專(zhuān)利名稱(chēng)：：防治土壤害蟲(chóng)的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及防治土壤害蟲(chóng)，特別是有害昆蟲(chóng)的改進(jìn)組合物，所述組合物含有生物防治劑。在全球許多種主要作物中，如根蠕蟲(chóng)，切根蟲(chóng)，根蠅和線(xiàn)蟲(chóng)的土壤害蟲(chóng)會(huì)造成其產(chǎn)量的嚴(yán)重下降。在一些情況下，憑借化學(xué)農(nóng)藥會(huì)得到令人滿(mǎn)意的防治效果，但是防治土壤害蟲(chóng)的很多種主要產(chǎn)品受到有關(guān)當(dāng)局限制或撤銷(xiāo)的威脅。因此，開(kāi)發(fā)防治土壤害蟲(chóng)的生物防治劑是所期望的目標(biāo)。在開(kāi)發(fā)生物防治劑的過(guò)程中，要克服的最明顯的技術(shù)障礙可能是制劑?；谔K云金桿菌的產(chǎn)品除外，現(xiàn)存的大多數(shù)的生物防治劑都不能滿(mǎn)足效果，殘效期和低造價(jià)的要求(Rhodes，1990，AspectsofAppliedBiology24145-153)。將真菌用于土壤害蟲(chóng)防治的情況下更如此。到目前為止，只得到非常少的上述產(chǎn)品，通常在田間作過(guò)測(cè)試的制劑是基于簡(jiǎn)單的半固體發(fā)酵方法，如施用在谷粒上的菌落(Keller&Zimmermann，1989，239-270頁(yè)，inWildingetal.Insect-FungusInteractions.AcademicPress，London)，可選擇地，如Andersch等人，在1990.EP87116-508中所述的方法，使真菌在液體培養(yǎng)物中生長(zhǎng)成為菌絲團(tuán)，然后脫水并施用到土壤中，類(lèi)似的方法，如Krueger&Roberts所述，使用菌絲碎片(SocietyforInvertebratePathologyAnnualMeeting，1988，使用WO84/01089中所述的技術(shù))。將生物量的真菌在液體培養(yǎng)物中液面下發(fā)酵是較理想的，這是因?yàn)檫@種生產(chǎn)方法適合于現(xiàn)存的工業(yè)生產(chǎn)，且生產(chǎn)的費(fèi)用相對(duì)低。當(dāng)在液體培養(yǎng)物中生長(zhǎng)時(shí)，許多昆蟲(chóng)致病真菌，如白僵菌屬(Beauveria)，輪枝菌屬(Verticillium)，蛾霉菌屬(Nomuraea)，Tolypocladium屬，擬青霉菌屬(Paecilomyces)(Bartlett&Jaronski，1988.Pp.61-85inBurge.FungiinBiologicalControlSystems.ManchesterUniversityPress.Manchester)和綠僵菌屬(Metarnizium)(Andersch，1992.Pflanzenschutz-NachrictenBayer45129-142)會(huì)產(chǎn)生酵母狀的芽生孢子。令人遺憾的是，這些孢子結(jié)構(gòu)精細(xì)，并難于配制(Andersch，VideSupra)。有關(guān)成功地配制芽生孢子的描述并不多。Blachere等人，1973。在AnnZool.Ecol.anim.569-79中描述了一種通過(guò)在二氧化硅上干燥保存卵孢白僵菌(Beauveriatenella)芽生孢子的方法，但是其中不含有刺激真菌在土壤中生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物，結(jié)果所得的粉末狀物質(zhì)不適于以顆粒狀向土壤施用。另外，此干燥方法(在通風(fēng)爐中干燥5至36小時(shí))以工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)是不實(shí)用的。Fargues等人1979，Ann.Zool.Ecol.Anim.11247-257試圖配制的白僵菌的芽生孢子。盡管在冷凍條件下上述制劑可保持八個(gè)月的活力，可是即使在5℃下貯藏，該物質(zhì)在五個(gè)月內(nèi)即失效。Fargues等人，1983.J.Invert.Pathol.41，131-142探討了某些粘土的性質(zhì)對(duì)芽生孢子在土壤中活性擴(kuò)展的影響?？墒?，根據(jù)這些并不能生產(chǎn)出農(nóng)用制劑。Ward，1984.Pp.175-184inScher.AdvancesinPesticideFormulationTechnology.ACS.WashingtonDC.間接提到了選擇特殊的粘土配制昆蟲(chóng)致病真菌的繁殖體。曾經(jīng)被描述過(guò)的施用到土壤的真菌制劑是用于害蟲(chóng)防治目的外的，非芽生孢子形成的真菌的情況。例如Lewis&Papavizas，1987，PlantPathology36438-446描述的，通過(guò)藻酸鹽包囊的方法將木霉屬(Trichoderma)和膠霉屬(Gliocladium)的真菌混入顆粒劑中。Knudsen&Lin，1990.Phytopathology80724-727把營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)混入到這些類(lèi)似的真菌制劑中，加入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)會(huì)增加顆粒位點(diǎn)上菌絲的密度，但不能增加菌絲在土壤中擴(kuò)展的距離。由此可見(jiàn)，本發(fā)明的與土壤害蟲(chóng)致病真菌的芽生孢子混合的并能使真菌在土壤中生長(zhǎng)并繁殖的的農(nóng)用制劑對(duì)上述害蟲(chóng)的生物防治具有相當(dāng)大的價(jià)值。因此本發(fā)明提供了一種顆粒組合物，其中包含以芽生孢子形式存在的，殺蟲(chóng)活性量的真菌生物防治劑。除了芽生孢子之外，上述真菌芽生孢子的顆粒劑還包含選自菌絲體斷片，固體稀釋劑或支持物(本文下述稱(chēng)為“填料”)和施用后使真菌生長(zhǎng)和繁殖的復(fù)合營(yíng)養(yǎng)源的其它成分。另外，顆粒劑可含有其它物質(zhì)如防腐劑，抗氧劑，鉺料或引誘劑，和滲透調(diào)節(jié)劑。真菌接種物的生產(chǎn)是用活的繁殖體接種到如Sabouraud’s葡萄糖肉湯液體培養(yǎng)基上，繁殖體由如白僵菌屬，綠僵菌屬，擬青霉菌屬，蛾霉屬，Tolypocladium屬，多毛菌屬或輪枝菌屬中的一種真菌的分生孢子，芽生孢子或菌絲體組成。培養(yǎng)基被放在如燒瓶或發(fā)酵桶的容器中。然后在適合真菌生長(zhǎng)的條件下使培養(yǎng)物生長(zhǎng)幾天，接著通過(guò)離心或過(guò)濾收集生物量的，由芽生孢子和菌絲斷片混合物組成的真菌。從制備物中還可以除去水，例如加壓除水。填料例如可以是礦物土如高嶺土(陶土)，蒙脫石，硅藻土，硅石，漂土，等等。在組合物中使用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可以是細(xì)的植物粉，如以下實(shí)施例6中所例示的。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的選擇將根據(jù)在組合物中使用的真菌生物防治劑而變化。填料和營(yíng)養(yǎng)物可按所需比例一起混合，例如通過(guò)攪拌混合，而且它們還可與生物量的真菌混合。攪拌所得混合物直到獲得均勻的混合物。將水，優(yōu)選去離子水加入混合物直到其稠度適合于擠出產(chǎn)物。然后在壓力下擠出糊狀物以形成顆粒。顆?？梢允乔驙铙w。顆粒干燥后，例如在流動(dòng)床或強(qiáng)氣流下干燥后，接著可在室溫下貯藏直到應(yīng)用，例如在真空下，在氮?dú)鈼l件下，或在如硅膠的干燥劑存在下貯存。可將顆粒劑施用到土壤，或植物表面如玉米植株的輪生葉，此后在孢子形成前真菌借助菌絲的擴(kuò)展生長(zhǎng)，以增加真菌與敏感宿主相遇的可能性。本發(fā)明的另一方面是提供了一種防治對(duì)真菌生物防治劑敏感的土壤寄居害蟲(chóng)的方法，其中包含向土壤施用根據(jù)本發(fā)明的顆粒組合物。實(shí)施例1使用滅菌接種環(huán)，用事先已顯示出對(duì)黃瓜條葉甲(Diabroticabalteata)致病性的昆蟲(chóng)致病真菌球孢白僵菌(Beauveriabassiana)菌株的分生孢子對(duì)盛于250ml錐形瓶中的50mlSabouraud’s葡萄糖肉湯接種。接錐形瓶放在開(kāi)到200rpm的旋轉(zhuǎn)振蕩器上，在24℃的溫度下振蕩7天然后培養(yǎng)由芽生孢子和菌絲體斷片組成的混合物，其中含有大約95％的芽生孢子。在SorvallRC3C搖桶式旋轉(zhuǎn)器上以5000rpm，將生物量真菌離心10分鐘，然后在消毒蒸餾水中再次懸浮并再次離心兩次，在幾層手紙之間擠壓片狀沉淀物以除去過(guò)量的液體，使最終的含水量為75-85％。在杵和研罐中，以14∶5的重量比混合以制備由GTY粉(高嶺土)和Fulgel(漂土)組成的粘土混合物。然后以83∶17的重量比將其與芽生孢子/菌絲體的斷片的混合物一起研磨。以大約1∶5的重量比向混合物中加入去離子水，直到糊狀物的稠度適合擠出。加壓通過(guò)0.5mm的Endecoot篩擠出糊狀物。所得顆粒是球狀的，并在室溫下在流動(dòng)床上使之干燥25分鐘，然后將其貯藏在存有硅膠的真空包封的干燥器中。顆?；盍Φ臏y(cè)定是通過(guò)在0.05％Tween80中使顆粒均漿，并懸浮放置于含有0.05g/l氯霉素的Sabouraud’s葡萄糖瓊脂上。令人驚奇地是，發(fā)現(xiàn)顆粒干燥后仍保持活力，回收了2×107群落形成單元(cfu)/g。Tween80是含有聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單油酸酯的表面活性劑的注冊(cè)商標(biāo)。實(shí)施例2如上所述通過(guò)使真菌在含有500ml培養(yǎng)肉湯的1升錐形瓶中生長(zhǎng)六天而生產(chǎn)生物量的真菌。如實(shí)施例1中所述制備顆粒，只是在制造擠出糊狀物之前，通過(guò)以重量比50∶33∶17粘土混合物∶營(yíng)養(yǎng)物∶生物量真菌混合粘土混合物和生物量真菌與營(yíng)養(yǎng)物提供營(yíng)養(yǎng)源。在通風(fēng)櫥中將顆粒風(fēng)干大約16小時(shí)。土壤菌落是通過(guò)在田間容量的松蓋的通用塑料容器中將1g干燥顆粒放置在兩層5g田間土壤中間而測(cè)定的。在24℃培育18天后測(cè)量從顆粒層的徑向生長(zhǎng)，并且測(cè)評(píng)價(jià)孢子的形成。營(yíng)養(yǎng)源特別是大豆粉的存在能夠促進(jìn)生長(zhǎng)和孢子的形成。實(shí)施例3如實(shí)施例2所述的制備擠出顆粒，其含有或不含營(yíng)養(yǎng)物(33％豆粉)并含有按重量計(jì)濃度為1.7％，10％或17％的菌絲斷片或芽生孢子。如實(shí)施例1中所述生產(chǎn)主要由芽生孢子組成的接種物。通過(guò)使真菌在同樣的培養(yǎng)基和同樣的溫度下生長(zhǎng)，但不振蕩而生產(chǎn)主要由菌絲體組成的接種物。然后用去離子水沖洗菌絲體，在用Whatman1號(hào)濾紙過(guò)濾收集之前，均漿生成菌絲斷片。以按重量計(jì)1％或3％的劑量，向在塑料小盆中的土壤加入顆粒。土壤濕度調(diào)為23％。向8個(gè)盆中的每一盆播種一棵發(fā)芽的玉米種子，并同時(shí)用10個(gè)一齡的黃瓜條葉甲或玉米根葉甲(Dvirgifera)幼蟲(chóng)侵染。將盆在20℃下保持10天，然后評(píng)價(jià)幼蟲(chóng)的死亡率。結(jié)果示于表2，表明向顆粒中加入營(yíng)養(yǎng)源后，會(huì)增加所有種的死亡率，此次試驗(yàn)加入的是大豆粉。菌絲用Hy表示，芽生孢子用Bs表示。實(shí)施例4如實(shí)施例2中所述的生產(chǎn)主要由芽生孢子組成的接種物，除了真菌是生長(zhǎng)在含有400ml培養(yǎng)基的1升燒杯中。接種物生長(zhǎng)4天或7天。如實(shí)施例2中所述制備擠壓顆粒，擠壓后將顆粒在20℃的流化床干燥器上干燥8至30分鐘，若是最終水分含量＜3％的顆粒，則需要在20℃下干燥16分鐘并在30℃下干燥15分鐘。測(cè)定顆粒的水分含量，然后將顆粒真空包封在袋中并在實(shí)驗(yàn)室溫度(20-25℃)下貯藏六個(gè)月。結(jié)果示于表3。盡管真空包封后仍發(fā)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)的末期顆粒的水分含量已發(fā)生了變化，但很顯然干燥顆粒能夠提高貯藏穩(wěn)定性。有一些證據(jù)證明，對(duì)于干燥的顆粒生長(zhǎng)7天的真菌比生長(zhǎng)4天的真菌增加了穩(wěn)定性。實(shí)施例5如實(shí)施例4所述制備擠壓顆粒，其中含有按重量計(jì)33％的大豆粉，17％生物量真菌(生長(zhǎng)3天)，45％的填料(GTY，CalfloE，CelitePF或Celite500)和5％粘著劑(Fulgel，Borrebond或PEG40000)。不含粘著劑的顆粒含有按重量計(jì)50％的填料。將顆粒風(fēng)干，然后如實(shí)施例3所述對(duì)黃瓜條葉甲進(jìn)行生測(cè)，不同之處是以1％的重量比將顆?；烊胪寥溃⑶以谇秩?天后測(cè)定死亡率。在土壤中真菌的種群，用cfu/g表示，它是通過(guò)在Doberski和Tribe，1980，TransactionsoftheBritishMycologicalSociety74，95-100的選擇培養(yǎng)基上輔覆土壤懸浮液的稀釋液而測(cè)定的。結(jié)果示于表4。由于各種填料/粘著劑混合物具有類(lèi)似的作用，由此可推斷出，根據(jù)顆粒所需的物理性質(zhì)，各種填料和粘著劑可被代替。CalfloE，CelitePF和Celite500是從Celite(UK)Limited，LivingtouRoad，HassleNorthHumbersideHu13OEG得到的填料粉末產(chǎn)品的商品名。實(shí)施例6如實(shí)施例5中所述制備顆粒，以下述比例將營(yíng)養(yǎng)物與顆粒的其它成分混合33％營(yíng)養(yǎng)物，17％生物量真菌，45％GTY，5％Fulgel。測(cè)定了下述營(yíng)養(yǎng)源葵花籽粉，杏仁粉，綠豆粉，蔬菜蛋白質(zhì)組織(TVP)粉，大麥片粉，蘋(píng)果和香蕉烤谷糠粉，黑麥粉，大豆粉，麥芽和Hijiki海藻粉。干燥后，如實(shí)施例3中所述，用黃瓜條葉甲對(duì)顆粒進(jìn)行生物測(cè)定。在盆中以土壤量的1％和0.5％加入顆粒，7天后測(cè)定死亡率，加入0.1％顆粒的處理，在12天后測(cè)定死亡率。如實(shí)施例5中所述在作評(píng)價(jià)時(shí)，對(duì)真菌的繁殖體計(jì)數(shù)。將顆粒在實(shí)驗(yàn)室溫度下在部分真空條件下保存10個(gè)月，以研究貯藏穩(wěn)定性。結(jié)果示于表5和表6。從上述結(jié)果可以清楚地發(fā)現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)源不同其作用效果和顆粒的貯藏穩(wěn)定性就不同。從效果殘效期的結(jié)合來(lái)看最好的營(yíng)養(yǎng)源是葵花籽粉，杏仁粉和大豆粉。實(shí)施例7如實(shí)施例2中所述制備顆粒。在擠壓之前以按重量計(jì)33％的濃度將營(yíng)養(yǎng)源加入到混合物中。測(cè)試的營(yíng)養(yǎng)源是蕎麥粉，西谷粉，aduki豆粉，大麥片粉，鷹嘴豆粉，葵花籽粉，杏仁粉，黑米粉，角豆，細(xì)麥麩，全代蛋粉和全麥粗面粉。干燥后，通用塑料容器中，將1g的顆粒放在兩層5g的土壤中，調(diào)至田間容積(fieldcapacity)。在20℃培育31天后透過(guò)容器的透明壁評(píng)價(jià)徑向生長(zhǎng)和孢子形成。根據(jù)0至4的設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)目測(cè)評(píng)價(jià)孢子的形成。應(yīng)用五種不同的土壤源評(píng)價(jià)不同土壤類(lèi)型范圍的顆粒支持真菌生長(zhǎng)和孢子形成的能力。結(jié)果示于表7。上述證明，為了使真菌在土壤中生長(zhǎng)和形成孢子需要營(yíng)養(yǎng)源。與其它供試的材料相比，葵花籽粉和杏仁粉明顯地優(yōu)越。實(shí)施例8根據(jù)實(shí)施例5中的方法制備顆粒，不同之處是如下所述進(jìn)行的變化，在擠壓混合物之前使生物量真菌生長(zhǎng)四天。顆粒含按重量計(jì)17％生物量真菌，33％的營(yíng)養(yǎng)源(大豆粉或葵花籽粉)。加入濃度為5％的其它成分(PEG4000(分子量4000的聚乙二醇)和植物油，如豆油，玉米油或花生油)，剩余部分由GTY粉組成。將顆粒在實(shí)驗(yàn)室溫度下，在真空包封的干燥器中，貯藏12個(gè)月。貯藏后0，1，4，8和12個(gè)月測(cè)定活力。結(jié)果示于表8。在貯藏期間采用葵花籽粉制備的顆粒比用豆粉制備的顆粒穩(wěn)定。加入1％的葵花籽油，玉米油，花生油，或PEG會(huì)提高用豆粉制備的顆粒穩(wěn)定性。12個(gè)月后，如實(shí)施例3中所述，用黃瓜條葉甲對(duì)顆粒進(jìn)行生物測(cè)定。將按重量計(jì)0.5％和1％的顆?；烊胪寥乐?，分別在9天和8天后評(píng)價(jià)死亡率。結(jié)果示于表9。試驗(yàn)證明在12個(gè)月的貯藏期結(jié)束時(shí)，所有的顆粒都保持一定的活性，采用葵花籽粉，大豆粉＋PEG，和大豆粉＋花生油的顆粒在試驗(yàn)中活性最高。實(shí)施例9如實(shí)施例5中所述制備顆粒，不同的是生物量真菌生長(zhǎng)五天，并且顆粒含17％生物量真菌，33％葵花籽粉，和50％GTY/Fulgel。用未過(guò)篩的田間土壤(WisboroughGreen淤泥肥土)填充二個(gè)大聚丙烯魚(yú)池，在魚(yú)池的底部鋪上一層粗砂和沖洗過(guò)的白砂以幫助排水。在每個(gè)池中耕出兩道大約8cm寬，6cm深，90cm長(zhǎng)并間隔75cm的犁溝，在每個(gè)犁溝的底部播種二十顆甜玉米(品種Earliking)的種子。在未處理池中將從犁溝中移去的土直接放回，而在處理的池中每犁溝土與1.93g顆?；旌虾蠓呕?，在與種子直接接觸土壤層中顆粒的濃度最大。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中濕度保持在15-20％，播種一周后，每壟的幼苗數(shù)減至11。播種二周后在每池土壤的28個(gè)凹陷處每個(gè)放入5只新孵化的黃瓜條葉甲幼蟲(chóng)。一周后，如上述再向土中放入70只幼蟲(chóng)。播種后38天，測(cè)定植珠的高度，并從每個(gè)池子中移出土壤樣品。將土壤樣品暴露在60℃的溫度下18小時(shí)使菌絲和芽生孢子失活以確定孢子數(shù)。從14次重量樣品中計(jì)算孢子數(shù)，然后如實(shí)施例5中所述通過(guò)稀釋涂覆而測(cè)定。從土壤中移出植物，根據(jù)1-10的標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)根損傷，10為損傷最嚴(yán)重。移出植物后，用聚乙烯膜覆蓋土壤，以使其中包含的黃瓜條葉甲的成蟲(chóng)在17天內(nèi)羽化。將這些計(jì)算在內(nèi)并記錄下所有癥狀。結(jié)果示于表10。上述證實(shí)了，當(dāng)用商業(yè)上可接受的劑量向田間土壤中施用本顆粒時(shí)，本顆粒會(huì)導(dǎo)致真菌在土壤中建有效的種群，并在幾周內(nèi)保持該種群。實(shí)施例10如實(shí)施例5中所述制備顆粒，但有如下述的改變。真菌接種物生長(zhǎng)兩或七天。在混合前，將生物量的真菌在去離子水，6摩爾山梨醇，40％W/V的PET4000，或甘露糖醇和氯化鎂的混合物(每升去離子水中分別為74g和27g)浸泡兩小時(shí)；在去離子水中沖洗四次共20分鐘，并與含有大豆粉的顆?；旌稀？芍苯优渲撇缓袪I(yíng)養(yǎng)源的顆粒，這種顆粒不需要與滲透調(diào)節(jié)劑接觸。將顆粒樣品在實(shí)驗(yàn)室溫度下在干燥器中真空貯藏0、1、6和12個(gè)月。結(jié)果示于表11?？梢?jiàn)當(dāng)培養(yǎng)兩天的生物量真菌與大豆粉一起配制時(shí)的差的貯藏穩(wěn)定性，可通過(guò)在配制制劑之前用滲透調(diào)節(jié)劑處理生物量的真菌，或通過(guò)延長(zhǎng)以獲時(shí)間而克服。實(shí)施例11如實(shí)施例5中所述制備顆粒。在制備顆粒之前可用防腐劑抗壞血酸(0.5％)，生育酚(0.026％)或BHA/BHT(丁基化的羥基苯甲醚和丁基化的羥基甲苯1∶1的混合物(0.014％))改良豆粉的半成品。干燥后，或是將顆粒貯藏在真空包封的袋中或是貯藏在真空條件下硅膠存在的干燥器中。如實(shí)施例3中所述，制備后馬上和在實(shí)驗(yàn)室溫度下貯藏六個(gè)月后用黃瓜條葉甲對(duì)顆粒進(jìn)行生物測(cè)定。加入的顆粒是土壤量的0.5％，并在土壤中培育三天使得在加入幼蟲(chóng)前真菌生長(zhǎng)和孢子形成。侵染七天后評(píng)價(jià)死亡率。結(jié)果示于表12?？梢?jiàn)，加入防腐劑BHA/BHT可提高且最適條件下的貯藏穩(wěn)定性。表1</tables>表2表3表4對(duì)照死亡率8％表5<p>表6表7Champ.＝淤泥肥土Champaign，IL，USAPTM＝砂質(zhì)肥土PearTreeMeadow，Jealott’sHill，Berkshire，UKEA＝砂質(zhì)肥土EastAngliaFieldStation，Mildenhall，Suffolk，UKPent＝砂質(zhì)肥土PenfurzenField，Jealott’sHill，Berkshire，UKPeat＝市售泥炭堆肥RG=徑向生長(zhǎng)(mm)Sp.＝孢子形成0＝孢子形成，4＝大量孢子形成表8表9對(duì)照死亡率(混入0.5％)＝0％對(duì)照死亡率(混入1.0％)＝5％表10表11表12在0月對(duì)照死亡率8％，在六個(gè)月6％權(quán)利要求1.一種顆粒組合物，其中包含殺蟲(chóng)活性量的真菌生物防治劑，所述防治劑以芽生孢子的形式存在。2.根據(jù)權(quán)利要求1的顆粒組合物可選擇地包含一種或多種其它成分，該成分選自真菌生物防治劑的菌絲體斷片，固體稀釋劑或支持物和吱持真菌生長(zhǎng)和孢子形成的復(fù)合營(yíng)養(yǎng)源。3.根據(jù)權(quán)利要求2的顆粒組合物另外還可含有選自防腐劑，抗氧劑，鉺料或引誘劑和滲透調(diào)節(jié)劑的一或多種其它成分。4.根據(jù)權(quán)利要求1的顆粒組合物，其中真菌生物防治劑是昆蟲(chóng)病原體。5.根據(jù)權(quán)利要求4的顆粒組合物，其中昆蟲(chóng)病原體選自白僵菌屬(Beauveria)，輪枝菌屬(Verticillium)，蛾霉菌屬(Nomuraea)，多毛菌屬(Hirsutella)，Tolypocladium屬，擬青霉菌屬(Paecilomyces)和綠僵菌屬(Metarhizium)。6.根據(jù)權(quán)利要求5的顆粒組合物，其中昆蟲(chóng)致病菌是球孢白僵菌(Beauveriabassiana)。7.防治對(duì)真菌生物防治劑的作用敏感的土生有害昆蟲(chóng)的方法，其中包含向害蟲(chóng)存在或預(yù)期存在的土壤中施用根據(jù)權(quán)利要求1的顆粒組合物。8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中真菌生物防治劑是球孢白僵菌。9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中的害蟲(chóng)是葉甲屬(Diabroticaspp.)害蟲(chóng)。全文摘要一種包含殺蟲(chóng)活性量的真菌生物防治劑的顆粒組合物，所述的防治劑中存在有芽生孢子。文檔編號(hào)A01N63/04GK1121684SQ94191879公開(kāi)日1996年5月1日申請(qǐng)日期1994年12月14日優(yōu)先權(quán)日1993年12月29日發(fā)明者D·J·羅斯,J·方德林,J·T·波特申請(qǐng)人:曾尼卡有限公司