一種鐵皮石斛生根壯苗專用培養(yǎng)基的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種鐵皮石斛苗專用培養(yǎng)基，尤其涉及一種鐵皮石斛生根壯苗專用培 養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002] 鐵皮石斛為蘭科石斛屬多年生草本植物，是一種十分珍貴的中藥材植物。但由于 鐵皮石斛生長條件十分苛刻，自然產(chǎn)量極少，加上農(nóng)民的過度采挖，致使野生資源已瀕臨絕 種，國內(nèi)市場供應(yīng)緊缺。近年來，很多研究者在鐵皮石斛栽培方面做了大量研究，鐵皮石斛 成分分離鑒定方而也有不少報道，同時利用組織培養(yǎng)培育鐵皮石斛也較多涉及，但是鐵皮 石斛仍存在增長率不高、移栽成活率低等許多問題。其中，生根壯苗是組培苗移栽成活的關(guān) 鍵因素，因此在組織培養(yǎng)過程中提高組培苗生根率和生根數(shù)量尤為重要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種鐵皮石斛生根壯苗專用培養(yǎng)基，可使無根鐵皮石斛無 菌試管幼苗生根率達到100%的同時，壯苗生根后的植株平均根數(shù)達到15-20條，植株生長 較快。
[0004] 本發(fā)明是通過如下方案實現(xiàn)的： 一種鐵皮石斛生根壯苗專用培養(yǎng)基，其制作步驟為： (1) 母液I、母液II及母液IV的配制：按母液I、II和IV配方表，分別稱量母液I、母液 II和母液IV所需的各種藥品，稱量完畢后，分別用300ml蒸餾水溶解，然后分別用蒸餾水定 容到IL，分別得到母液I、母液II及母液IV; (2)母液III的配制：按母液III的配方表，將FeSO4?7H20和Na2-EDTA?2H20稱好后分別 加入400ml蒸餾水，放到磁力加熱攪拌器上，一邊加熱，一邊不斷攪拌使它們充分溶解，然 后將Na2-EDTA?2H20溶液緩慢倒入FeSO4?7H20溶液中，使兩種溶液充分混合，最后用蒸餾 水定容到IL，得到母液III; (3) 母液V的配制：按母液V的配方表，將原料稱好后，先用3ml蒸餾水溶解，再用蒸餾 水定容至100mL，得到母液V; (4) 母液VI的配制：按母液VI的配方表，將原料稱好后，用100ml蒸餾水溶解，再用 蒸餾水定容至500mL，得到母液VI; (5) 配制培養(yǎng)基：分別量取母液I50ml，母液II、母液III、母液IV各5ml，母液V25ml母 液VIIOml放入燒杯中，再加入0. 8g的瓊脂粉，煮沸后調(diào)pH值至5. 8-6. 0,高壓滅菌，即得。
[0005] 其中馬齒莧提取物是通過如下方法得到的：取干燥的馬齒莧粉碎并過40目篩，再 用15倍質(zhì)量的體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇浸提5個小時，浸提溫度為KKTC，然后將浸提液濃縮 并烘干，得到粉末狀固體，即為馬齒莧提取物。
[0006] 其中南瓜粉是通過如下方法得到的：選擇皮較硬、肉質(zhì)呈桔紅色的南瓜洗凈、切 塊、去籽后自然風(fēng)干或曬干；然后把南瓜粉碎成細(xì)粉狀，過100目篩，把過篩后的粉末放入
【主權(quán)項】
1. 一種鐵皮石斛生根壯苗專用培養(yǎng)基，其特征在于：培養(yǎng)基中添加馬齒莧提取物、南 瓜粉、丙三醇、蘋果酸、鄰苯甲?；酋啺?、水蘇糖。
2. -種鐵皮石斛生根壯苗專用培養(yǎng)基，其特征在于：其中母液I的配方組成為=NH4NO3 33000mg、KNO3 38000mg、CaCl2 ? 2H20 8800mg、MgSO4 ? 7H20 7400mg、KH2PO4 3400mg;母液 II的配方組成為：KI166mg、H3BO3 1240mg、MnSO4 .4H20 4460mg、ZnSO4 *7H20 1720 mg、Na2MoO4 ? 2H20 50mg、CuSO4 ? 5H20 5mg、CoCl2 ? 6H20 5mg;母液III的配方組成為： FeSO4 ? 7H20 5560mg、Na2-EDTA? 2H20 7460mg;母液IV的配方組成為：肌醇 20000mg、煙 酸100mg、鹽酸批卩多醇100mg、鹽酸硫胺素20mg、甘氨酸400mg;母液V的配方組成為：蘋果酸 50-65mg、鄰苯甲?；酋啺?0-20mg、水蘇糖150-200mg、丙三醇10-20mg;母液VI的 配方組成為：馬齒莧提取物15000-20000mg、南瓜粉5000-10000mg。
3. 如權(quán)利要求2所述的一種鐵皮石斛生根壯苗專用培養(yǎng)基，其特征在于：母液V的配 方組成為：蘋果酸55mg、鄰苯甲?；酋啺?5mg、水蘇糖180mg、丙三醇15mg;母液VI的 配方組成為：馬齒莧提取物18000mg、南瓜粉8000mg。
4. 如權(quán)利要求2或3所述的一種鐵皮石斛生根壯苗專用培養(yǎng)基，其特征在于：制作步 驟為： (1) 母液I、母液II及母液IV的配制：按母液I、II和IV配方表，分別稱量母液I、母液II和母液IV所需的各種原料，稱量完畢后，分別用300ml蒸餾水溶解，然后分別用蒸餾水定 容到IL，分別得到母液I、母液II及母液IV; (2) 母液III的配制：按母液III的配方表，將FeSO4WH2O和Na2-EDTACH2O稱好后分別加 入400ml蒸餾水，一邊加熱，一邊不斷攪拌使它們充分溶解，然后將Na2-EDTA? 2H20溶液緩 慢倒入FeSO4 ? 7H20溶液中，使兩種溶液充分混合，最后用蒸餾水定容到IL，得到母液III; (3) 母液V的配制：按母液V的配方表，將原料稱好后，先用3ml蒸餾水溶解，再用蒸餾 水定容至100mL，得到母液V; (4) 母液VI的配制：按母液VI的配方表，將原料稱好后，用100ml蒸餾水溶解，再用 蒸餾水定容至500mL，得到母液VI; (5) 配制培養(yǎng)基：分別量取母液I50ml，母液II、母液III、母液IV各5ml，母液V25ml母 液VIIOml放入燒杯中，再加入0. 8g的瓊脂粉，煮沸后調(diào)pH值至5. 8-6. 0,高壓滅菌，即得； 其中馬齒莧提取物是通過如下方法得到的：取干燥的馬齒莧粉碎并過40目篩，再用15 倍質(zhì)量的體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇浸提5個小時，浸提溫度為KKTC，然后將浸提液濃縮并烘 干，得到粉末狀固體，即為馬齒莧提取物； 其中南瓜粉是通過如下方法得到的：選擇皮較硬、肉質(zhì)呈桔紅色的南瓜洗凈、切塊、去 籽后自然風(fēng)干或曬干；然后把南瓜粉碎成細(xì)粉狀，過100目篩，把過篩后的粉末放入烘箱， 溫度調(diào)到80°C，烘干2小時即得南瓜粉。
【專利摘要】一種鐵皮石斛生根壯苗專用培養(yǎng)基。我們發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中添加馬齒莧提取物、南瓜粉、丙三醇、蘋果酸、鄰苯甲酰磺酰亞胺、水蘇糖，無根鐵皮石斛無菌試管幼苗生根率達到100%，但生根后的平均根數(shù)僅為3-5根，且根粗較細(xì)；我們對母液V和母液VI的組成進行了調(diào)整，使母液V的組成為蘋果酸、鄰苯甲?；酋啺贰⑻K糖、丙三醇，母液VI的組成水馬齒莧提取物和南瓜粉，發(fā)現(xiàn)無根鐵皮石斛無菌試管幼苗生根率達到100%的同時，壯苗生根后的植株平均根數(shù)達到15-20條，且根系壯，植株生長較快。
【IPC分類】A01H4-00
【公開號】CN104542309
【申請?zhí)枴緾N201510062559
【發(fā)明人】王志軍, 朱向陽, 譚志明
【申請人】江西萬茂科技有限公司
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年2月6日