一種金邊虎尾蘭離體培養(yǎng)一步成苗培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種金邊虎尾蘭離體培養(yǎng)一步成苗培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，屬于植物組織 培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 虎尾蘭（Sansevieriatrifasciatavar.harnii)又稱虎皮蘭、千歲蘭，是龍舌蘭 科虎尾蘭屬，多年生常綠肉質(zhì)草本植物。原產(chǎn)非洲熱帶和印度，是一種能凈化室內(nèi)環(huán)境的草 本觀葉植物。其葉色美麗，似箭形的葉挺拔向上，適應(yīng)性強(qiáng)。
[0003] 金邊虎尾蘭常見的繁殖方式有葉插法、分株法等，這些常規(guī)的繁殖方法繁殖系數(shù) 低，培養(yǎng)周期較長，而且不易獲得大量的植株，且會(huì)出現(xiàn)品種退化現(xiàn)象，金邊虎尾蘭金邊性 狀易消失，影響觀賞質(zhì)量。組織培養(yǎng)已成為金邊虎尾蘭保持其優(yōu)良性狀且快速繁殖的方法。 具有繁殖系數(shù)高、保持原品種金邊性狀、避免種性分離、種苗不帶病毒、生長一致等優(yōu)點(diǎn)，從 而使種苗生產(chǎn)達(dá)到規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化和工廠化的目標(biāo)。
[0004] 傳統(tǒng)的組織培養(yǎng)的步驟一般是先誘導(dǎo)出愈傷組織，通過繼代，建立能傳代的愈傷 組織體系，然后誘導(dǎo)生芽、生根，形成完整幼苗。一步成苗法是指外植體在形成愈傷組織后， 不需要轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，而是直接在原培養(yǎng)基上分化，分化的順序通常是先根后芽， 直至形成健壯的全苗。它能在一步成苗培養(yǎng)基上直接分化出可移栽苗，簡化了育苗程序，縮 短了育苗周期，提高了培養(yǎng)效率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明為了解決問題，進(jìn)而提供了一種金邊虎尾蘭離體培養(yǎng)一步成苗培養(yǎng)基及培 養(yǎng)方法。
[0006] 本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題采取的技術(shù)方案是：方案一：以MS為基本培養(yǎng)基，添 加不同濃度的2,4_二氯苯氧乙酸、萘乙酸、激動(dòng)素組合，其中2,4_二氯苯氧乙酸的濃度為 0? 2mg/L、0. 4mg/L或 0? 6mg/L，萘乙酸的濃度為 0? 0mg/L、0.lmg/L或 0? 2mg/L，KT的濃度為 0? 5mg/L、LOmg/L或L5mg/L〇
[0007] 方案二：步驟一、配制虎尾蘭一步成苗培養(yǎng)基，并進(jìn)行滅菌處理；
[0008] 步驟二、取幼嫩無病蟲害的虎皮蘭葉片，用流水沖洗lh，75%酒精浸泡15s，0. 1% HgCl；^消毒劑處理5min,無菌水沖洗多次后，用解剖刀切成IcmXIcm塊狀；
[0009] 步驟三、將步驟二消毒滅菌過的外植體接種到苗培養(yǎng)基中，置于溫度25±2°C條件 下進(jìn)行培養(yǎng)，光照時(shí)間每天12-14小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000-30001x;
[0010] 步驟四、光照40-50天后，得虎皮蘭再生植株。
[0011] 本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明的培養(yǎng)基使虎尾蘭葉片在形成愈傷組織后，不需要 轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，而是直接在原培養(yǎng)基上分化成苗，為虎尾蘭的快速繁殖提供了一條 有效的途徑。
【附圖說明】
[0012] 圖1是是馴化移栽成功的組培苗。
【具體實(shí)施方式】
[0013]
【具體實(shí)施方式】一：本實(shí)施方式以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步描述和說 明。
[0014] -種金邊虎尾蘭離體培養(yǎng)一步成苗培養(yǎng)基，以MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度 的2,4_二氯苯氧乙酸、萘乙酸、激動(dòng)素組合，其中2,4_二氯苯氧乙酸的濃度為0. 2mg/L、 0? 4mg/L或 0? 6mg/L，萘乙酸的濃度為 0? 0mg/L、0.lmg/L或 0? 2mg/L，KT的濃度為 0? 5mg/L、 I.Omg/L或L5mg/L〇
[0015] 培養(yǎng)基最優(yōu)配方為2,4-二氯苯氧乙酸的濃度為0.211^/1，萘乙酸的濃度為0.111^/ L，KT的濃度為I.Omg/L。
[0016] 或培養(yǎng)基最優(yōu)配方為2,4-二氯苯氧乙酸的濃度為0.2mg/L，萘乙酸的濃度為 0? 2mg/L，KT的濃度為I. 5mg/L。
[0017]培養(yǎng)基40-50d后就可直接發(fā)育成完整植株，植株一次成苗率達(dá)到60%，，芽苗健 壯，根多而粗壯，移栽后成活率高。縮短了培養(yǎng)周期、簡化了培養(yǎng)程序，提高了出苗率、降低 了生產(chǎn)成本。
[0018] 因?yàn)樵撆囵B(yǎng)基能較好的誘導(dǎo)虎尾蘭葉片形成愈傷組織，愈傷組織淡黃綠色，小而 致密其誘導(dǎo)率高，而且一次成苗率達(dá)到60%，且芽苗健壯，根多而粗壯。
【具體實(shí)施方式】 [0019] 二：培養(yǎng)方法如下，步驟一、配制虎尾蘭一步成苗培養(yǎng)基，并進(jìn)行滅 菌處理；
[0020] 步驟二、取幼嫩無病蟲害的虎皮蘭葉片，用流水沖洗lh，75%酒精浸泡15s，0. 1% HgCl；^消毒劑處理5min,無菌水沖洗多次后，用解剖刀切成IcmXIcm塊狀；
[0021] 步驟三、將步驟二消毒滅菌過的外植體接種到苗培養(yǎng)基中，置于溫度25±2°C條件 下進(jìn)行培養(yǎng)，光照時(shí)間每天12-14小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000-30001x;
[0022] 步驟四、光照40-50天后，得虎皮蘭再生植株。
[0023] 采用下述試驗(yàn)驗(yàn)證本實(shí)施方式的效果：
[0024] 以MS為基本培養(yǎng)基，采用三因素三水平L9(34)的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，添加不同濃度 的2,4_二氯苯氧乙酸、萘乙酸、激動(dòng)素組合，蔗糖濃度為3%，瓊脂濃度為0.7%，pH值為 5. 8。2,4_二氯苯氧乙酸、萘乙酸、激動(dòng)素各取三個(gè)水平，其中2,4_二氯苯氧乙酸的濃度 為 0? 2mg/L、0. 4mg/L、0. 6mg/L，萘乙酸的濃度為 0? 0mg/L、0.Img/L、0. 2mg/L，KT的濃度為 0. 5mg/L、l. 0mg/L、l. 5mg/L，配制成9組不同的虎尾蘭一步成苗培養(yǎng)基，各組培養(yǎng)基激素配 比見表1。
[0025] 表1虎尾蘭一步成苗培養(yǎng)基配比正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)表L9 (34)
[0026]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種金邊虎尾蘭離體培養(yǎng)一步成苗培養(yǎng)基，其特征在于：以MS為基本培養(yǎng)基，添加 不同濃度的2,4_二氯苯氧乙酸、萘乙酸、激動(dòng)素組合，其中2,4_二氯苯氧乙酸的濃度為 0· 2mg/L、0. 4mg/L 或 0· 6mg/L，萘乙酸的濃度為 0· 0mg/L、0. lmg/L 或 0· 2mg/L，KT 的濃度為 0· 5mg/L、L Omg/L 或 L 5mg/L〇
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種金邊虎尾蘭離體培養(yǎng)一步成苗培養(yǎng)基優(yōu)化方法，其特征在 于步驟二的培養(yǎng)基配方為2,4-二氯苯氧乙酸的濃度為0. 2mg/L，萘乙酸的濃度為0. lmg/L， KT的濃度為I. Omg/L。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種金邊虎尾蘭離體培養(yǎng)一步成苗培養(yǎng)基優(yōu)化方法，其特征在 于：步驟二中培養(yǎng)基配方為2,4-二氯苯氧乙酸的濃度為0. 2mg/L，萘乙酸的濃度為0. 2mg/ L，KT的濃度為I. 5mg/L。
4. 一種利用權(quán)利要求1所述培養(yǎng)基使虎尾蘭一步成苗的培養(yǎng)方法，其特征在于： 步驟一、配制虎尾蘭一步成苗培養(yǎng)基，并進(jìn)行滅菌處理； 步驟二、取幼嫩無病蟲害的虎皮蘭葉片，用流水沖洗lh，75%酒精浸泡15s，0. 1 % HgCl2 的消毒劑處理5min,無菌水沖洗多次后，用解剖刀切成IcmX Icm塊狀； 步驟三、將步驟二消毒滅菌過的外植體接種到苗培養(yǎng)基中，置于溫度25±2°C條件下進(jìn) 行培養(yǎng)，光照時(shí)間每天12-14小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000-30001x ; 步驟四、光照40-50天后，得虎皮蘭再生植株。
【專利摘要】一種金邊虎尾蘭離體培養(yǎng)一步成苗培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明解決金邊虎尾蘭常規(guī)繁殖方法系數(shù)低，生長緩慢，難以形成規(guī)?；a(chǎn)的問題。所述方法是按下述步驟進(jìn)行的：步驟一、培養(yǎng)基消毒滅菌；步驟二、金邊虎尾蘭葉片幼苗消毒滅菌；步驟三、將步驟二消毒滅菌過的外植體接種到苗培養(yǎng)基中，置于溫度25±2℃條件下進(jìn)行培養(yǎng)，光照時(shí)間每天12-14小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000-3000lx；步驟四、光照40-50天后，得虎皮蘭再生植株。本發(fā)明用于金邊虎尾蘭離體的組織培養(yǎng)。
【IPC分類】A01H4-00
【公開號(hào)】CN104604686
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510053903
【發(fā)明人】李媛, 侯可雷
【申請(qǐng)人】李媛
【公開日】2015年5月13日
【申請(qǐng)日】2015年1月31日