一種大葉藻實(shí)生苗的保存方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明所屬海草種質(zhì)保存領(lǐng)域，設(shè)及一種大葉藻實(shí)生苗的保存方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 大葉藻(Zostera marina L.)屬海洋種子植物，廣布于北半球溫帶沿海，也是我國(guó) 山東、河北和迂寧沿海泥沙底質(zhì)海岸海草群落的優(yōu)勢(shì)種，由其構(gòu)建形成的大葉藻草床生態(tài) 系統(tǒng)在近海生物多樣性的維持和海洋生態(tài)系統(tǒng)的自凈中均起著非常重要的作用。但近二十 年由于海洋富營(yíng)養(yǎng)化等因素使得其種群在我國(guó)嚴(yán)重衰退，因此其種群保護(hù)與恢復(fù)重建成了 我國(guó)北方海洋生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)的重要內(nèi)容之一。其中，大葉藻種子萌發(fā)形成的實(shí)生苗是否能 在種群中存活是一個(gè)重點(diǎn)關(guān)注的問題，因此，目前設(shè)及其實(shí)生苗的發(fā)育及生理、生化過程的 研究較多。大葉藻種子在我國(guó)海域于7-8月份采集，保存于室溫甚至0-4°C的天然海水中于 當(dāng)年11月份便開始陸續(xù)萌發(fā)，次年1月份進(jìn)入大量萌發(fā)期，3月份萌發(fā)即進(jìn)入尾聲，發(fā)芽后大 葉藻實(shí)生苗便很快長(zhǎng)出真葉、根和莖，進(jìn)入快速生長(zhǎng)期。運(yùn)樣的發(fā)芽和生長(zhǎng)規(guī)律使得其實(shí)生 苗的相關(guān)生理、發(fā)育的研究期較短，因此，如何延長(zhǎng)其種子或?qū)嵣绲谋４嫫?，可為大葉藻 實(shí)生苗的相關(guān)研究爭(zhēng)取更充足的時(shí)間。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 在本發(fā)明的目的是提供一種低成本、操作簡(jiǎn)單且有效的大葉藻實(shí)生苗的保存方 法，該方法可較長(zhǎng)時(shí)間地保存大葉藻實(shí)生苗的活力。
[0004] 本發(fā)明所采取的技術(shù)方案為： 一種大葉藻實(shí)生苗的保存方法，其步驟為： (1) 將7-8月份從海域中收集回的健康大葉藻種子清洗后放入裝有天然海水的廣口容 器中，于0-4°C、黑暗的環(huán)境條件下保存； (2) 每周用等溫度天然海水清洗種子，并進(jìn)行一次等溫度天然海水的更換； (3) 從次年1月份開始將發(fā)芽的實(shí)生苗挑出，放置于裝有天然海水的廣口容器中，于0-4 °C、黑暗環(huán)境條件下保存，用水量為IOml/株； (4) 每周進(jìn)行一次等溫度天然海水的更換，并清除不健康的實(shí)生苗、清洗容器。
[000引本發(fā)明技術(shù)效果是:大葉藻實(shí)生苗保存中只需天然海水和普通容器，期間只更換 海水，無(wú)需?？诘耐庠O(shè)備，也無(wú)需光照，充分利用大葉藻在0-4°C天然海水環(huán)境下進(jìn)入休 眠狀態(tài)運(yùn)一生理現(xiàn)象，使大葉藻剛萌發(fā)的實(shí)生苗在低溫、黑暗和低氣環(huán)境下可W較長(zhǎng)時(shí)間 地保存活力，期間實(shí)生苗生長(zhǎng)極為緩慢，有效地延長(zhǎng)了大葉藻實(shí)生苗的保存時(shí)間。
[0006]
【具體實(shí)施方式】
[0007]本發(fā)明所述的一種低成本、操作簡(jiǎn)單且有效的大葉藻實(shí)生苗的保存方法，可W保 證大葉藻實(shí)生苗8個(gè)月的活力保存。包括W下實(shí)施例，下面的實(shí)施例可進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明， 但不W任何方式限制本發(fā)明。
[0008] 實(shí)施例1: 一種大葉藻實(shí)生苗的保存方法，其步驟為： (1) 將8月份從威海雙島灣收集回的健康大葉藻種子清洗后放入裝有天然海水的300ml 組培瓶中，其中：200粒種子/瓶，共3瓶； (2) 將組培瓶放置于4°C冰箱中黑暗保存，每周用4°C天然海水清洗種子，并進(jìn)行一次等 溫度天然海水的更換； (3) 從次年1月份開始每次為種子換水時(shí)都將剛發(fā)芽的實(shí)生苗挑出，挑出的實(shí)生苗放置 于裝有天然海水的200ml組培瓶中，于4°C、黑暗環(huán)境條件下保存，用水量為IOml/株； (4) 實(shí)生苗每周更換4°C天然海水一次，并清除不健康的實(shí)生苗、清洗容器，期間觀察發(fā) 現(xiàn)實(shí)生苗生長(zhǎng)極為緩慢，僅有一片真葉微微露出； 巧)從4月份起對(duì)挑出的實(shí)生苗進(jìn)行活力檢驗(yàn):每月均隨機(jī)選取保存的實(shí)生苗30株進(jìn)行 逐步升溫、加光培養(yǎng)30天后統(tǒng)計(jì)其存活率。具體方法為:每株實(shí)生苗放入裝有等溫度天然海 水的50mlS角瓶中，然后將S角瓶轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)溫度每2天上升1°C，最高至15 °C，初期黑暗培養(yǎng)，當(dāng)溫度升至10°C時(shí)，開啟光照開關(guān)，設(shè)光照為lOOOLux，后逐漸增加至 2000LUX，實(shí)驗(yàn)表明轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱后實(shí)生苗的真葉開始慢慢轉(zhuǎn)綠，在溫度達(dá)到10°C后其迅速生 長(zhǎng)，30天后大部分實(shí)生苗長(zhǎng)出2-3片真葉、一對(duì)幼根，各月檢測(cè)的存活率結(jié)果見表1，8個(gè)月后 存活率為63%。
[0009] 表1各月實(shí)生苗力檢驗(yàn)結(jié)果
本實(shí)施例中所用光照培養(yǎng)箱為上海博訊SPX-250B-G型光照培養(yǎng)箱，所用冰箱為海爾 BCD-225SKHCBS 口 冰箱。
[0010] 實(shí)施例2: -種大葉藻實(shí)生苗的保存方法，其步驟為： (1) 將8月份從威海雙島灣收集回的健康大葉藻種子清洗后放入裝有天然海水的300ml 組培瓶中，其中：200粒種子/瓶，共3瓶； (2) 將組培瓶放置于(TC冰箱中黑暗保存，每周用(TC天然海水清洗種子，并進(jìn)行一次等 溫度天然海水的更換； (3) 從次年1月份開始每次為種子換水時(shí)都將剛發(fā)芽的實(shí)生苗挑出，挑出的實(shí)生苗放置 于裝有天然海水的200ml組培瓶中，于0°C、黑暗環(huán)境條件下保存，用水量為IOml/株； (4) 實(shí)生苗每周更換〇°C天然海水一次，并清除不健康的實(shí)生苗、清洗容器，期間觀察發(fā) 現(xiàn)實(shí)生苗幾乎不生長(zhǎng)； 巧)從4月份起對(duì)挑出的實(shí)生苗進(jìn)行活力檢驗(yàn):每月均隨機(jī)選取保存的實(shí)生苗30株進(jìn)行 逐步升溫、加光培養(yǎng)30天后統(tǒng)計(jì)其存活率。具體方法為:將每株實(shí)生苗放入裝有0°C天然海 水的50ml =角瓶中，放入4°C冰箱內(nèi)黑暗保存3天后再轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)溫度每2天上 升1°C，最高至15°C，初期黑暗培養(yǎng)，當(dāng)溫度升至10°C時(shí)，開啟光照開關(guān)，設(shè)光照為lOOOLux， 后逐漸增加至2000LUX，實(shí)驗(yàn)表明轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱后實(shí)生苗開始發(fā)出第一片真葉，在溫度達(dá)到10 °0后其迅速生長(zhǎng)，30天后大部分實(shí)生苗長(zhǎng)出2-3片真葉、一對(duì)幼根，各月檢測(cè)的存活率結(jié)果 見表2,8個(gè)月后存活率為71%。
[0011] 表2各月實(shí)生苗活力檢驗(yàn)結(jié)果
本實(shí)施例中所用光照培養(yǎng)箱為上海博訊SPX-250B-G型光照培養(yǎng)箱，所用冰箱為海爾 BCD-225SKHCBS 口 冰箱。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種大葉藻實(shí)生苗的保存方法，其特征在于，其步驟為： (1) 將7-8月份從海域中收集回的健康大葉藻種子清洗后放入裝有天然海水的廣口容 器中，于〇-4°C、黑暗的環(huán)境條件下保存； (2) 每周用等溫度天然海水清洗種子，并進(jìn)行一次等溫度天然海水的更換； (3) 從次年1月份開始將發(fā)芽的實(shí)生苗挑出，放置于裝有天然海水的廣口容器中，于0-4 °C、黑暗環(huán)境條件下保存，用水量為10ml/株； (4) 每周進(jìn)行一次等溫度天然海水的更換，并清除不健康的實(shí)生苗、清洗容器。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種大葉藻實(shí)生苗的保存方法，？7-8月將新收集回的健康大葉藻種子于天然海水、0-4℃、黑暗環(huán)境條件下保存，每周用等溫度天然海水清洗種子，并進(jìn)行一次等溫度天然海水的更換，從次年1月份開始將發(fā)芽的實(shí)生苗挑出，置于天然海水、0-4℃、黑暗環(huán)境條件下保存，？每周進(jìn)行一次等溫度天然海水的更換。該技術(shù)充分利用大葉藻在0-4℃天然海水環(huán)境下進(jìn)入休眠狀態(tài)這一生理現(xiàn)象，使大葉藻剛萌發(fā)的實(shí)生苗在低溫、黑暗和低氣環(huán)境下可以較長(zhǎng)時(shí)間地保存活、且生長(zhǎng)極為緩慢，有效地延長(zhǎng)了大葉藻實(shí)生苗的保存時(shí)間。
【IPC分類】A01N3/00
【公開號(hào)】CN105475270
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510876501
【發(fā)明人】鄭鳳英, 張飛, 金艷梅, 韓曉弟
【申請(qǐng)人】山東大學(xué)（威海）
【公開日】2016年4月13日
【申請(qǐng)日】2015年12月3日