一種肋柱花種子無菌萌發(fā)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物種子萌發(fā)方法，特別是一種肋柱花種子無菌萌發(fā)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]肋柱花為龍膽科植物肋柱花Lomatogoniumr otatum(L.) Fries ex Nym.的干燥全草，分布于內(nèi)蒙古、黑龍江等地，為內(nèi)蒙古自治區(qū)蒙藥道地藥材。味苦，性寒、鈍、糙、輕、燥。具有平息“協(xié)日”、清熱、健胃、愈傷的功效。用于“協(xié)日”熱、瘟疫、流感、傷寒、中暑頭熱、肝膽熱、黃疸、胃“協(xié)日”、傷熱等癥。肋柱花為蒙醫(yī)傳統(tǒng)要藥，蒙藥名哈比日根一地格達(dá)，應(yīng)用廣泛，在肋柱花四味湯散、利膽八味散、地格達(dá).蘇木湯、伊赫哈日十二味散、土木香十味湯散等復(fù)方中用作主藥或輔藥，應(yīng)用歷史悠久，為蒙古族人民身體健康做出過巨大貢獻(xiàn)，在蒙醫(yī)藥中有著不可替代的地位。由于肋柱花藥材目前100%來源野生資源，再加之人為的干擾和盲目采挖，其破壞極其嚴(yán)重，肋柱花的野生資源蘊(yùn)藏量正在逐年銳減，大量資源瀕臨枯竭，野生資源越來越無法滿足人們的需要，因此，保護(hù)和擴(kuò)大繁殖栽培這一珍稀物種已刻不容緩。
[0003]在初步的繁殖育苗工作中發(fā)現(xiàn)，肋柱花的種子萌發(fā)極其困難，嚴(yán)重制約了種苗的供應(yīng)與品質(zhì)。通過組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)種苗已經(jīng)是成為多種植物種苗生產(chǎn)的有效途徑，但肋柱花種子細(xì)小，在開展肋柱花的組織培養(yǎng)研宄時，常因消毒過度導(dǎo)致種子損傷而無法萌發(fā)，成為了制約肋柱花通過組織培養(yǎng)方式大量生產(chǎn)種苗的關(guān)鍵因素。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種肋柱花種子無菌萌發(fā)的方法，它能夠提高肋柱花種子在無菌條件下萌發(fā)，為通過組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)肋柱花組培苗奠定基礎(chǔ)。
[0005]本發(fā)明通過以下技術(shù)方案達(dá)到上述目的:一種肋柱花種子無菌萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
[0006](I)種子消毒:將肋柱花種子沖洗干凈，放入20-50%的84消毒液中浸泡消毒5-15分鐘，再用無菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；
[0007](2)無菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時間為12?14小時/天的條件下培養(yǎng)15天，種子萌發(fā)獲得無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8ο
[0008]本發(fā)明的突出優(yōu)點(diǎn)在于:
[0009](I)采用所述的肋柱花種子消毒方法消毒，對種子的損傷較小，培養(yǎng)后種子易于萌發(fā)。
[0010](2)采用所述的肋柱花種子無菌萌發(fā)方法進(jìn)行種子萌發(fā)培養(yǎng)，具有種子萌發(fā)時間短，發(fā)芽率高的特點(diǎn)。
[0011](3)本發(fā)明還具有操作簡單、方便快捷、成本低等突出優(yōu)點(diǎn)，通過組織培養(yǎng)途徑切實(shí)有效地保護(hù)及促進(jìn)肋柱花資源的可持續(xù)利用。
【具體實(shí)施方式】
[0012]下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說明。
[0013]實(shí)施例1
[0014]一種肋柱花種子無菌萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
[0015](I)種子消毒:將肋柱花種子沖洗干凈，放入20%的84消毒液中浸泡消毒15分鐘，再用無菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；
[0016](2)無菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時間為12?14小時/天的條件下培養(yǎng)15天，種子萌發(fā)獲得無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，發(fā)芽率為96%。
[0017]實(shí)施例2
[0018]一種肋柱花種子無菌萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
[0019](I)種子消毒:將肋柱花種子沖洗干凈，放入30%的84消毒液中浸泡消毒8分鐘，再用無菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；
[0020](2)無菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時間為12?14小時/天的條件下培養(yǎng)15天，種子萌發(fā)獲得無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，發(fā)芽率為100%。
[0021]實(shí)施例3
[0022]一種肋柱花種子無菌萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
[0023](I)種子消毒:將肋柱花種子沖洗干凈，放入40%的84消毒液中浸泡消毒6分鐘，再用無菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；
[0024](2)無菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時間為12?14小時/天的條件下培養(yǎng)15天，種子萌發(fā)獲得無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，發(fā)芽率為93%。
[0025]實(shí)施例4
[0026]一種肋柱花種子無菌萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
[0027](I)種子消毒:將肋柱花種子沖洗干凈，放入50%的84消毒液中浸泡消毒5分鐘，再用無菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；
[0028](2)無菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時間為12?14小時/天的條件下培養(yǎng)15天，種子萌發(fā)獲得無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，發(fā)芽率為90%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種肋柱花種子無菌萌發(fā)的方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)種子消毒:將肋柱花種子沖洗干凈，放入20-50%的84消毒液中浸泡消毒5-15分鐘，再用無菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子； (2)無菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001uX，光照時間為12?14小時/天的條件下培養(yǎng)15天，種子萌發(fā)獲得無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8。
【專利摘要】一種肋柱花種子無菌萌發(fā)的方法，包括如下步驟：(1)將肋柱花的種子沖洗干凈，放入20-50％的84消毒液中浸泡消毒5-15分鐘，再用無菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；(2)將步驟(1)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23～27℃，光照強(qiáng)度1500lux，光照時間為12～14小時/天的條件下培養(yǎng)15天，種子萌發(fā)獲得無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8。采用本發(fā)明所述的無菌萌發(fā)方法，發(fā)芽率達(dá)到90～100％，有效地解決了肋柱花組織培養(yǎng)種子萌發(fā)困難的問題，為實(shí)現(xiàn)肋柱花資源的可持續(xù)利用奠定了基礎(chǔ)。
【IPC分類】A01C1-00, A01H4-00
【公開號】CN104770102
【申請?zhí)枴緾N201510176511
【發(fā)明人】韋坤華, 李旻輝, 王曉峰, 李林軒, 繆劍華, 朱虹, 韋范, 肖冬, 韋瑩, 李翠
【申請人】廣西壯族自治區(qū)藥用植物園
【公開日】2015年7月15日
【申請日】2015年4月14日