一種滸苔人工半咸水生態(tài)育苗法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藻類的人工半咸水生態(tài)育苗技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種稱苔（Ulva prol if era)人工半咸水生態(tài)育苗的培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 稱苔隸屬綠藻口（化1〇1~〇地八日）、綠藻綱（化Ioro地yceae)、石魏目化IvaIes)、石 魏科(；Ulvaceae)、稱苔屬化nte;romorphap;rolifera)，主要有條稱苔、腸稱苔、扁稱苔、稱 苔、小管稱苔5種，是我國海洋野生植物資源中極為豐富的大型經(jīng)濟(jì)藻類，廣泛地分布于海 洋沿岸中、低潮區(qū)的沙堿、巖石、灘涂和石沼中。稱苔藻體管狀、中空、膜質(zhì)，細(xì)胞單層，主枝 明顯，分枝細(xì)長，高可達(dá)Im。稱苔藻色鮮艷，味道鮮美，含有許多人體必需的營養(yǎng)成份，我國 稱苔的生長盛期大致為12月至次年4月。
[0003] 沿海海域的富營養(yǎng)化是導(dǎo)致大型海藻大量繁殖的主要原因之一，自2007年至今， 我國黃海外海已連續(xù)9年暴發(fā)稱苔綠藻災(zāi)害，導(dǎo)致了一系列的環(huán)境問題與經(jīng)濟(jì)損失。目前對(duì) 稱苔的研究多見于營養(yǎng)價(jià)值、繁殖生物學(xué)、種質(zhì)鑒定、營養(yǎng)鹽的吸收動(dòng)力學(xué)等方面。稱苔的 實(shí)驗(yàn)室研究培育多用天然海水，且多為無菌培養(yǎng)，其具有育苗時(shí)間長、內(nèi)地實(shí)驗(yàn)室對(duì)其研究 成本高等不足。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明針對(duì)稱苔本鹽度適應(yīng)范圍廣的特點(diǎn)，設(shè)計(jì)出一種適合于稱苔生長的人工半 咸水配方、與粗放式生態(tài)育苗法，其特別適合于內(nèi)陸地區(qū)或?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行稱苔相關(guān)的研究。
[0005] 本發(fā)明采取如下技術(shù)方案：
[0006] -種稱苔人工半咸水生態(tài)育苗法，其按如下步驟進(jìn)行：
[0007] (1)配制人工半咸水培養(yǎng)液，備用；
[000引（2)黃綠色稱苔清洗數(shù)次(如4-5次），吸干表面水份，將樣品放置于(如5-15°C)的 干燥箱中陰至半干；
[0009] (3)將陰至半干的稱苔樣品在含有艦液人工咸水中消毒數(shù)分鐘(如2分鐘），W清除 其中含有雜菌、雜藻、原生動(dòng)物;剪切藻段處理后，放入盛有人工半咸水培養(yǎng)液與附著基質(zhì) 的培養(yǎng)容器中并用保鮮膜封口；
[0010] (4)置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng);此步驟優(yōu)選是:溫度（22±irC，前4她全黑暗培養(yǎng)； 4化后開始增加光照，光照強(qiáng)度3000~3500LX，光照周期^ D= 12h: 12h，全部用日光燈照明， 培養(yǎng)方式為液體靜置培養(yǎng)，每天早、晚晃動(dòng)培養(yǎng)液1次。
[0011] (5)待發(fā)散的稱苔抱子或配子充分附著在附著基質(zhì)（如1-2天)后，引入浮游動(dòng)物、 并投加食用酵母，使培養(yǎng)容器中形成一個(gè)簡易的共生共榮的生態(tài)育苗系統(tǒng)。
[0012] 優(yōu)選的，步驟(1):配制人工半咸水培養(yǎng)液：
[001 ；3] A、培養(yǎng)液包括：主要陰陽離子(化+、Cr、Mg2+、S〇42-、K+、HC03-)、微量元素(Fe、化、B、 Sr、I)及營養(yǎng)元素(N、P)構(gòu)成。
[0014] B、具體優(yōu)選的配方有如下四種：
[0016] C、配方中除化肥化采用水溶液進(jìn)微孔濾膜過濾除菌，微孔濾膜的孔徑為0.22皿最 后加入到冷卻至30°C W下的培養(yǎng)基外，其它配方組分均逐一溶解，配成培養(yǎng)液進(jìn)行高溫滅 -tt： 園O
[0017]優(yōu)選的，步驟(2)中：
[0018] A、用濾紙片或紙巾吸干稱苔幼苗表面的多余水分。
[0019] B、對(duì)稱苔藻體進(jìn)行低溫陰至半干，有利于誘導(dǎo)稱苔形成抱子囊。
[0020] C、稱苔抱子/配子苗的附著基質(zhì)：為大理石、玻璃、卵石上、藍(lán)色/藍(lán)綠色漁網(wǎng)網(wǎng)片、 窗紗、塑料片等。
[0021]優(yōu)選的，步驟(3)中：
[0022] A、含有艦液人工咸水:含有0.7 %艦液的人工半咸水。
[0023] B、用手術(shù)剪或手術(shù)刀剪切稱苔成0.1-Imm藻段，有利于誘導(dǎo)稱苔形成抱子囊。
[0024] 優(yōu)選的，步驟(4):先全暗培養(yǎng)48小時(shí)，48小時(shí)后打開光照燈。
[002引優(yōu)先的，步驟(5):
[00%] A、引入浮游動(dòng)物:首選為蒙古裸腹潘、權(quán)皺臂尾輪蟲。
[0027] B、投加食用酵母:首選海洋酵母、安琪酶母。
[0028] 用人工半咸水進(jìn)行稱苔育苗優(yōu)點(diǎn)：1、有利于克服地域限制，吸引更多的研究者參 加研究，加速稱苔工程研究的進(jìn)展。2、人工半咸水培養(yǎng)液中不含或極少含(可能作為其它成 分的雜質(zhì)而微量滲入)娃元素，也沒含娃藻，因此，用人工半咸水培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)可W有效 防止由培養(yǎng)液里的娃藻或其它雜藻的污染(故培養(yǎng)液中不用加入Ge化）。即使不慎因種藻處 理不徹底進(jìn)入了娃藻污染，也不易引起后者大量生長與繁殖而造成嚴(yán)重危害。3、本發(fā)明設(shè) 計(jì)人工半咸水配方時(shí)，主配方是內(nèi)陸地區(qū)河蟹工廠化育苗的生產(chǎn)配方，故更能貼近生產(chǎn)的 實(shí)際應(yīng)用。
[0029] 稱苔在人工半咸水育苗廢水的循環(huán)利用中的應(yīng)用前景:郵、蟹工廠化人工育苗技 術(shù)試驗(yàn)研究成功后，經(jīng)過幾十年實(shí)踐，已建立了較為完整的技術(shù)體系。人工半咸水郵、蟹育 苗，其配制半咸水的原料費(fèi)用在育苗成本所占比例較大，所W，對(duì)育苗廢水進(jìn)行凈化與回收 利用是降低育苗成本的重要途徑。
[0030] 水質(zhì)是育苗成功與否的關(guān)鍵因子之一，為了摸清在河蟹人工繁育中水質(zhì)主要因子 的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，何望在河蟹的人工海水育繁育中，對(duì)水質(zhì)進(jìn)行了跟蹤分析，人工海水在整 個(gè)河蟹的繁育中，其Ca 2+、Mg2\S042-、PH、S%。的穩(wěn)定性是很強(qiáng)的。在育苗過程中水質(zhì)惡化的 主要原因是殘巧和泄物造成的=氮含量的提高、W及由此引起的單胞藻的大量繁殖和未分 解的殘巧、糞便和幼苗尸體死亡尸體殘骸造成的COD升高。趙乃剛、楊振久利用物理、化學(xué)、 生物學(xué)相結(jié)合的方法使育苗廢水得W凈化(經(jīng)過廿天左右的循環(huán)，人工半咸水的主要成分 含量沒有顯著變化。如果排除分析上的誤差，主要差異反映在儀離子濃度與PH下降上），實(shí) 現(xiàn)了半咸水的循環(huán)再利用，大大地降低節(jié)約了海水的消耗。王武在"生物包"技術(shù)中引種了 剛毛藻和根枝藻型絲狀藻(建議擬引種高等藻類如江萬、裙帶菜為佳)對(duì)育苗水體進(jìn)行深度 凈化處理，脫氮效果顯著，而且過多的絲狀藻類也便于拱取，生物量容易控制，相較楊振久 利用小球藻凈化效果顯得更為優(yōu)越。
[0031] 工廠化集約養(yǎng)殖中，氨氮過高成為制約因素，傳統(tǒng)方法只有依靠頻繁換水來彌補(bǔ) 運(yùn)一問題，排放的污水勢(shì)必會(huì)造成對(duì)水質(zhì)資源的破壞，增加水質(zhì)的富營養(yǎng)化。為了解決氨氮 對(duì)單位養(yǎng)殖產(chǎn)量的影響，各國在逐步建立工廠循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)，利用微生物技術(shù)將過高的氨 氮轉(zhuǎn)換為硝酸氮，使養(yǎng)殖系統(tǒng)能夠維持一定的高密度養(yǎng)殖水平。但運(yùn)一系統(tǒng)存在致命的缺 陷，即由氨氮轉(zhuǎn)換來的硝酸氮并沒有從系統(tǒng)中除去，仍W很高的濃度(20~80mg/l)積累在 養(yǎng)殖系統(tǒng)中，也必須依靠換水來降低度過高的硝酸氮。因此，目前各國都在研究和發(fā)展一種 環(huán)保式綜合循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)，即利用海藻深度凈化吸收系統(tǒng)中的氮和憐，運(yùn)是應(yīng)用海藻生物 技術(shù)和生態(tài)修復(fù)原理對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)的進(jìn)行的一次革命。王陽陽、史明華、田千桃等研究的 稱苔對(duì)N03-N、NH4-N、P化-P、吸收動(dòng)力學(xué)特性中，結(jié)果顯示稱苔對(duì)于水體中的氮、憐有著極強(qiáng) 的吸收能力，特別是對(duì)氮的吸收達(dá)到極高數(shù)值，幾乎不受環(huán)境氮憐比變化的影響。李儉平的 研究表明，稱苔可W有效利用N03-N、NH4-N、和有機(jī)腳原酵母抽提物及中低度濃度的N02-NU 50umol)和尿素氮，與其他腳原共同存在時(shí)稱苔可W優(yōu)先利用NH4-N。田千桃的研究表明，稱 苔與條稱苔在化內(nèi)對(duì)NH4-N的去除率的效率要高于細(xì)基江萬繁枝變種、龍須菜和真江萬。
[0032] 綜合上述，本發(fā)明考慮運(yùn)用稱苔人工育苗技術(shù)，充分利用稱苔的高效吸收氮、憐的 特性，對(duì)郵、蟹育苗人工半咸水的廢水進(jìn)行深度凈化，W實(shí)現(xiàn)海水的高效利用，最終達(dá)到提 高苗種成活率與降低生產(chǎn)成本之目的。
[0033] 本發(fā)明稱苔人工半咸水生態(tài)育苗方法操作簡單，且原料易得、價(jià)格便宜、成本低、 培養(yǎng)粗放，特別適合于內(nèi)陸地區(qū)或?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行稱苔相關(guān)的研究。
【附圖說明】
[0034] 圖1是黃綠色稱苔種藻圖。
[0035] 圖2是有氣泡的稱苔種藻圖。
[0036] 圖3是藻段生殖細(xì)胞囊圖。
[0037] 圖4是蓋玻片上附著的稱苔小苗圖。
[0038] 圖5是藍(lán)色尼龍絲附著的抱子圖。
[0039] 圖6是附著在人造大理石上的稱苔苗圖。
[0040] 圖7是藍(lán)綠色網(wǎng)片附著的稱苔小苗圖。
[0041 ]圖8是附著在藻段上的稱苔小苗圖。
[0042] 圖9是附網(wǎng)靜置培養(yǎng)45d的稱苔圖。
【具體實(shí)施方式】
[0043] 下面對(duì)本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施例作詳細(xì)說明。
[0044] 稱苔樣品< 蘇州大學(xué)沈頌東教授(海洋藻類專家)對(duì)其進(jìn)行分子生物學(xué)方法鑒定 為稱苔 >于2013年11月17日采自江蘇省東臺(tái)紫菜養(yǎng)殖區(qū)的紫菜養(yǎng)殖網(wǎng)架，選擇藻體稱苔顏 色鮮艷，狀態(tài)良好的藻體1.0kg，采集后濾干水分裝入塑料袋中通過快遞公司送達(dá)牆州市 (氣溫約10~15°C，中途歷時(shí)4她），收到稱苔立即采用淡水稍作清洗后，放入人工半咸水中 進(jìn)行充氧(充氣累）1化復(fù)蘇后備用。
[0045] 1.2、實(shí)驗(yàn)步驟
[0046] 1.2.1、附著基的準(zhǔn)備
[0047] 用蓋玻片、6cm*10cm人造大理石，纏繞有紅、白、藍(lán)、藍(lán)綠尼龍絲的載波片；2cm巧cm 紅色網(wǎng)片、藍(lán)色漁網(wǎng)網(wǎng)片、藍(lán)綠色漁網(wǎng)網(wǎng)片，白色窗紗網(wǎng)片各若干作為稱苔抱子/配子的附 著基。將附著基反復(fù)用沸水浸泡數(shù)次，W清除附著基上的對(duì)稱苔有害物質(zhì)后備