一種用于誘導(dǎo)桉樹抗青枯病的混合物的制作方法
【專利說明】
[0001] 本發(fā)明是在"十二五"農(nóng)村領(lǐng)域國(guó)家科技計(jì)劃課題"南方短周期工業(yè)用材林病蟲 害控制技術(shù)"（2012BAD19B0802);廣東省林業(yè)科技創(chuàng)新專項(xiàng)（2010KJCX015-01)的資助下完 成。
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明是一種用于控制桉樹青枯病的誘導(dǎo)劑，屬于森林保護(hù)的林木病害防治技術(shù) 領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0003]按樹青枯病是由爺拉氏菌（Ralstonia solanacearum(Smith)Yabuuchi et al.) 引起的一種系統(tǒng)性的維管束病害，在巴西、澳大利亞、烏干達(dá)、剛果及南非的一些國(guó)家都有 報(bào)道，中國(guó)最早發(fā)現(xiàn)于廣西的柳桉（E. saliero Sm.)和巨桉（E. grandis Hillex Maid.)等 幼樹上，它的主要寄主還有巨尾桉（E.grandisXE.urophylla)、尾葉桉（E.urophylla)、尾 巨桉（E. urophyllaXE. grandis)及朽1檬桉（E. citriodora)等多種桉樹，以栽培面積最大 的巨尾桉和尾葉桉發(fā)病最嚴(yán)重，在我國(guó)廣東、云南、海南、福建和臺(tái)灣等省時(shí)有發(fā)生和流行。 在桉樹青枯病流行年份，感病桉樹品種（系）當(dāng)年新造幼林發(fā)病率達(dá)20 %-40%，高感桉樹 品種（系）高達(dá)60%以上，給桉樹經(jīng)營(yíng)者造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，威脅著桉樹產(chǎn)業(yè)的持續(xù)發(fā) 展。隨著連片桉樹速生林栽培面積的不斷增加，桉樹青枯病已成為當(dāng)前發(fā)展桉樹的潛在障 礙。
[0004] 桉樹同其它植物一樣，存在著抵抗大多數(shù)病原物侵染的遺傳潛力，它們?cè)诔B(tài)下 不表達(dá)，但通過一定的刺激和處理則可被激活而表現(xiàn)出來。因此，人為增強(qiáng)現(xiàn)有和潛在速生 桉樹無性系的抗性，以使它們對(duì)青枯菌產(chǎn)生足夠的抵抗能力即誘導(dǎo)抗性，將是防治桉樹青 枯病的一個(gè)很有希望的新途徑。在防治方面，前人使用水楊酸和芳香酸等誘導(dǎo)劑對(duì)桉樹抗 青枯病進(jìn)行了一些研究，收到一定的成效，但還未找到有效控制桉樹青枯病的防治方法。盡 管國(guó)內(nèi)外對(duì)桉樹青枯病的防治進(jìn)行了大量研究，但仍存在不足。如利用生物源誘導(dǎo)劑及化 學(xué)誘導(dǎo)劑組合對(duì)桉樹青枯病的防治技術(shù)未見報(bào)道。本發(fā)明通過多種具有誘抗活性的化學(xué)物 質(zhì)和生物源物質(zhì)以及它們的組合對(duì)桉樹青枯病誘導(dǎo)抗性情況,經(jīng)過室內(nèi)外試驗(yàn)篩選得到對(duì) 桉樹抗青枯病有較強(qiáng)誘導(dǎo)效果的誘導(dǎo)劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有桉樹青枯病防治技術(shù)的不足，提供一種配制方便、使用簡(jiǎn)單、持效 期長(zhǎng)、對(duì)環(huán)境友好和不使病害產(chǎn)生抗性的誘導(dǎo)劑。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取如下技術(shù)方案：通過應(yīng)用化學(xué)和生物源誘導(dǎo)劑單獨(dú) 或混合對(duì)桉樹苗進(jìn)行誘導(dǎo)處理，篩選出對(duì)桉樹抗青枯病有較強(qiáng)誘導(dǎo)效果的誘導(dǎo)劑，即苯并 噻二唑（BTH)和無致病力青枯菌菌株（AXY22)的混合劑，所述苯并噻二唑（BTH)和無致病 力青枯菌菌株（AXY22)的體積比為1 :1。
[0007] 本發(fā)明的有益效果是：利用上述混合誘導(dǎo)劑處理桉樹幼苗，能顯著提高桉樹對(duì)青 枯病的抗性，既經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、易行，又對(duì)環(huán)境友好和不致該病產(chǎn)生抗性而可持續(xù)應(yīng)用，達(dá)到減 災(zāi)的目的。
【具體實(shí)施方式】
[0008] 實(shí)施例1:
[0009] 用土豆汁培養(yǎng)基，接種無致病力青枯菌菌株（AXY22)，經(jīng)充分培養(yǎng)后，配制成所需 要的濃度，并與苯并噻二唑（BTH)按體積比為1 :1充分混合，加入0.05%的吐溫20,噴霧 桉樹幼苗，用〇. 05 %的吐溫20水溶液作對(duì)照，每隔7噴霧一次，3次誘導(dǎo)后，挑戰(zhàn)接種青枯 病，待接種后5d、10d、15d和20d調(diào)查對(duì)照和處理幼苗的相對(duì)病害強(qiáng)度，計(jì)算各處理的誘抗 效果。誘導(dǎo)物誘導(dǎo)桉樹對(duì)青枯病的防效見表1，表中數(shù)據(jù)為3次平行的平均值，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏 差小于10%。 表1
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 混合物用于誘導(dǎo)桉樹抵抗青枯病的用途，其特征在于其由苯并噻二唑（BTH)和無致 病力青枯菌菌株（AXY22)組成。
2. 權(quán)利要求1的用途，其中所述苯并噻二唑（BTH)配制成lmmol/L的溶液，其獲得方法 為：將適量苯并噻二唑（BTH)加入到蒸餾水中，并逐滴加入1% NaOH，調(diào)節(jié)pH值至中性，配 成濃度為50mmol/L的母液，保存在4°C冰箱中，使用時(shí)稀釋至lmmol/L的溶液。
3. 權(quán)利要求1的用途，其中所述無致病力青枯菌菌株（AXY22)配制成107cfu/mL的懸 浮液，其獲得方法為：將無致病力青枯菌菌株（AXY22)接種于NA培養(yǎng)基上30°C培養(yǎng)48小 時(shí)，刮下菌體，用水稀釋成濃度為10 7cfu/mL的懸浮液。
4. 權(quán)利要求1的用途，其中所述無致病力青枯菌菌株（AXY22)獲得方法為：將有致病 力的青枯菌菌株（AXY2)接種于NA培養(yǎng)基上30°C培養(yǎng)48小時(shí)，刮下菌體，用無菌水稀釋 成10 8cfu/mL的懸浮液，在30瓦紫外燈下相距30厘米處照射2分鐘。再將懸浮液接種于 TTC培養(yǎng)基上30°C培養(yǎng)48小時(shí)，挑取呈規(guī)則圓形，奶油狀，均勻的深紅色，白邊窄干燥型單 菌落，再在平板上連續(xù)純化，直至整個(gè)平板均為無致病力菌落以獲得無致病力青枯菌菌株 (AXY22)。
5. 權(quán)利要求2、3項(xiàng)的用途，其中所述lmmol/L的苯并噻二唑（BTH)溶液、IO7CfVmL的 無致病力青枯菌菌株（AXY22)懸浮液按體積比為1 :1混合，加入滲透劑，幫助其在桉樹表面 吸附，均勻噴霧與桉樹表面，間隔一段時(shí)間噴霧一次。經(jīng)過該方法處理的桉樹對(duì)青枯病有一 定的防效。
6. 權(quán)利要求5的用途，其中所述加入滲透劑是吐溫20,使用劑量為萬分之五。
【專利摘要】本發(fā)明為一種以苯并噻二唑(BTH)和無致病力青枯菌菌株(AXY22)按體積比1：1混配而成的混合物來誘導(dǎo)桉樹抗青枯病的方法。利用該種混合物誘導(dǎo)劑噴霧處理桉樹幼苗，輔以吐溫作為滲透劑，能顯著提高桉樹對(duì)青枯病的抗性，既經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、易行，又對(duì)環(huán)境友好和不致該病產(chǎn)生抗性而可持續(xù)應(yīng)用，達(dá)到減災(zāi)的目的。
【IPC分類】A01N43-828, A01N63-00, A01P1-00
【公開號(hào)】CN104663720
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201310615999
【發(fā)明人】李波, 王軍, 孫思
【申請(qǐng)人】華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年6月3日
【申請(qǐng)日】2013年11月28日