結(jié)合瓶外生根技術(shù)的月季組培快繁的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及月季的繁殖技術(shù)，具體涉及一種月季組培瓶?jī)?nèi)增殖加瓶外生根的快繁育苗方法。
【背景技術(shù)】
[0002]月季為薔薇科薔薇屬多年生灌木，原產(chǎn)于我國，是我國十大名花之一，也是世界四大鮮切花之一，月季具有花色豐富、花期長、適應(yīng)性強(qiáng)、管理容易等特點(diǎn)，是園林綠化和鮮花市場(chǎng)上十分重要的材料，具有極高的觀賞價(jià)值和商業(yè)價(jià)值。目前月季繁殖技術(shù)多采用扦插、嫁接、壓條等方法，受取材及繁育時(shí)節(jié)的限制，不能滿足工廠化大生產(chǎn)發(fā)展的需要。
[0003]經(jīng)過對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的檢索發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有月季組培存在增殖系數(shù)低，芽的持續(xù)增殖能力差，同時(shí)主要采取瓶?jī)?nèi)生根技術(shù)，存在繁殖速率低、成本高的缺陷。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種結(jié)合瓶外生根技術(shù)的月季組培快繁的方法。本發(fā)明建立了一種建立穩(wěn)定高效的組培快繁體系，是月季組培瓶?jī)?nèi)增殖加瓶外生根的快繁育苗方法；利用組培技術(shù)繁殖月季具有速度快，質(zhì)量高，遺傳穩(wěn)定性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)。而采用瓶外生根技術(shù)，可大大降低生產(chǎn)成本，進(jìn)一步提高繁苗速率；在本專利技術(shù)下得到的再生苗可不經(jīng)煉苗直接進(jìn)行瓶外生根，繁殖快、操作簡(jiǎn)單、效率高、成本低；能夠有效提高苗木繁殖速度。
[0005]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
[0006]本發(fā)明涉及一種結(jié)合瓶外生根技術(shù)的月季組培快繁的方法，所述方法包括如下步驟:
[0007]I)以月季半木質(zhì)化新梢為外植體制備成莖段；
[0008]2)將莖段接種到含有MS培養(yǎng)基、6-BA、NAA、蔗糖和瓊脂的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，繼代兩到三次，然后切取新芽轉(zhuǎn)入含有MS培養(yǎng)基、6-BA、CPPU、NAA、蔗糖和瓊脂的增殖培養(yǎng)基進(jìn)行增殖培養(yǎng)；
[0009]3)增殖后的芽苗不必經(jīng)過煉苗，直接扦插于復(fù)合基質(zhì)上，實(shí)現(xiàn)瓶外生根。
[0010]優(yōu)選的，所述的月季半木質(zhì)化新梢經(jīng)消毒處理且優(yōu)選為當(dāng)年生長初期的月季新梢。
[0011]優(yōu)選的，所述莖段具有至少一個(gè)腋芽，且莖段底部預(yù)先剪除2?3毫米。
[0012]優(yōu)選的，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的組分(每升)為:MS培養(yǎng)基、6-BA 2.0mg/L、NAA
0.lmg/L、蔗糖30g/L以及瓊脂6.5g/L，該培養(yǎng)基的pH為5.4?5.6。
[0013]優(yōu)選的，所述增殖培養(yǎng)基的組分(每升)為:MS培養(yǎng)基、6-BA 3.0mg/L, CPPU
1.0mg/L NAA 0.lmg/L、蔗糖 30g/L、瓊脂 6.5g/L，該增殖培養(yǎng)基的 pH 為 5.4 ?5.6。
[0014]優(yōu)選的，所述的增殖培養(yǎng)每30天繼代一次，繁殖系數(shù)為3?5。
[0015]優(yōu)選的，所述MS 培養(yǎng)基的組分為:KN03 1 900mg/L、NH4NO3 1650mg/L、MgSO4.7H20370mg/L、KH2PO4 170mg/L、CaCl2 440mg/L、MnSO4.4H20 22.3mg/L、ZnSO4.7H20 8.6mg/L、H3BO3 6.2mg/L、KI 0.83mg/L、Na2MoO4.2H20 0.25mg/L、CuSO4.7H20 0.025mg/L、CoCl2.2H200.025mg/L、VB1 0.lmg/L、VB6 0.5mg/L VB3 0.5mg/L、甘氛酸 2mg/L、肌醇 100mg/L、FeSO4.7H20 27.8mg/L、Na2-EDTA 37.3mg/L。
[0016]優(yōu)選的，所述芽苗須浸泡生根液。
[0017]優(yōu)選的，所述生根液的組分為:IBA(吲哚丁酸)200mg/L、VB1(鹽酸硫胺素)0.1g/
L0
[0018]優(yōu)選的，所述浸泡時(shí)間為3分鐘。
[0019]優(yōu)選的，所述芽苗扦插于復(fù)合基質(zhì)后置于小棚，20天可見明顯生根，I月可見新芽生出，成活率超過90%。
[0020]優(yōu)選的，所述的小棚內(nèi)空氣相對(duì)濕度為85%以上，溫度在15?30°C。
[0021]優(yōu)選的，所述復(fù)合基質(zhì)為經(jīng)800倍多菌靈消毒后的草炭、珍珠巖與蛭石(體積比為3:2:1)的混合基質(zhì)。
[0022]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果:
[0023]1、本發(fā)明在組培瓶?jī)?nèi)階段，包括初代誘導(dǎo)及繼代增殖中以6-BA、CPPU為植物生長調(diào)節(jié)劑，它們具有促進(jìn)細(xì)胞分裂，促進(jìn)細(xì)胞生長等作用；本發(fā)明中6-BA用量較高，并添加了CPPU，這既受品種的基因型決定，且，高劑量的6-BA和CPPU有利于提高芽的增殖系數(shù)；
[0024]2、本發(fā)明的方法增殖系數(shù)高，植株強(qiáng)壯，可不經(jīng)煉苗直接進(jìn)入瓶外生根程序；
[0025]3、本發(fā)明采用瓶外生根技術(shù)，相對(duì)瓶?jī)?nèi)生根速度快，效率高、成本低，進(jìn)一步加快了繁殖速度。
【附圖說明】
[0026]通過閱讀參照以下附圖對(duì)非限制性實(shí)施例所作的詳細(xì)描述，本發(fā)明的其它特征、目的和優(yōu)點(diǎn)將會(huì)變得更明顯:
[0027]圖1為月季瓶?jī)?nèi)增殖情況示意圖；
[0028]圖2為月季生根成活情況示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0029]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。以下實(shí)施例將有助于本領(lǐng)域的技術(shù)人員進(jìn)一步理解本發(fā)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干調(diào)整和改進(jìn)。這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0030]實(shí)施例1
[0031]本實(shí)施例一種結(jié)合瓶外生根技術(shù)的月季組培快繁的方法，包括以下操作步驟:
[0032]I) 4月初于上海地區(qū)采集當(dāng)年生長初期月季半木質(zhì)化新梢(月季品種為貞德)，經(jīng)消毒處理后(75%的乙醇消毒30秒后，無菌水沖洗2次，再用0.1%的升汞消毒處理6分鐘，后有無菌水處理4次)，剪切成帶I個(gè)腋芽的莖段，接種前剪除底端2?3毫米；
[0033]2)將莖段接種到初代培養(yǎng)基MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.lmg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.5g/L上，pH5.4?5.6 ;每30天繼代培養(yǎng)一次，共培養(yǎng)2?3次，將新長出的芽莖接種到增殖培養(yǎng)基 MS+6-BA 3.0mg/L+CPPU 1.0mg/L+NAA 0.lmg/L+ 蔗糖 30g/L+ 瓊脂 6.5g/L 上，可持續(xù)繼代培養(yǎng)，繁殖系數(shù)在3?5之間，圖1為瓶?jī)?nèi)增殖情況示意圖，圖1可見，月季瓶?jī)?nèi)增殖情況良好，植株形態(tài)正常，可連續(xù)繼代增殖。培養(yǎng)條件:溫度25°C，光照時(shí)間14小時(shí)/天，光強(qiáng)2000?30001x ；
[0034]上述MS 培養(yǎng)基的組分為:KNO3 1900mg/L、NH4NO3 1650mg/L,MgSO4.7Η20 370mg/L、KH2PO4 170mg/L、CaCl2 440mg/L、MnSO4.4H20 22.3mg/L、ZnSO4.7H20 8.6mg/L、H3B036.2mg/L、KI 0.83mg/L、Na2MoO4.2H20 0.25mg/L、CuSO4.7H20 0.025mg/L、CoCl2.2H200.025mg/L、VB1 0.lmg/L,VB6 0.5mg/L、VB3 0.5mg/L、甘氨酸 2mg/L、肌醇 100mg/L、FeSO4.7Η20 27.8mg/L、Na2-EDTA 37.3mg/L。
[0035]3)當(dāng)芽苗增殖到一定數(shù)量時(shí)，將芽苗浸泡生根液(IBAZOOmg/L+VBi 0.lg/L) 3分鐘后直接扦插于經(jīng)800倍多菌靈消毒后的草炭、珍珠巖與蛭石(體積比為3: 2: I)的混合基質(zhì)上，遮小棚以保濕(空氣相對(duì)濕度為85%以上，溫度在15?30°C ),20天可見明顯生根，I月可見新芽生出，成活率超過90%，圖2為瓶外生根成活情況示意圖，可見新芽長出，生長正常。
[0036]以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了描述。需要理解的是，本發(fā)明并不局限于上述特定實(shí)施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在權(quán)利要求的范圍內(nèi)做出各種變形或修改，這并不影響本發(fā)明的實(shí)質(zhì)內(nèi)容。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種月季組培快繁的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟: A、以月季半木質(zhì)化新梢為外植體制備成莖段； B、將莖段接種到含有MS培養(yǎng)基、6-BA、萘乙酸、蔗糖和瓊脂的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，繼代培養(yǎng)兩到三次，然后切取新芽轉(zhuǎn)入含有MS培養(yǎng)基、6-BA、CPPU、萘乙酸、蔗糖和瓊脂的增殖培養(yǎng)基進(jìn)行增殖培養(yǎng)； C、增殖后的芽苗不必經(jīng)過煉苗，直接扦插于復(fù)合基質(zhì)上，實(shí)現(xiàn)瓶外生根。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的月季組培快繁的方法，其特征在于，所述月季半木質(zhì)化新梢為經(jīng)消毒處理的當(dāng)年生長初期的月季新梢。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的月季組培快繁的方法，其特征在于，所述莖段具有至少一個(gè)腋芽，且莖段底部預(yù)先剪除2?3毫米。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的月季組培快繁的方法，其特征在于，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的組分為:MS培養(yǎng)基、6-BA 2.0mg/L、萘乙酸0.lmg/L、蔗糖30g/L以及瓊脂6.5g/L ;該混合培養(yǎng)基的pH為5.4?5.6。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的月季組培快繁的方法，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基的組分為:MS 培養(yǎng)基、6-BA 3.0mg/L,CPPU 1.0mg/L、萘乙酸 0.lmg/L、蔗糖 30g/L、瓊脂 6.5g/L ;該增殖培養(yǎng)基的pH為5.4?5.6。6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的月季組培快繁的方法，其特征在于，所述MS培養(yǎng)基的組分為:KN03 1 900mg/L、NH4NO3 1650mg/L、MgSO4.7H20 370mg/L、KH2PO4 170mg/L、CaCl2440mg/L、MnSO4.4H20 22.3mg/L、ZnSO4.7H20 8.6mg/L、H3B036.2mg/L、KI 0.83mg/L、Na2MoO4.2H20 0.25mg/L、CuSO4.7H20 0.025mg/L、CoCl2.2H20 0.025mg/L、VB1 0.lmg/L,VB6 0.5mg/L、VB3 0.5mg/L、甘氨酸 2mg/L、肌醇 100mg/L、FeSO4.7H20 27.8mg/L、Na2-EDTA37.3mg/L。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的月季組培快繁的方法，其特征在于，所述芽苗是指:增殖產(chǎn)生的再生植株，每株浸泡生根液。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的月季組培快繁的方法，其特征在于，所述生根液的組分為:IBA 200mg/L, VB1 0.lg/L。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的月季組培快繁的方法，其特征在于，所述芽苗扦插于復(fù)合基質(zhì)后置于小棚，所述小棚內(nèi)空氣相對(duì)濕度為85%以上，溫度在15?30°C。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的月季組培快繁的方法，其特征在于，所述復(fù)合基質(zhì)為經(jīng)多菌靈消毒后的草炭、珍珠巖與蛭石的混合基質(zhì)。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種結(jié)合瓶外生根技術(shù)的月季組培快繁的方法；以月季半木質(zhì)化莖段為外植體，接種到含有MS培養(yǎng)基、6-BA、NAA、蔗糖和瓊脂的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，繼代培養(yǎng)兩到三次，然后切取新芽轉(zhuǎn)入含有MS培養(yǎng)基、6-BA、CPPU、NAA、蔗糖和瓊脂的培養(yǎng)基中進(jìn)行連續(xù)增殖培養(yǎng)；將再生苗浸泡生根液后扦插于復(fù)合基質(zhì)上，實(shí)現(xiàn)瓶外生根。本發(fā)明在組培瓶?jī)?nèi)階段，包括初代誘導(dǎo)及繼代增殖中以6-BA為植物生長調(diào)節(jié)劑，它具有促進(jìn)細(xì)胞分裂，促進(jìn)細(xì)胞生長等作用，增殖系數(shù)高，植株強(qiáng)壯，可不經(jīng)壯苗直接進(jìn)用瓶外生根程序；同時(shí)采用瓶外生根技術(shù)，相對(duì)瓶?jī)?nèi)生根速度快，效率高、成本低，進(jìn)一步加快了繁殖速度。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號(hào)】CN104920220
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510347453
【發(fā)明人】曾麗, 趙子剛, 丁國平, 劉曉叢, 彭勇政, 舒雅娟, 穆廷云, 王鵬, 林登貴, 王夢(mèng)茹, 迪力達(dá)爾.依明, 徐佳琳
【申請(qǐng)人】上海交通大學(xué)
【公開日】2015年9月23日
【申請(qǐng)日】2015年6月19日