一種尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物種子萌發(fā)方法，特別是一種尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]尖葉假龍膽(Gentianellaacuta(Michx.)Hulten)，為龍膽科(Gentiananceae)假龍膽屬(Gentianella Moench.)植物，又名苦龍膽，藥名為阿古特一其其格，為龍膽科一年生草本植物，全草入藥。廣泛分布于我國(guó)河北、東北、內(nèi)蒙古、山西、山東等地區(qū)，蘇聯(lián)、蒙古、北美洲也有分布。多用于蒙、藏醫(yī)學(xué)中，蒙藥中稱為“阿古特-其其格”，具有清熱解毒的功效，是治療黃疸性肝炎、頭痛、發(fā)燒等的主藥。鄂溫克族和鄂倫春族的獵民長(zhǎng)期用其治療心律失常等心臟病且效果顯著，是該屬唯一一種具有治療心臟病作用的植物，在蒙醫(yī)藥中有著不可替代的地位。
[0003]近年來(lái)，由于尖葉假龍膽藥用價(jià)值的提高，市場(chǎng)需求不斷增加，而尖葉假龍膽藥材目前100%來(lái)源野生資源，因此出現(xiàn)供不應(yīng)求、過(guò)渡采挖現(xiàn)象，致使野生資源蘊(yùn)藏量日趨減少，資源瀕臨枯竭。為了緩解資源短缺與開(kāi)發(fā)利用之間日益增大的矛盾，開(kāi)展人工種植是一種最有效的途徑。在繁殖育苗工作中發(fā)現(xiàn)，尖葉假龍膽在播種過(guò)程中存在發(fā)芽率低、發(fā)芽不整齊等情況，嚴(yán)重制約著尖葉假龍膽的種苗質(zhì)量。通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)種苗已經(jīng)是成為多種植物種苗生產(chǎn)的有效途徑，但在開(kāi)展尖葉假龍膽的組織培養(yǎng)研宄時(shí)，無(wú)菌種子難以萌發(fā)成為了制約尖葉假龍膽通過(guò)組織培養(yǎng)方式大量生產(chǎn)種苗的關(guān)鍵因素。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)的方法，它能夠提高尖葉假龍膽種子在無(wú)菌條件下萌發(fā)，為通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)尖葉假龍膽組培苗奠定基礎(chǔ)。
[0005]本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案達(dá)到上述目的:一種尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
[0006](I)種子消毒:將尖葉假龍膽的種子沖洗干凈，放入20-50%的84消毒液中浸泡消毒5-20分鐘，再用無(wú)菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；
[0007](2)無(wú)菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為12?14小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，種子萌發(fā)獲得無(wú)菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8ο
[0008]本發(fā)明的突出優(yōu)點(diǎn)在于:
[0009](I)采用所述的尖葉假龍膽種子消毒方法消毒，對(duì)種子的損傷較小，培養(yǎng)后種子易于萌發(fā)。
[0010](2)采用所述的尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)方法進(jìn)行種子萌發(fā)培養(yǎng)，具有種子萌發(fā)時(shí)間短，發(fā)芽率高的特點(diǎn)。
[0011](3)本發(fā)明還具有操作簡(jiǎn)單、方便快捷、成本低等突出優(yōu)點(diǎn)，對(duì)通過(guò)組織培養(yǎng)途徑切實(shí)有效地保護(hù)及促進(jìn)尖葉假龍膽資源的可持續(xù)利用具有重大應(yīng)用價(jià)值。
【具體實(shí)施方式】
[0012]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說(shuō)明。
[0013]實(shí)施例1
[0014]一種尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
[0015](I)種子消毒:將尖葉假龍膽的種子沖洗干凈，放入20%的84消毒液中浸泡消毒20分鐘，再用無(wú)菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；
[0016](2)無(wú)菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為12?14小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，種子萌發(fā)獲得無(wú)菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，發(fā)芽率為85%。
[0017]實(shí)施例2
[0018]一種尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
[0019](I)種子消毒:將尖葉假龍膽的種子沖洗干凈，放入30%的84消毒液中浸泡消毒10分鐘，再用無(wú)菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；
[0020](2)無(wú)菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為12?14小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，種子萌發(fā)獲得無(wú)菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，發(fā)芽率為92%。
[0021]實(shí)施例3
[0022]一種尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
[0023](I)種子消毒:將尖葉假龍膽的種子沖洗干凈，放入50%的84消毒液中浸泡消毒5分鐘，再用無(wú)菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；
[0024](2)無(wú)菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為12?14小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，種子萌發(fā)獲得無(wú)菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，發(fā)芽率為88%。
[0025]實(shí)施例4
[0026]一種尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
[0027](I)種子消毒:將尖葉假龍膽的種子沖洗干凈，放入40%的84消毒液中浸泡消毒8分鐘，再用無(wú)菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；
[0028](2)無(wú)菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為12?14小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，種子萌發(fā)獲得無(wú)菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為
5.8，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，發(fā)芽率為95%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)的方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)種子消毒:將尖葉假龍膽的種子沖洗干凈，放入20-50%的84消毒液中浸泡消毒5-20分鐘，再用無(wú)菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子； (2)無(wú)菌萌發(fā):將步驟(I)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23?27°C，光照強(qiáng)度15001uX，光照時(shí)間為12?14小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，種子萌發(fā)獲得無(wú)菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8。
【專利摘要】一種尖葉假龍膽種子無(wú)菌萌發(fā)的方法，包括如下步驟：(1)將尖葉假龍膽的種子沖洗干凈，放入20-50％的84消毒液中浸泡消毒5-20分鐘，再用無(wú)菌蒸餾水沖洗3次后獲得消毒種子；(2)將步驟(1)獲得的消毒種子接種到MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為23～27℃，光照強(qiáng)度1500lux，光照時(shí)間為12～14小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，種子萌發(fā)獲得無(wú)菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8。采用本發(fā)明所述的無(wú)菌種子萌發(fā)方法，發(fā)芽率達(dá)到85-95％，有效地解決了尖葉假龍膽組織培養(yǎng)種子萌發(fā)困難的問(wèn)題，為實(shí)現(xiàn)尖葉假龍膽資源的可持續(xù)利用奠定了基礎(chǔ)。
【IPC分類(lèi)】A01H4-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104770299
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510176785
【發(fā)明人】韋坤華, 李旻輝, 王曉峰, 李林軒, 繆劍華, 朱虹, 韋范, 徐建平, 張樂(lè), 王一諾
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)藥用植物園
【公開(kāi)日】2015年7月15日
【申請(qǐng)日】2015年4月14日