一種平陸百合的快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食用百合的脫毒快繁，特別是涉及一種針對(duì)平陸百合的脫毒苗快速繁殖方法。
【背景技術(shù)】
[0002]食用百合鱗莖瓣厚、豐潤(rùn)，口感甜美，藥食兼優(yōu)，具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，作為特種蔬菜深受消費(fèi)者的喜愛。山西省平陸縣地處中條山麓，為砂質(zhì)土壤，極宜種植百合，早在明代萬(wàn)歷年間就開始栽培百合，歷史悠久。平陸百合由野生百合移植培育，質(zhì)量好，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，以個(gè)頭大、瓣肉厚、后味不苔、瓣肉無(wú)柴而著稱于世。最大者達(dá)150克以上，一般的也有100克重，有“中條參”的美稱，收獲后的鮮百合放置起來(lái)干而不爛，埋入濕土可終年保持鮮嫩。平陸百合含有大量蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉、維生素，并含有少量鈣、磷、鐵等，藥用價(jià)值高，具有補(bǔ)中益氣，溫肺止咳，安神、清心之功效。
[0003]平陸百合的繁殖方法很多，包括播種、鱗片扦插、小鱗莖繁殖、株芽繁殖等。以常規(guī)繁殖方法小鱗莖繁殖，繁殖系數(shù)低，種植過(guò)程中極易感染病毒，嚴(yán)重影響百合產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，制約了食用百合的生產(chǎn)。
[0004]中國(guó)專利200810034181.4公開了一種宜興百合的脫毒快繁技術(shù)，其以再生鱗莖的鱗片分化不定芽作為快繁的主要方式，但由于百合鱗片分化的不定芽需要經(jīng)過(guò)壯苗后方可成苗，繁殖過(guò)程繁雜。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種平陸百合的快速繁殖方法，通過(guò)對(duì)莖尖培養(yǎng)獲得的脫毒苗進(jìn)行快速繁殖，建立完整的脫毒苗無(wú)性系應(yīng)用于生產(chǎn)。
[0006]本發(fā)明提供的平陸百合快速繁殖方法包括莖尖培養(yǎng)獲取脫毒苗、誘導(dǎo)脫毒苗產(chǎn)生鱗莖、鱗莖的增殖培養(yǎng)、鱗莖生根及移栽，具體步驟包括:
1)、獲取脫毒苗母株:
以百合鱗莖為外植體，10?15被％次氯酸鈉溶液滅菌處理，剝離出I?3mm的莖尖，接種于MS + 6-BA 0.5?1.5mg/L + NAA 0.1?0.5mg/L + 3wt%鹿糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)莖尖萌動(dòng)成苗，獲得百合脫毒苗；
2)、誘導(dǎo)鱗莖分化:
將獲得的百合脫毒苗轉(zhuǎn)接于1/2MS + NAA 0.1?1.5mg/L + 6?10被％蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)脫毒苗分化產(chǎn)生小鱗莖；
3)、誘導(dǎo)鱗莖增殖:
將誘導(dǎo)產(chǎn)生的小鱗莖接種于MS + 6-BA 0.2?1.0mg/L + NAA 0.1?0.5mg/L + 6?10wt%蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)小鱗莖增殖；再轉(zhuǎn)接于MS + ZT 1.0?3.0mg/L + 2，4-D 0.5?
1.0mg/L + 6?10wt%蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)鱗莖大量增殖；
4)、誘導(dǎo)鱗莖生根: 將大量增殖的百合鱗莖接種于1/2MS + NAA 0.1?0.5mg/L + 6?10wt%蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)鱗莖生根；
5)、移栽百合鱗莖:
將生根后的百合鱗莖移栽至基質(zhì)中培養(yǎng)。
[0007]其中，所述的基質(zhì)是由蛭石、沙、土按照1:2:3的質(zhì)量比混合得到的基質(zhì)。
[0008]本發(fā)明所述步驟I)?4)的培養(yǎng)過(guò)程均在培養(yǎng)溫度22?27°C、光照強(qiáng)度2000?3000Lx、光照時(shí)間14?16小時(shí)/天的培養(yǎng)條件下進(jìn)行。
[0009]本發(fā)明方法以平陸食用百合為材料，經(jīng)莖尖培養(yǎng)獲得脫毒苗，以脫毒苗為母株誘導(dǎo)鱗莖產(chǎn)生，通過(guò)兩步法對(duì)鱗莖進(jìn)行快速繁殖，繼而使鱗莖生根后移栽，能夠在短期內(nèi)提供大量百合種球。
[0010]本發(fā)明方法利用莖尖脫毒技術(shù)培養(yǎng)脫毒苗，獲得了優(yōu)質(zhì)的脫毒苗，脫毒苗產(chǎn)生球莖大小一致，鱗片色澤潔白，提高了百合的質(zhì)量和產(chǎn)量，進(jìn)一步提高了其經(jīng)濟(jì)效益。
[0011]本發(fā)明方法突破了以往百合脫毒快繁中普遍采用的以鱗片分化不定芽為增殖方式的培養(yǎng)過(guò)程，以直接誘導(dǎo)百合鱗莖增殖為主要繁殖方式，通過(guò)兩步誘導(dǎo)，先后使用兩種增殖培養(yǎng)基直接繁殖鱗莖，繁殖系數(shù)達(dá)11倍以上，在保證了較高繁殖率的同時(shí)，獲得了具有較大鱗莖的壯苗，便于移栽，移栽成活率可以達(dá)到90%以上，且移栽后當(dāng)年即可定植用于生產(chǎn)。
[0012]本發(fā)明提供的百合組織培養(yǎng)技術(shù)具有繁殖速度快、不受季節(jié)影響等特點(diǎn)，且培養(yǎng)過(guò)程簡(jiǎn)單，一次成苗，適合進(jìn)行大規(guī)模工廠化生產(chǎn)，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。
【具體實(shí)施方式】
[0013]1、獲取脫毒母株:以健壯百合鱗莖為外植體，用10%次氯酸鈉滅菌處理13min，剝離出I?3mm的莖尖，接種于MS + 6-BA 0.5mg/L + NAA 0.lmg/L + 3%蔗糖培養(yǎng)基中，暗培養(yǎng)3?5天后，轉(zhuǎn)入光下培養(yǎng)4周，培養(yǎng)溫度25°C，光照強(qiáng)度2000?3000Lx，光照時(shí)間14?16小時(shí)/天，以誘導(dǎo)莖尖萌動(dòng)成苗。莖尖培養(yǎng)成活率83.4%，以檢測(cè)后的脫病毒苗為母株進(jìn)行快繁。
[0014]2、誘導(dǎo)鱗莖分化:將檢測(cè)后獲得的百合脫毒苗轉(zhuǎn)接于1/2MS + NAA 0.lmg/L +10%蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)其分化產(chǎn)生小鱗莖，培養(yǎng)條件同上，培養(yǎng)4周后，小鱗莖的誘導(dǎo)率達(dá)
100% O
[0015]3、誘導(dǎo)鱗莖增殖:將誘導(dǎo)產(chǎn)生的小鱗莖接種于MS + 6-BA lmg/L + NAA 0.1mg/L + 10%蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)小鱗莖增殖；以上述培養(yǎng)條件培養(yǎng)4周后，再轉(zhuǎn)接于MS + ZT
2.5mg/L + 2,4-D 0.5mg/L + 10%蔗糖培養(yǎng)基中，在上述培養(yǎng)條件下誘導(dǎo)鱗莖大量增殖，培養(yǎng)4周后，鱗莖增殖率達(dá)11倍以上，并在誘導(dǎo)鱗莖大量增殖的同時(shí)，促進(jìn)了鱗莖膨大，免去了小鱗莖壯苗的步驟，獲得健壯鱗莖直接用于生根培養(yǎng)。
[0016]4、誘導(dǎo)鱗莖生根:將大量增殖的百合鱗莖接種于1/2MS + NAA 0.lmg/L + 10%蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)鱗莖生根，培養(yǎng)溫度22°C，光照強(qiáng)度2000?3000Lx，光照時(shí)間14?16小時(shí)/天。培養(yǎng)2周后鱗莖即可生根，生根率可達(dá)100%。
[0017]5、移栽百合鱗莖:生根后的百合鱗莖在實(shí)驗(yàn)室和溫室煉苗后進(jìn)行移栽，移栽基質(zhì)由蛭石、沙和土混合得到，比例為1:2:3。移栽成活率90%以上，移栽后當(dāng)年可定植。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種平陸百合的快速繁殖方法，其特征是按照以下步驟進(jìn)行: 1)、獲取脫毒苗母株: 以百合鱗莖為外植體，10?15被％次氯酸鈉溶液滅菌處理，剝離出I?3mm的莖尖，接種于MS + 6-BA 0.5?1.5mg/L + NAA 0.1?0.5mg/L + 3wt%鹿糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)莖尖萌動(dòng)成苗，獲得百合脫毒苗； 2)、誘導(dǎo)鱗莖分化: 將獲得的百合脫毒苗轉(zhuǎn)接于1/2MS + NAA 0.1?1.5mg/L + 6?10被％蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)脫毒苗分化產(chǎn)生小鱗莖； 3)、誘導(dǎo)鱗莖增殖: 將誘導(dǎo)產(chǎn)生的小鱗莖接種于MS + 6-BA 0.2?1.0mg/L + NAA 0.1?0.5mg/L + 6?10wt%蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)小鱗莖增殖；再轉(zhuǎn)接于MS + ZT 1.0?3.0mg/L + 2，4-D 0.5?1.0mg/L + 6?10wt%蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)鱗莖大量增殖； 4)、誘導(dǎo)鱗莖生根: 將大量增殖的百合鱗莖接種于1/2MS + NAA 0.1?0.5mg/L + 6?10wt%蔗糖培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)鱗莖生根； 5)、移栽百合鱗莖: 將生根后的百合鱗莖移栽至基質(zhì)中培養(yǎng)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的平陸百合的快速繁殖方法，其特征是所述基質(zhì)由蛭石、沙、土按照1:2:3的質(zhì)量比混合得到。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的平陸百合的快速繁殖方法，其特征是所述步驟I)?4)的培養(yǎng)過(guò)程均在培養(yǎng)溫度22?27°C、光照強(qiáng)度2000?3000Lx、光照時(shí)間14?16小時(shí)/天的培養(yǎng)條件下進(jìn)行。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種平陸百合的快速繁殖方法，包括莖尖培養(yǎng)獲取脫毒苗；誘導(dǎo)脫毒苗產(chǎn)生鱗莖；利用兩步法先誘導(dǎo)小鱗莖增殖，再誘導(dǎo)鱗莖大量增殖；鱗莖生根及移栽，通過(guò)對(duì)莖尖培養(yǎng)獲得的脫毒苗進(jìn)行快速繁殖，建立完整的脫毒苗無(wú)性系應(yīng)用于生產(chǎn)。本發(fā)明方法通過(guò)兩步誘導(dǎo)增殖，在保證較高繁殖率的同時(shí)，獲得了較大鱗莖的壯苗，移栽成活率可以達(dá)到90%以上，且移栽后當(dāng)年即可定植用于生產(chǎn)。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號(hào)】CN104969858
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510293372
【發(fā)明人】趙娟, 王玉國(guó), 席叢林, 尹美強(qiáng), 溫銀元, 王育選, 殷麗娜, 高雅坤, 任建宏
【申請(qǐng)人】山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年10月14日
【申請(qǐng)日】2015年6月2日