一種高產(chǎn)淀粉馬鈴薯的組織培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及農(nóng)業(yè)育種領(lǐng)域，具體設(shè)及一種高產(chǎn)淀粉馬鈴馨的組織培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 馬鈴馨作為我國(guó)五大主糧之一，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、適應(yīng)力強(qiáng)、產(chǎn)量大，是全球第=大 重要的糧食作物，僅次于小麥和玉米。馬鈴馨除含有蛋白質(zhì)外，還含有豐富的碳水化合物， 每百克高達(dá)16.8克，并含有豐富的維生素C、維生素A、維生素B1B2和巧、憐、鐵等礦物 質(zhì)。同時(shí)它還含有維生素B6,維生素B6有防止動(dòng)脈硬化的功效。所W常食馬鈴馨可減少 腦溢血的發(fā)病率。馬鈴馨的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高，優(yōu)質(zhì)淀粉含量約為16. 5%，±豆中的淀粉在體內(nèi) 吸收緩慢，不會(huì)導(dǎo)致血糖過(guò)快上升。還含有大量木質(zhì)素等，被譽(yù)為人類的"第二面包"。馬鈴 馨中含有大量的優(yōu)質(zhì)纖維素，在腸道內(nèi)可W供給腸道微生物大量營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)腸道微生物生 長(zhǎng)發(fā)育。同時(shí)還可W促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，保持腸道水分，有預(yù)防便秘和防治癌癥等作用。
[0003] 其中，馬鈴馨淀粉廣泛應(yīng)用于紡織、石油開采、飼料及食品等行業(yè)，尤其國(guó)際國(guó)內(nèi) 食品市場(chǎng)的開拓，使高精馬鈴馨淀粉的需求猛增，加之馬鈴馨淀粉有其它淀粉不可替代的 自然屬性，使其成為國(guó)內(nèi)外淀粉深加工行業(yè)的首選產(chǎn)品，銷路廣闊、市場(chǎng)前景看好。而在中 國(guó)有數(shù)據(jù)顯示馬鈴馨的食用方式90%W上W鮮食為主，常溫下馬鈴馨的休眠期限大約為 2-5個(gè)月，一旦過(guò)了休眠期馬鈴馨就會(huì)從塊莖上長(zhǎng)出芽萌，因?yàn)轳R鈴馨在發(fā)芽的芽眼周圍產(chǎn) 生一種劇毒物質(zhì)，叫做龍葵堿，人吃了就會(huì)中毒。因此在中國(guó)每年都會(huì)有大量的馬鈴馨因 滯銷發(fā)芽最后腐敗丟棄，國(guó)家根據(jù)市場(chǎng)需求，站在戰(zhàn)略高度上將±豆提升為五大主糧之一， 加大對(duì)馬鈴馨尤其是其淀粉深加工的投入和引導(dǎo)，而國(guó)產(chǎn)馬鈴馨的優(yōu)質(zhì)淀粉含量大多在 13-18%之間，普遍較低，加工效益欠佳，因此需要尋找高產(chǎn)淀粉的馬鈴馨栽培方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種高產(chǎn)淀粉馬鈴馨的組織培養(yǎng)方法。
[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題通過(guò)W下技術(shù)方案予W實(shí)現(xiàn)： 一種高產(chǎn)淀粉馬鈴馨的組織培養(yǎng)方法，所述的組織培養(yǎng)方法包括如下操作步驟： ①2-4次的脫毒培養(yǎng)；②生根培養(yǎng)；③練苗培養(yǎng)；④移載種植；所述的脫毒培養(yǎng)選用特制 脫毒培養(yǎng)基，所述的脫毒培養(yǎng)基WMS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加IAAO.lmg/l、6-慷基氨基嚷嶺 0.Img/L和〔25&5〇6?^化〇. 2mg/L制備而成。
[000引進(jìn)一步的，所述Cz品506?^化為S斜晶系，尸-7空間群，晶胞參數(shù)為3=13. 108(3)A，仁 16.0526(4)A，c=12.929(7)A，"=86.839(3)。，片=103.483(3)。，r=88.237(5)。， V=2716. 49(4)A3。
[0007] 〔25&5〇6?^化的制備方法為： 將1mmolNi，妒-二（化晚-4-基）辛二酷胺(其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下所示)、2mmol二苯基 甲燒-4, 4' -二簇酸和2mmol硝酸鋒溶于乙醇和二氯甲燒的混合溶劑中（其中乙醇和二氯 甲燒的體積比為2:5)得到混合液，然后將上述混合液在35°C下靜置5天W上得到上述的 &5&5〇6馬化。
[0008] 進(jìn)一步的，所述的脫毒培養(yǎng)借助解剖鏡剝?nèi)●R鈴馨植株頂芽或塊莖萌發(fā)的頂芽 0. 2mm大小為外植體，消毒后置于脫毒培養(yǎng)基上培養(yǎng)，每16天繼代剪切一次，反復(fù)2-4次獲 得脫毒試管苗。
[0009] 進(jìn)一步的，所述的生根培養(yǎng)使用生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基使用淺層液體MS 培養(yǎng)基；其中用白糖代替薦糖，自來(lái)水代替蒸饋水，培養(yǎng)溫度22°C-28°C，光照12-1地，光照 強(qiáng)度13001UX-16001UX，生根培養(yǎng)6-8d或根長(zhǎng)約l-2cm，即可進(jìn)行練苗。
[0010] 更進(jìn)一步的，所述的練苗培養(yǎng)為把培養(yǎng)瓶放在自然光照和通風(fēng)條件下，將瓶蓋打 開練苗2-3天，練苗過(guò)程中光照強(qiáng)度不能高于3500lux,太陽(yáng)光線較強(qiáng)時(shí)使用遮陽(yáng)網(wǎng)調(diào) 節(jié)，并且過(guò)程中保持空氣濕度在75%W上，并在白天每隔2-3小時(shí)用細(xì)眼噴壺噴水一次。
[0011] 進(jìn)一步的，所述的移載種植為將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，用清水洗去根部的培養(yǎng) 基，再用綴子小屯、將其插入紙筒中栽培；移載后的半個(gè)月需要覆蓋薄膜保溫，使夜間最低溫 度不低于16°c，有新的葉片生長(zhǎng)出±添加遮陽(yáng)網(wǎng)遮陽(yáng)兩周即可。
[0012] 本發(fā)明具有如下有益效果： 本發(fā)明的高產(chǎn)淀粉馬鈴馨的組織培養(yǎng)方法，能夠使得馬鈴馨的淀粉含量提升達(dá)50%，極 大的增加了馬鈴馨淀粉產(chǎn)業(yè)生產(chǎn)效益的同時(shí)和也降低了農(nóng)戶的種植成本。
【附圖說(shuō)明】
[001引 1.圖1為Cz品506成化化學(xué)結(jié)構(gòu)式。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 下面具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說(shuō)明。
[001引實(shí)施例： 一種高產(chǎn)淀粉馬鈴馨的組織培養(yǎng)方法，所述的組織培養(yǎng)方法包括如下操作步驟： ①2-4次的脫毒培養(yǎng)；②生根培養(yǎng)；③練苗培養(yǎng)；④移載種植；所述的脫毒培養(yǎng)選用特制 脫毒培養(yǎng)基，所述的脫毒培養(yǎng)基WMS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加IAAO.lmg/l、6-慷基氨基嚷嶺 0.Img/L和CzsHzsOeNzZnO. 2mg/L制備而成。所述的Cz品506成化均用W下方法合成： 將1mmolNi，妒-二（化晚-4-基）辛二酷胺、2mmol二苯基甲燒-4, 4' -二簇酸和2mmol硝酸鋒溶于2mL乙醇和5mL二氯甲燒的混合溶劑中得到混合液，然后將上述混合液 在35°C下靜置5天W上得到上述的〔25&506成化晶體（產(chǎn)率為85%，基于化）。
[001引 〔25&506?^化的X射線衍射數(shù)據(jù)是在化址erSmartApexCCD面探衍射儀上， 用MoK。福射（A= 0.71073A)，WCO掃描方式收集并進(jìn)行Lp因子校正，吸收校正使用SADABS程序。用直接法解結(jié)構(gòu)，然后用差值傅立葉法求出全部非氨原子坐標(biāo)，并用理論加氨 法得到氨原子位置（C-H1.083A)，用最小二乘法對(duì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行修正。計(jì)算工作在PC機(jī)上 用甜ElXTL程序包完成。
[0017] 經(jīng)測(cè)試解析可知，化學(xué)分子式為Cze^OeNzZn,為S斜晶系，尸-7空間群，晶胞參數(shù) 為<3=13. 108(3)A，仁16. 0526(4)A，c=12.929(7)A，C=86. 839(3)。，片=103. 483(3)。， r=88.237 (5r，V=2716. 49 (4)A3,Z=4,其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如圖1所示。
[0018] 所述的脫毒培養(yǎng)借助解剖鏡剝?nèi)●R鈴馨植株頂芽或塊莖萌發(fā)的頂芽0.2mm大小 為外植體，消毒后置于脫毒培養(yǎng)基上培養(yǎng)，每16天繼代剪切一次，反復(fù)3次獲得脫毒試管 苗。
[0019] 所述的生根培養(yǎng)使用生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基使用淺層液體MS培養(yǎng)基；其 中用白糖代替薦糖，自來(lái)水代替蒸饋水，培養(yǎng)溫度22°C-28°C，光照13h，光照強(qiáng)度15001UX， 生根培養(yǎng)7d或根長(zhǎng)約1-2畑1，即可進(jìn)行練苗。
[0020] 所述的練苗培養(yǎng)為把培養(yǎng)瓶放在自然光照和通風(fēng)條件下，將瓶蓋打開練苗2-3 天，練苗過(guò)程中光照強(qiáng)度不能高于3500lux,太陽(yáng)光線較強(qiáng)時(shí)使用遮陽(yáng)網(wǎng)調(diào)節(jié)，并且過(guò)程 中保持空氣濕度在75%W上，并在白天每隔2-3小時(shí)用細(xì)眼噴壺噴水一次。
[0021] 所述的移載種植為將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，用清水洗去根部的培養(yǎng)基，再用綴 子小屯、將其插入紙筒中栽培；移載后的半個(gè)月需要覆蓋薄膜保溫，使夜間最低溫度不低于 16°C，有新的葉片生長(zhǎng)出±添加遮陽(yáng)網(wǎng)遮陽(yáng)兩周即可。
[002引 對(duì)比例： 一種高產(chǎn)淀粉馬鈴馨的組織培養(yǎng)方法，所述的組織培養(yǎng)方法包括如下操作步驟： ①2-4次的脫毒培養(yǎng)；②生根培養(yǎng)；③練苗培養(yǎng)；④移載種植；所述的脫毒培養(yǎng)選用特制 脫毒培養(yǎng)基，所述的脫毒培養(yǎng)基WMS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加IAAO.lmg/l、6-慷基氨基嚷嶺 0.Img/L。
[0023] 對(duì)比例操作與實(shí)施例相同，差別在于脫毒培養(yǎng)基中不含C25H25O抓化。
[0024] 實(shí)驗(yàn)例： 將本實(shí)施例培育的試管苗(實(shí)驗(yàn)組）和對(duì)比例的試管苗(對(duì)照組）同時(shí)種植在一塊方形 實(shí)驗(yàn)地中，將試驗(yàn)地按"田"字樣分為面積相等的四份，取對(duì)角兩塊分別種植本發(fā)明試管苗 和常規(guī)脫毒試管苗，種植后按照同樣的管理方式進(jìn)行管理，收獲后進(jìn)行抽樣對(duì)比：實(shí)驗(yàn)組和 對(duì)照組各隨機(jī)抽取馬鈴馨=組，50公斤每組進(jìn)行淀粉產(chǎn)量對(duì)比，獲得數(shù)據(jù)制備如下表：
經(jīng)過(guò)試驗(yàn)，本發(fā)明方法生產(chǎn)的馬鈴馨淀粉產(chǎn)出可占到馬鈴馨自重的23. 2%左右；相比 于傳統(tǒng)方法種植的馬鈴馨，相同質(zhì)量的馬鈴馨，淀粉產(chǎn)出可增加50%左右。
[0025] W上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能 因此而理解為對(duì)本發(fā)明專利范圍的限制，但凡采用等同替換或等效變換的形式所獲得的技 術(shù)方案，均應(yīng)落在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種高產(chǎn)淀粉馬鈴薯的組織培養(yǎng)方法，其特征在于：所述的組織培養(yǎng)方法包括如下 操作步驟：①2-4次的脫毒培養(yǎng)；②生根培養(yǎng)；③練苗培養(yǎng)；④移載種植；所述的脫毒培養(yǎng) 選用特制脫毒培養(yǎng)基，所述的脫毒培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加IAAO.lmg/L、6-糠基氨 基噪呤 0·lmg/L和C25H2506N2Zn0. 2mg/L制備而成。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高產(chǎn)淀粉馬鈴薯的組織培養(yǎng)方法，其特征在于在 于：C25H2506N2Zn為三斜晶系，尸-7空間群，晶胞參數(shù)為a=13. 108(3)A，^=16. 0526⑷A， c=12. 929(7)Α，σ=86·839(3)°，々=103.483(3)°，r=88.237(5)°，V=2716.49(4)A3。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種高產(chǎn)淀粉馬鈴薯的組織培養(yǎng)方法，其特征在于在于：所 述的脫毒培養(yǎng)借助解剖鏡剝?nèi)●R鈴薯植株頂芽或塊莖萌發(fā)的頂芽〇. 2mm大小為外植體，消 毒后置于脫毒培養(yǎng)基上培養(yǎng)，每16天繼代剪切一次，反復(fù)2-4次獲得脫毒試管苗。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種高產(chǎn)淀粉馬鈴薯的組織培養(yǎng)方法，其特征在于：所述的 生根培養(yǎng)使用生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基使用淺層液體MS培養(yǎng)基；其中用白糖代替蔗 糖，自來(lái)水代替蒸餾水，培養(yǎng)溫度22°C_28°C，光照12-14h，光照強(qiáng)度13001UX- 16001UX，生 根培養(yǎng)6-8d或根長(zhǎng)約l-2cm，即可進(jìn)行練苗。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種高產(chǎn)淀粉馬鈴薯的組織培養(yǎng)方法，其特征在于：所述的 練苗培養(yǎng)為把培養(yǎng)瓶放在自然光照和通風(fēng)條件下，將瓶蓋打開練苗2-3天，練苗過(guò)程中光 照強(qiáng)度不能高于3500lux，太陽(yáng)光線較強(qiáng)時(shí)使用遮陽(yáng)網(wǎng)調(diào)節(jié)，并且過(guò)程中保持空氣濕度在 75%以上，并在白天每隔2-3小時(shí)用細(xì)眼噴壺噴水一次。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種高產(chǎn)淀粉馬鈴薯的組織培養(yǎng)方法，其特征在于：所述的 移載種植為將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，用清水洗去根部的培養(yǎng)基，再用鑷子小心將其插入 紙筒中栽培；移載后的半個(gè)月需要覆蓋薄膜保溫，使夜間最低溫度不低于16°C，有新的葉 片生長(zhǎng)出土添加遮陽(yáng)網(wǎng)遮陽(yáng)兩周即可。
【專利摘要】本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)育種領(lǐng)域，具體涉及一種高產(chǎn)淀粉馬鈴薯的組織培養(yǎng)方法。所述的組織培養(yǎng)方法包括如下操作步驟：①2-4次的脫毒培養(yǎng)；②生根培養(yǎng)；③練苗培養(yǎng)；④移載種植；所述的脫毒培養(yǎng)選用特制脫毒培養(yǎng)基，所述的脫毒培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加IAA0.1mg/L、6-糠基氨基嘌呤0.1mg/L和C25H25O6N2Zn0.2mg/L制備而成。本發(fā)明的高產(chǎn)淀粉馬鈴薯的組織培養(yǎng)方法，能夠使得馬鈴薯的淀粉含量提升達(dá)50%，極大的增加了馬鈴薯淀粉產(chǎn)業(yè)生產(chǎn)效益的同時(shí)和也降低了農(nóng)戶的種植成本。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號(hào)】CN105340753
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510878795
【發(fā)明人】徐偉明
【申請(qǐng)人】徐偉明
【公開日】2016年2月24日
【申請(qǐng)日】2015年12月4日