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      一種無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng)及接種方法

      文檔序號(hào):9894263閱讀:399來源:國(guó)知局
      一種無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng)及接種方法
      【專利說明】一種無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng)及接種方法
      [0001]
      技術(shù)領(lǐng)域
      [0002]本發(fā)明涉及一種蟲草培育技術(shù)領(lǐng)域,特別涉及一種無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng)及接種方法。
      [0003]
      【背景技術(shù)】
      [0004]現(xiàn)有技術(shù)中,在蟲草的培育過程中,在接種時(shí),因整個(gè)環(huán)境不是完全封閉的,從而導(dǎo)致在接種過程中,菌種與外界環(huán)境相接觸,導(dǎo)致雜菌的產(chǎn)生,不利于蟲草的生長(zhǎng)。而目前,在專利號(hào)為201120081412.4的一種封閉式發(fā)酵罐接種系統(tǒng)中,提出了在盛種鋼瓶與發(fā)酵罐之間增加一封閉連接單元,以確保將盛種鋼瓶中的菌種導(dǎo)入發(fā)酵罐內(nèi)的整個(gè)過程中,處于一封閉的環(huán)境,有效地防止了在倒菌種的過程中,原始菌種與外界環(huán)境相接觸。但是在將發(fā)酵罐內(nèi)的菌種接種至接種瓶?jī)?nèi)的這一過程中,通常仍是采用將發(fā)酵罐內(nèi)的菌種倒至接種噴壺中,而后通過接種噴壺將菌種噴施到接種瓶?jī)?nèi),再進(jìn)行接種。在此過程中,通常需要將接種瓶?jī)?nèi)的封口掀開,將噴壺的噴嘴伸入接種瓶?jī)?nèi)進(jìn)行接種。此方法,不僅造成了接種時(shí),菌種與外界環(huán)境相接觸,導(dǎo)致在蟲草的培育過程中產(chǎn)生雜菌;同時(shí)采用噴壺在噴施過程中,噴施速度慢,耗費(fèi)人工。
      [0005]

      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0006]本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供一種無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng),該接種系統(tǒng)確保了發(fā)酵罐內(nèi)的菌種在接種過程中處于一封閉的系統(tǒng),有效地杜絕了菌種與空氣的接觸,杜絕了雜菌的產(chǎn)生。
      [0007]為達(dá)到上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng),包括發(fā)酵罐、帶封口的接種瓶,所述接種系統(tǒng)還包括設(shè)于所述發(fā)酵罐與所述接種瓶間的接種裝置、設(shè)置在所述發(fā)酵罐上的空氣過濾器,通過所述空氣過濾器將空氣過濾后向所述發(fā)酵罐內(nèi)吹氧,所述接種裝置的入口端通過連接管連接在所述發(fā)酵罐的出口端上,所述接種裝置的出口端上還連接有接種軟管,所述接種軟管的另一端上還連接有可穿過所述接種瓶上的封口、將菌種噴施到所述接種瓶?jī)?nèi)的噴施件。
      [0008]優(yōu)選地,所述接種裝置為抽吸栗。
      [0009]優(yōu)選地,所述的噴施件為注射針頭。
      [0010]本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種無菌蠶蟲草菌種的接種方法,所述接種過程在上述接種系統(tǒng)中進(jìn)行,具體步驟如下:
      1)在發(fā)酵罐內(nèi)加入50kg營(yíng)養(yǎng)液,在0.10~0.12Mpa、120?125°C條件下進(jìn)行滅菌,滅菌后,降低發(fā)酵罐內(nèi)溫度至19?22°C ;
      2)將待接種的母種稀釋7?8倍后,取稀釋液800?1000ml倒入所述發(fā)酵罐中,反應(yīng)2?3天; 3)在22?23°C條件下,通過所述發(fā)酵罐上的空氣過濾器向所述發(fā)酵罐內(nèi)吹氧,使得母種在所述發(fā)酵罐內(nèi)長(zhǎng)菌絲;
      4)經(jīng)48?72小時(shí)后,通過所述接種裝置將菌絲接種至所述接種瓶?jī)?nèi);
      其中,步驟I)中的營(yíng)養(yǎng)液的配制方法如下:IL水中加入玉米粉250?350g、葡萄糖15?25g、檸檬酸三胺0.9?1.2g、硫酸鎂0.9?1.2g、維生素B1 25-50mg、維生素B12 25?50mg。
      [0011]優(yōu)選地,步驟2)中的所述母種是通過如下步驟制得的:
      a)制備培養(yǎng)基:將200?250g土豆、8?15g蠶蛹粉加入1000ml水中,燒開30?50min,過濾去渣,補(bǔ)水至1000ml,加入葡萄糖20?25g、檸檬酸三胺0.8?1.lg、硫酸鎂0.8?lg、磷酸二氫鉀
      2.5~3.5g、維生素Βι30?40mg、維生素Bi230?40mg、亞砸酸鈉鹽0.8?Ig、瓊脂15?20g,微火恪化,調(diào)節(jié)pH6.5?7.5間;
      b)將配置好的培養(yǎng)基趁熱加入空白試管中,試管口用牛皮紙或無紡布包扎,進(jìn)行高壓滅菌,將滅菌后的試管在55?65°C時(shí)取出,傾斜放置、自然冷卻成為斜面;
      c)將野生蟲草菌種接種至斜面上,接種后在常溫下生長(zhǎng)15?20天后,轉(zhuǎn)色即可用于生產(chǎn)。
      [0012]進(jìn)一步優(yōu)選地,步驟a)所制備的培養(yǎng)基的pH值在6.5-7.0間。
      [0013]由于上述技術(shù)方案的運(yùn)用,本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有下列優(yōu)點(diǎn):本發(fā)明的無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng),通過在發(fā)酵罐與接種瓶間增加了一接種裝置,通過該接種裝置,使得發(fā)酵罐內(nèi)的菌種在接種至接種瓶?jī)?nèi)的過程中,不會(huì)與外界環(huán)境相接觸,有效地防止了雜菌的產(chǎn)生,有利于蟲草的生長(zhǎng);而采用的接種方法簡(jiǎn)單、易于操作,接種后,蟲草在生長(zhǎng)過程中,不易產(chǎn)生雜菌,有效地提高了蟲草的營(yíng)養(yǎng)成分含量。
      【附圖說明】
      [0014]附圖1為本發(fā)明所述的無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)示意圖;
      其中:1、發(fā)酵罐;2、接種裝置(抽吸栗);3、接種瓶;4、連接管;5、接種軟管;6、噴施件(注射針頭);7、盛種鋼瓶。
      【具體實(shí)施方式】
      [0015]下面結(jié)合附圖及具體實(shí)施例來對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的闡述。
      [0016]參見圖1所示,一種無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng),包括發(fā)酵罐1、帶封口的接種瓶3,以及設(shè)于該發(fā)酵罐I與接種瓶3間的接種裝置2、設(shè)置在發(fā)酵罐I上的空氣過濾器,通過空氣過濾器將空氣過濾后向發(fā)酵罐I內(nèi)吹氧,該接種裝置2的入口端通過連接管4連接在發(fā)酵罐I的出口端上,該接種裝置2的出口端上還連接有接種軟管5,該接種軟管5的另一端上還連接有可穿過接種瓶3上的封口、將菌種噴施到接種瓶3內(nèi)的噴施件6。
      [0017]在本例中,該接種裝置2為抽吸栗2,該噴施件6為注射針頭6。
      [0018]具體操作時(shí),I)先對(duì)接種過程中所有需用到的各部件進(jìn)行消毒、滅菌處理。在發(fā)酵罐I內(nèi)加入營(yíng)養(yǎng)液,在121°C、0.12Mpa的環(huán)境中進(jìn)行高溫滅菌,滅菌結(jié)束后,降溫至19?22°C;
      2)而后將母種稀釋7?8倍,取800ml母種稀釋液倒入可以采用火焰圈法或是在盛種鋼瓶7與發(fā)酵罐I間增加專利號(hào)為201120081412.4中提到的封閉連接單元來進(jìn)行倒種,從而在倒種過程中,有效地防止了原始菌種與外界環(huán)境相接觸,杜絕了發(fā)酵罐I內(nèi)雜菌的產(chǎn)生; 3)倒母種后,通過空氣過濾器向發(fā)酵罐I內(nèi)吹氧,在22?25°C溫度條件下,使菌種發(fā)酵、長(zhǎng)菌絲,經(jīng)48?72小時(shí)后,即可接種;
      4)接種時(shí),將抽吸栗2通過連接管4連接在發(fā)酵罐I的出口端上,而后啟動(dòng)抽吸栗2,通過接種軟管5向接種瓶3內(nèi)接種。因接種時(shí),采用的是軟管,同時(shí)采用的噴施件6為注射針頭6,從而在接種過程中,抓住接種軟管5的帶注射針頭6—端的端部旋轉(zhuǎn)360°,即可將菌種均勻地接種至接種瓶3內(nèi),且不會(huì)造成接種瓶3內(nèi)半邊接到菌種、半邊未接到菌種的情況發(fā)生;同時(shí),有效地提高了接種速度,降低了勞動(dòng)強(qiáng)度。
      [0019]這里的營(yíng)養(yǎng)液的配制方法如下:IL水中加入玉米粉250?350g、葡萄糖15?25g、檸檬酸三胺0.9?1.2g、硫酸鎂0.9?1.2g、維生素B1 25?50mg、維生素B12 25?50mg。
      [0020]這里的母種是通過如下步驟制得的:
      a)制備培養(yǎng)基:將200?250g土豆、8?15g蠶蛹粉加入100ml水中,燒開30?50min,過濾去渣,補(bǔ)水至1000ml,加入葡萄糖20?25g、檸檬酸三胺0.8?1.lg、硫酸鎂0.8?lg、磷酸二氫鉀2.5~3.5g、維生素Βι30?40mg、維生素Bi230?40mg、亞砸酸鈉鹽0.8?Ig、瓊脂15?20g,微火恪化,調(diào)節(jié)pH6.5?7.5間;
      b)將配置好的培養(yǎng)基趁熱加入空白試管中,試管口用牛皮紙或無紡布包扎,進(jìn)行高壓滅菌,將滅菌后的試管在55?65°C時(shí)取出,傾斜放置、自然冷卻成為斜面;
      c)將野生蟲草菌種接種至斜面上,接種后在常溫下生長(zhǎng)15?20天后,轉(zhuǎn)色即可用于生產(chǎn)。
      [0021]采用本發(fā)明的無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng),在接種時(shí),有效地杜絕了菌種與外界環(huán)境相接觸,杜絕了雜菌的產(chǎn)生,同時(shí)通過該接種裝置,有效地克服了現(xiàn)有技術(shù)的不足,提高了接種效率、降低了勞動(dòng)強(qiáng)度。
      [0022]上述實(shí)施例只為說明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點(diǎn),其目的在于讓熟悉此項(xiàng)技術(shù)的人士能夠了解本發(fā)明的內(nèi)容并加以實(shí)施,并不能以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍,凡根據(jù)本發(fā)明精神實(shí)質(zhì)所作的等效變化或修飾,都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
      【主權(quán)項(xiàng)】
      1.一種無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng),包括發(fā)酵罐、帶封口的接種瓶,其特征在于,所述接種系統(tǒng)還包括設(shè)于所述發(fā)酵罐與所述接種瓶間的接種裝置、設(shè)置在所述發(fā)酵罐上的空氣過濾器,通過所述空氣過濾器將空氣過濾后向所述發(fā)酵罐內(nèi)吹氧,所述接種裝置的入口端通過連接管連接在所述發(fā)酵罐的出口端上,所述接種裝置的出口端上還連接有接種軟管,所述接種軟管的另一端上還連接有可穿過所述接種瓶上的封口、將菌種噴施到所述接種瓶?jī)?nèi)的噴施件。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng),其特征在于,所述接種裝置為抽吸栗。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng),其特征在于,所述的噴施件為注射針頭。4.一種無菌蠶蟲草菌種的接種方法,其特征在于,所述接種過程在權(quán)利要求1中所述的接種系統(tǒng)中進(jìn)行,具體步驟如下: 1)在發(fā)酵罐內(nèi)加入50kg營(yíng)養(yǎng)液,在0.10-0.12Mpa、120?125°C條件下進(jìn)行滅菌,滅菌后,降低發(fā)酵罐內(nèi)溫度至19?22°C ; 2)將待接種的母種稀釋7?8倍后,取稀釋液800?1000ml倒入所述發(fā)酵罐中,反應(yīng)2?3天; 3)在22?23°C條件下,通過所述發(fā)酵罐上的空氣過濾器向所述發(fā)酵罐內(nèi)吹氧,使得母種在所述發(fā)酵罐內(nèi)長(zhǎng)菌絲; 4)經(jīng)48?72小時(shí)后,通過所述接種裝置將菌絲接種至所述接種瓶?jī)?nèi); 其中,步驟I)中的營(yíng)養(yǎng)液的配制方法如下:IL水中加入玉米粉250?350g、葡萄糖15?25g、檸檬酸三胺0.9?1.2g、硫酸鎂0.9?1.2g、維生素B1 25-50mg、維生素B12 25?50mg。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的無菌蠶蟲草菌種的接種方法,其特征在于,步驟2)中的所述母種是通過如下步驟制得的: a)制備培養(yǎng)基:將200?250g土豆、8?15g蠶蛹粉加入1000ml水中,燒開30?50min,過濾去渣,補(bǔ)水至1000ml,加入葡萄糖20?25g、檸檬酸三胺0.8?1.lg、硫酸鎂0.8?lg、磷酸二氫鉀2.5~3.5g、維生素Βι30?40mg、維生素Bi230?40mg、亞砸酸鈉鹽0.8?Ig、瓊脂15?20g,微火恪化,調(diào)節(jié)pH6.5?7.5間; b)將配置好的培養(yǎng)基趁熱加入空白試管中,試管口用牛皮紙或無紡布包扎,進(jìn)行高壓滅菌,將滅菌后的試管在55?65°C時(shí)取出,傾斜放置、自然冷卻成為斜面; c)將野生蟲草菌種接種至斜面上,接種后在常溫下生長(zhǎng)15?20天后,轉(zhuǎn)色即可用于生產(chǎn)。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的無菌蠶蟲草菌種的接種方法,其特征在于,步驟a)所制備的培養(yǎng)基的pH值在6.5?7.0間。
      【專利摘要】<b>本發(fā)明公開了</b><b>一種無菌蠶蟲草菌種的接種系統(tǒng),</b><b>包括發(fā)酵罐、帶封口的接種瓶,所述接種系統(tǒng)還包括設(shè)于所述發(fā)酵罐與所述接種瓶間的接種裝置、設(shè)置在所述發(fā)酵罐上的空氣過濾器,通過所述空氣過濾器將空氣過濾后向所述發(fā)酵罐內(nèi)吹氧,所述接種裝置的入口端通過連接管連接在所述發(fā)酵罐的出口端上,所述接種裝置的出口端上還連接有接種軟管,所述接種軟管的另一端上還連接有可穿過所述接種瓶上的封口、將菌種噴施到所述接種瓶?jī)?nèi)的噴施件。采用本發(fā)明的接種系統(tǒng)在接種過程中,有效地隔絕了菌種與外界環(huán)境的接觸,杜絕了雜菌的產(chǎn)生,有利于蟲草的生長(zhǎng),同時(shí)提高了接種效率、降低了勞動(dòng)強(qiáng)度。</b>
      【IPC分類】A01G1/04
      【公開號(hào)】CN105660187
      【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610097092
      【發(fā)明人】吳建軍, 吳秋鋰
      【申請(qǐng)人】張家港順泰元生物科技有限公司
      【公開日】2016年6月15日
      【申請(qǐng)日】2016年2月23日
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