(shí)，通過(guò)向前述培養(yǎng)期的培養(yǎng)箱內(nèi)送入CO2氣體以便將培養(yǎng)箱內(nèi)的水分排出而使得馴化培養(yǎng)基所含水分以及培養(yǎng)箱的濕度逐步減少。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其特征在于，光照強(qiáng)度的范圍是3000至20000勒克斯。
12.根據(jù)權(quán)利要求10或11的方法，其特征在于，送入CO2氣體時(shí)，濃度為300至1200ppm，氣體交換頻率為0.1-30次/小時(shí)。
13.根據(jù)權(quán)利要求10至12中任何一項(xiàng)的方法，其特征在于，馴化培養(yǎng)基是用一定量的培養(yǎng)基浸漬不溶水的并有吸水性的基底而制得。
全文摘要
植物種苗的增殖和馴化的方法，先將植物的組織塊或經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的細(xì)胞放在培養(yǎng)箱中用培養(yǎng)基浸漬不溶水并有吸水性的基底而制得的培養(yǎng)基上，隨后芽的再生、發(fā)根和馴化均在同一培養(yǎng)箱內(nèi)同一培養(yǎng)基上連續(xù)進(jìn)行。芽再生前的異養(yǎng)培養(yǎng)要在含碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行。芽再生后的光一自養(yǎng)培養(yǎng)則在已消耗掉碳源的培養(yǎng)基上，并在一定光照強(qiáng)度和CO
文檔編號(hào)A01H4/00GK1041508SQ8910471
公開(kāi)日1990年4月25日 申請(qǐng)日期1989年5月31日 優(yōu)先權(quán)日1988年5月31日
發(fā)明者谷本靜史, 平田行正, 高橋滋, 小野麗子 申請(qǐng)人:三井石油化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社