硫脲化合物用于抗煙草花葉病毒活性的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明的技術(shù)方案涉及化學(xué)化合物的抗植物病毒劑，具體地說是硫脲化合物用于 抗煙草花葉病毒活性的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 植物病毒廣泛分布于自然界中，它們對農(nóng)作物的生長造成嚴重的危害，進而對 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成重大損失，煙草花葉病毒（TMV)作為一種病原體能對多種作物造成 危害。據(jù)統(tǒng)計，它能侵染22種單子葉植物的約198種個體，能夠造成大約5 %到90% 不等的損失(Hari, V. ；Das, P. Ultra microscopic detection of plant viruses and their gene products. In plant disease virus control. Hadidi, A. ；Khetarpal, R. K.； Koganezawa, H. , Eds. ;APS Press: St. Paul, MN, 1998:417-427.)到目前為止，還沒有一種化 學(xué)農(nóng)藥能夠徹底保護作物免受TMV的侵害。同樣，也沒有一種藥物能夠完全治愈被TMV侵 害的作物。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中，病毒唑（Ribavirin)，作為一種比較成功的植物病毒抑制劑，被廣 泛的用于防治煙草花葉病毒造成的病害，但是，該藥物在500 yg/mL濃度下的對煙草花 葉病毒的離體活性、活體鈍化、活體治療和活體保護中的抑制率還不到50% ;從微生物發(fā) 酵產(chǎn)生的寧南霉素用藥量為500 y g/mL時對煙草花葉病毒的治療效果只有54%左右；文 獻[Mei-hang Chen, Zhuo Chen, Bao-an Song,氺Pinaki S. Bhadury, Song Yang, Xun-jian Cai,De-yu Hu, Wei Xue，Song Zeng. Synthesis and antiviral activities of chiral thiourea derivatives containing an a -aminophosphonate moiety. J. Agric.Food Chem.，2009, 57 (4)，1383-1388】報道了含a -膦酸酯的手性硫脲衍生物及其制備方 法和用途，其中部分化合物在濃度為500 y g/mL時對煙草花葉病毒的治療效果（抑 制率為54. 8% )，相同測試條件下，還低于對照藥寧南霉素（抑制率為56. 2% ) ;CN 200910102561. 1公開了含膦酸酯的手性雙硫脲衍生物及其制備方法和用途，相同測試 條件下，其中部分化合物在濃度為500 y g/mL時對煙草花葉病毒的治療效果（抑制率為 50.8%)還低于對照藥寧南霉素（抑制率為55.3%);文獻【閆志坤，蔡學(xué)建，楊璇，宋寶 安，陳卓，Pinaki S. Bhadury,胡徳禹，金林紅，薛偉，盧平.Synthesis and antiviral activities of chiral thiourea, Chinese Journal of Chemistry, 2009, 27, 593-601.)] 報道了含茚基手性硫脲化合物用藥量為500mg/L時，活體保護、活體鈍化和活體治療的 抑制率分別為57. 0 %，96. 4 %及55. 0 %，在相同的測試條件下，商品化品種寧南霉素為 55. 9%，96. 5%，53. 9 %，雖然保護和治療作用均稍高于對照藥劑寧南霉素，鈍化作用與寧 南霉素相當，但是該手性硫脲化合物（S)-l-(l-茚基）_3_苯基硫脲的的合成需要原料為 (S)-l-氨基茚烷（售價為580元左右/克）及苯基異硫氰酸酯，價格昂貴；總之本技術(shù) 領(lǐng)域中所用的手性硫脲化合物試劑一般價格都比較高；CN201410344605. 2公開了 3-芳 基-5-甲基丁內(nèi)酯化合物用作抗植物病毒劑的方法，其存在的缺陷也是對煙草花葉病毒的 離體活性、活體鈍化、活體治療和活體保護中的抑制率仍然較低（CN201410344605. 2中公 開的化合物，治療效果和保護效果最好的化合物3-(4_氟苯基）-5-甲基-Y - 丁內(nèi)酯的活 體治療和活體保護抑制率分別為57. 1%和60. 0%，在相同測試條件下商品化品種寧南霉 素的活體治療和活體保護抑制率分別為54%和64% )。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：提供硫脲化合物用于抗煙草花葉病毒活性的方 法，由此證明該類化合物用于防治煙草花葉病毒造成的病害的活性好于現(xiàn)有技術(shù)的化合物 和藥物，而且該類化合物生產(chǎn)成本低，可以在農(nóng)業(yè)上得到廣泛應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明解決該技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：硫脲化合物用于抗煙草花葉病毒活 性的方法，步驟如下：
[0006] A.所述的硫脲化合物為具有如下通式（I )所示結(jié)構(gòu)的化合物：
【主權(quán)項】
1.硫脲化合物用于抗煙草花葉病毒活性的方法，其特征在于步驟如下： A.所述的硫脲化合物為具有如下通式（I )所示結(jié)構(gòu)的化合物：
通式（I)所示結(jié)構(gòu)的化合物有包括Ia，Ib和I。三類，具體個別化合物如表1所示： 表1.具體的硫脲化合物

B.上述硫脲化合物用于抗煙草花葉病毒活性的方法，步驟如下： 第一步，煙草花葉病毒提純及濃度測定： 煙草花葉病毒提純及濃度測定參照南開大學(xué)元素所生測室編制煙草花葉病毒SOP規(guī) 范執(zhí)行，病毒粗提液經(jīng)2次聚乙二醇離心處理后，測定濃度，于4°C冷藏備用； 第二步，選定硫脲化合物藥劑溶液的配制： 稱量選定上述表1中所列硫脲化合物中的一個40mg作為原藥，然后在該原藥加入 0. 4mL DMF進行溶解，制得I X IO5 μ g/mL母液，再用質(zhì)量百分比濃度為1%。吐溫80水溶液 稀釋至測試濃度500 μ g/mL或100 μ g/mL，由此配制得所用硫脲化合物為表1中所列的硫脲 化合物藥劑溶液； 第三步，離體作用： 摩擦接種3 - 5葉期珊西煙適齡葉片，用流水沖洗，病毒濃度10 μ g/mL，收干后剪下，沿 葉中脈對剖，左右半葉分別浸于質(zhì)量百分比濃度為1%。的吐溫80水溶液及第二步配制得的 上述硫脲化合物的個別化合物藥劑溶液中，30min后取出，于適宜光照溫度下保濕培養(yǎng)，每 3片葉為1次重復(fù)，重復(fù)3次，3天后記錄病斑數(shù)，計算防效； 第四步，活體保護作用： 選長勢均勻一致的3 - 5葉期珊西煙，全株噴霧施第二步配制得的上述硫脲化合物的 個別化合物藥劑溶液，每處理3次重復(fù)，并設(shè)置質(zhì)量百分比濃度為1%。吐溫80水溶液對照， 24h后，葉面撒布500目的金剛砂，用毛筆蘸取病毒液，在全葉面沿支脈方向輕擦2次，葉片 下方用手掌支撐，病毒濃度10 μ g/mL，接種后用流水沖洗，3天后記錄病斑數(shù)，計算防效； 第五步，活體治療作用： 選長勢均勻一致的3 - 5葉期珊西煙，用毛筆全葉接種病毒，病毒濃度為10 μ g/mL，接 種后用流水沖洗，葉面收干后，全株噴霧施第二步配制得的上述硫脲化合物的個別化合物 藥劑溶液，每處理3次重復(fù)，并設(shè)置質(zhì)量百分比濃度為1%。吐溫80水溶液對照，3天后記錄 病斑數(shù)，計算防效； 第六步，活體鈍化作用： 選長勢均勻一致的3 - 5葉期珊西煙，將第二步配制得的上述硫脲化合物的個別化合 物藥劑溶液與等體積的病毒汁液混合鈍化30min后，摩擦接種，病毒濃度20 μ g/mL，接種后 即用流水沖洗，重復(fù)3次，設(shè)置質(zhì)量百分比濃度為1%。吐溫80水溶液對照，3天后數(shù)病斑數(shù)， 計算結(jié)果。
【專利摘要】本發(fā)明硫脲化合物用于抗煙草花葉病毒活性的方法，涉及化學(xué)化合物的抗植物病毒劑，該方法步驟如下：A.所述的硫脲化合物為具有如下通式(Ⅰ)所示結(jié)構(gòu)的化合物：B.上述硫脲化合物用于抗煙草花葉病毒活性的方法，步驟是：煙草花葉病毒提純及濃度測定；選定硫脲化合物藥劑溶液的配制；離體作用；活體保護作用；活體治療作用；活體鈍化作用。該類化合物用于防治煙草花葉病毒造成的病害的活性好于現(xiàn)有技術(shù)的化合物和藥物，而且該類化合物生產(chǎn)成本低，可以在農(nóng)業(yè)上得到廣泛應(yīng)用。
【IPC分類】A01N47-30, A01N47-32, A01N47-28, A01P1-00
【公開號】CN104522014
【申請?zhí)枴緾N201510013285
【發(fā)明人】盧愛黨, 陳建新, 蘇敏, 李銀輝, 韓健
【申請人】河北工業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2015年1月9日