一種芽苗菜浸種菌劑及其應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種芽苗菜浸種菌劑及其應(yīng)用，屬于農(nóng)業(yè)微生物領(lǐng)域。該菌劑由干酪乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和蘇云金芽孢桿菌組成，制備菌劑的發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：工業(yè)紅糖6％～8％、玉米漿0.8％～1.5％、尿素0.4％～1.0％、食鹽1％～2％，培養(yǎng)基成分廉價(jià)易得，營(yíng)養(yǎng)成分配搭合適。發(fā)酵成熟的菌劑稀釋150～200倍用于浸種，能夠提高種子出芽率，抑制霉菌病菌等有害微生物生長(zhǎng)，防治病蟲害，使浸種培育的芽苗菜生長(zhǎng)整齊、商品性高。本發(fā)明的菌劑綠色安全、生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單、效果顯著，適用于農(nóng)業(yè)應(yīng)用中大規(guī)模生產(chǎn)。
【專利說明】
一種芽苗菜浸種菌劑及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種芽苗菜浸種菌劑及其應(yīng)用，屬于農(nóng)業(yè)微生物領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著人們生活水平的提高和飲食習(xí)慣的改變，綠色食品普遍受到人們的喜愛，人 們已不僅僅滿足于蔬菜的供應(yīng)數(shù)量，而且更關(guān)注蔬菜的外觀品質(zhì)及食用安全性等質(zhì)量指 標(biāo)。芽苗菜是利用各種豆類、谷類、樹類及其他植物種子或其他營(yíng)養(yǎng)器官在適宜環(huán)境條件下 發(fā)育成幼嫩的芽苗、莖等作為食用的一種活體蔬菜，市場(chǎng)上常見的芽苗菜有大豆、綠豆、豌 豆、蠶豆、苜蓿、香椿、蕎麥、蘿卜芽苗菜等30多個(gè)品種?？蒲泄ぷ髡邔?duì)價(jià)值和藥用價(jià)值進(jìn)行了 廣泛的研究，普遍認(rèn)為芽苗菜有抗疲勞、抗衰老、抗癌癥、減肥、美容等多種功能。芽苗菜的 生產(chǎn)就是利用有效的空何，如日光溫室或空閑的房舍為生產(chǎn)場(chǎng)地，來用半封閉式，多層架立 體，無需營(yíng)養(yǎng)液的集約化栽培模式，新鮮、無污染。因此，品種多樣、營(yíng)養(yǎng)健康、生產(chǎn)簡(jiǎn)易使得 芽苗菜產(chǎn)業(yè)迅猛發(fā)展。
[0003] 芽苗菜的生產(chǎn)上也存在亟待解決的問題:一方面，市場(chǎng)上缺乏安全、效果可靠的芽 苗菜增產(chǎn)增效的產(chǎn)品，大規(guī)?；a(chǎn)芽苗菜的誠(chéng)信生產(chǎn)企業(yè)，生產(chǎn)中不違規(guī)使殺菌劑、防腐 劑等違禁農(nóng)業(yè)投入品，致使芽苗菜生產(chǎn)中爛種爛芽率高，產(chǎn)出比低、成色差，阻礙了芽苗菜 生產(chǎn)的可持續(xù)性發(fā)展;另一方面作坊式的經(jīng)營(yíng)者為了經(jīng)濟(jì)效益。濫用對(duì)人體有害的防腐劑、 殺菌劑、多菌靈等違禁品，食品安全完全得不到保障。因此，在芽苗菜產(chǎn)業(yè)中急需一種既能 抑制病蟲害的發(fā)生，又能促進(jìn)芽苗菜快速生長(zhǎng)的無毒害產(chǎn)品，使芽苗菜產(chǎn)業(yè)健康、有序的可 持續(xù)發(fā)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明旨在提供一種芽苗菜浸種菌劑及其應(yīng)用，該菌劑可以顯著的抑制芽苗菜培 育過程中的害蟲滋生和有害微生物的繁殖，提高種子的萌發(fā)率，同時(shí)該生物制劑制作簡(jiǎn)單 易實(shí)施、安全可靠、綠色健康。
[0005] 本發(fā)明的所采取的技術(shù)方案如下：
[0006] 本發(fā)明提供了一種芽苗菜浸種菌劑，所述菌劑為活性生物制品，其活性成分由干 酪乳桿菌、沼澤紅假單胞菌、蘇云金芽孢桿菌組成。
[0007] 所述芽苗菜浸種菌劑是由如下方法制備:分別將干酪乳桿菌、沼澤紅假單胞菌、蘇 云金芽孢桿菌按照5%~10%的接種量接種，接種后將培養(yǎng)基密封置于37°C，靜置發(fā)酵5~7 天，直至打開發(fā)酵容器，聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，獲得培養(yǎng)成熟的菌液。
[0008] 在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述芽苗菜浸種菌劑還經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)，所述擴(kuò)大培 養(yǎng)的步驟如下:將培養(yǎng)成熟的菌劑直接接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種量為20%~30%，37°C密 封發(fā)酵5~7天，直至打開發(fā)酵容器，聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā)酵成 熟;如果發(fā)酵溫度不能維持37°C，適當(dāng)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間直至發(fā)酵成熟;所述發(fā)酵培養(yǎng)基成分為 工業(yè)紅糖6%~8%、玉米漿0.8%~1.5%、尿素0.4%~1.0%、食鹽1 %~2%。
[0009] 本發(fā)明還提供了一種芽苗菜浸種菌劑的制備方法，是將干酪乳桿菌、沼澤紅假單 胞菌、蘇云金芽孢桿菌分別接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種后將培養(yǎng)基密封置于37°C，靜置發(fā)酵 5~7天，打開發(fā)酵容器，可以聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā)酵成熟。
[0010] 所述接種量分別為5%~10%。
[0011] 所述發(fā)酵培養(yǎng)基成分如下：工業(yè)紅糖6 %~8 %、玉米漿0.8 %~1.5 %、尿素0.4 % ~1.0%、食鹽1%~2%。
[0012] 所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配制方法為：使用煮沸的井水溶解各成分，并繼續(xù)煮沸5~ lOmin，冷卻后pH使用石灰乳調(diào)至6.5~7.5。
[0013] 本發(fā)明還提供了所述芽苗菜浸種菌劑在芽苗菜浸種中的應(yīng)用。
[0014] 所述應(yīng)用，是指在芽苗菜培育過程中分別使用不同稀釋倍數(shù)的菌劑浸泡小麥種子 或豌豆種子。
[0015] 所述應(yīng)用，是指在芽苗菜培育過程中使用稀釋倍數(shù)150~200倍的菌劑，用于各種 芽苗菜的浸種、器具的清洗，根據(jù)不同種子的萌發(fā)特性確定浸種時(shí)間，5~8h更換一次浸種 溶液。
[0016] 本發(fā)明中浸種菌劑的活性成分僅由3種微生物構(gòu)成，均為人蓄無害的安全菌種。干 酪乳桿菌產(chǎn)生的乳酸具有很強(qiáng)的殺菌能力，能有效抑制有害微生物的活動(dòng)和有機(jī)物的急劇 腐敗分解，產(chǎn)生的乳酸菌素是天然肽類防腐劑能夠抑制和殺死種子中的許多腐敗菌及致病 菌;沼澤紅假單胞菌本身富含蛋白質(zhì)和多種維生素，輔酶Q10、抗病毒物質(zhì)和促生長(zhǎng)因子，它 以接受的光和熱為能源，將水質(zhì)中的硫氫和碳?xì)浠衔镏械臍浞蛛x出來，變有害物質(zhì)為無 害物質(zhì)，并以植物根部的分泌物、種子中的有機(jī)物、有害氣體(硫化氫等)及二氧化碳、氮等 為基質(zhì)，合成糖類、氨基酸類、維生素類、氮素化合物、抗病毒物質(zhì)和生理活性物質(zhì)等;蘇云 金芽孢桿菌可以生產(chǎn)內(nèi)毒素和外毒素，使害蟲停止取食，最后害蟲因饑餓和死亡，該菌是微 生物源低毒殺蟲劑，用于防治直翅目、鞘翅目、雙翅目、膜翅目，特別是鱗翅目的多種害蟲。 該菌劑應(yīng)用于各種芽苗菜培育的浸種階段，可以大幅度提高種子的萌發(fā)率和后期芽苗菜的 生長(zhǎng)特性，幾乎不再出現(xiàn)發(fā)霉?fàn)€種的現(xiàn)象，且生長(zhǎng)結(jié)束后，芽苗菜茁壯整齊、適口性和商品 性高。
[0017] 本發(fā)明的培養(yǎng)基成分簡(jiǎn)單易得，營(yíng)養(yǎng)成分配比得當(dāng)，培養(yǎng)容器可使用廢瓶廢桶，培 養(yǎng)過程不需要搖床、大型發(fā)酵罐，夏天可以常溫發(fā)酵，其余季節(jié)只需要提供簡(jiǎn)單的保溫措 施，除用于芽苗菜浸種，本發(fā)明菌劑亦可應(yīng)用于玉米、花生等種子栽種作物中的浸種。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 實(shí)施例1
[0019] (1)培養(yǎng)基的制備：其培養(yǎng)基成分為工業(yè)紅糖6 %~8 %、玉米漿0.8 %~1.5 %、尿 素0.4 %~1.0 %、食鹽1 %~2 %，使用煮沸的井水溶解各成分，并繼續(xù)煮沸5~10 m i η，冷卻 后pH使用石灰乳調(diào)至6.5~7.5，將培養(yǎng)基分裝至可密封的發(fā)酵容器中；
[0020] (2)芽苗菜浸種菌劑的制備:該菌劑由干酪乳桿菌、蘇云金芽孢桿菌組成，將干酪 乳桿菌、蘇云金芽孢桿菌分別按照5~10%的接種量接種，接種后將培養(yǎng)基密封置于37°C， 靜置發(fā)酵5~7天，打開發(fā)酵容器，可以聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā)酵 成熟。
[0021] (3)菌劑簡(jiǎn)單擴(kuò)大培養(yǎng):為了日常生產(chǎn)浸種菌劑簡(jiǎn)便快捷，可將步驟(2)中培養(yǎng)的 菌液，按照20%~30%的接種量接種于步驟1中的培養(yǎng)基，37°C密封發(fā)酵5~7天，打開發(fā)酵 容器，可以聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā)酵成熟。如果發(fā)酵溫度不能維 持37°C，可以適當(dāng)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間。
[0022] 上述步驟(2)和步驟(3)中，菌液中活菌含量能達(dá)到80~140億個(gè)/mL和100~160億 個(gè)/mL。
[0023] 實(shí)施例2
[0024] (1)培養(yǎng)基的制備：其培養(yǎng)基成分為工業(yè)紅糖6 %~8 %、玉米漿0 · 8 %~1 · 5 %、尿 素0.4 %~1.0 %、食鹽1 %~2 %，使用煮沸的井水溶解各成分，并繼續(xù)煮沸5~10 m i η，冷卻 后pH使用石灰乳調(diào)至6.5~7.5，將培養(yǎng)基分裝至可密封的發(fā)酵容器中；
[0025] (2)芽苗菜浸種菌劑的制備:該菌劑由干酪乳桿菌、沼澤紅假單胞菌、蘇云金芽孢 桿菌組成，將干酪乳桿菌、沼澤紅假單胞菌、蘇云金芽孢桿菌分別按照2%~5%的接種量接 種，接種后將培養(yǎng)基密封置于37°C，靜置發(fā)酵5~7天，打開發(fā)酵容器，可以聞到酸甜氣味，pH 試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā)酵成熟。
[0026] (3)菌劑簡(jiǎn)單擴(kuò)大培養(yǎng):為了日常生產(chǎn)浸種菌劑簡(jiǎn)便快捷，可將步驟(2)中培養(yǎng)的 菌液，按照20%~30%的接種量接種于步驟1中的培養(yǎng)基，37°C密封發(fā)酵5~7天，打開發(fā)酵 容器，可以聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā)酵成熟。如果發(fā)酵溫度不能維 持37°C，可以適當(dāng)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間。
[0027] 上述步驟(2)和步驟(3)中，菌液中活菌含量分別能達(dá)到60~100億個(gè)/mL和100~ 180億個(gè)/111匕
[0028] 實(shí)施例3
[0029] (1)培養(yǎng)基的制備：其培養(yǎng)基成分為工業(yè)紅糖6 %~8 %、玉米漿0.8 %~1.5 %、尿 素0.4 %~1.0 %、食鹽1 %~2 %，使用煮沸的井水溶解各成分，并繼續(xù)煮沸5~10 m i η，冷卻 后pH使用石灰乳調(diào)至6.5~7.5，將培養(yǎng)基分裝至可密封的發(fā)酵容器中；
[0030] (2)芽苗菜浸種菌劑的制備:該菌劑由干酪乳桿菌、沼澤紅假單胞菌、蘇云金芽孢 桿菌組成，將干酪乳桿菌、沼澤紅假單胞菌、蘇云金芽孢桿菌分別按照5%~10%的接種量 接種，接種后將培養(yǎng)基密封置于37°C，靜置發(fā)酵5~7天，打開發(fā)酵容器，可以聞到酸甜氣味， pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā)酵成熟。
[0031] (3)菌劑簡(jiǎn)單擴(kuò)大培養(yǎng):為了日常生產(chǎn)浸種菌劑簡(jiǎn)便快捷，可將步驟(2)中培養(yǎng)的 菌液，按照20%~30%的接種量接種于步驟1中的培養(yǎng)基，37°C密封發(fā)酵5~7天，打開發(fā)酵 容器，可以聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā)酵成熟。如果發(fā)酵溫度不能維 持37°C，可以適當(dāng)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間。
[0032] 上述步驟(2)和步驟(3)中，菌液中活菌含量均能達(dá)到150~250億個(gè)/mL。
[0033] 實(shí)施例4
[0034]將實(shí)施例1-3中培養(yǎng)成熟的浸種菌劑分別稀釋200倍，在芽苗菜培育過程中分別使 用實(shí)施例1-3稀釋后的菌劑浸泡小麥種子及豌豆種子，使用井水浸泡種子為空白對(duì)照。采用 輕質(zhì)塑料育苗盆栽培，每盒使用相同質(zhì)量的同一批種子，每組設(shè)置至少三盒重復(fù)。
[0035]結(jié)果表明，使用不同制備方式的浸種菌劑培養(yǎng)小麥苗和豌豆苗生長(zhǎng)狀況如表1、表 2所示。使用干酪乳桿菌和蘇云金芽孢桿菌制備菌劑培育的芽苗菜，發(fā)霉生蟲情況顯著減 少。使用含有沼澤紅假單胞菌制備菌劑培育的芽苗菜，芽苗菜出芽率和平均苗高提高。由于 干酪乳桿菌和蘇云金芽孢桿菌均能夠抑制霉菌病菌等有害微生物生長(zhǎng)，防治病蟲害，沼澤 紅假單胞菌可以為豆芽萌發(fā)提供豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，提高種子出芽率。共同使用干酪乳桿菌、 蘇云金芽孢桿菌和沼澤紅假單胞菌時(shí)，三種微生物能夠發(fā)揮協(xié)同作用，使菌劑的抑菌作用 和對(duì)芽苗菜生長(zhǎng)的促進(jìn)作用顯著優(yōu)于單獨(dú)使用任意其中一種或兩種微生物制備菌劑的效 果的疊加，其培育的芽苗菜出芽率能夠達(dá)到96.5%，平均苗高11.9cm，發(fā)霉生蟲情況少，且 芽苗菜生長(zhǎng)整齊、商品性高。
[0036] 此外，實(shí)施例3的方法由于菌種接種量大，活菌含量高，相同稀釋倍數(shù)，更加有利于 種子的萌發(fā)出芽和芽苗菜的生長(zhǎng)。
[0037] 表1不同培養(yǎng)方式的菌劑對(duì)小麥苗生長(zhǎng)的影響
[0038]
[0039] 表2不同培養(yǎng)方式的菌劑對(duì)豌豆苗生長(zhǎng)的影響
[0040]
[0041 ] 實(shí)施例5
[0042] 將實(shí)施例3中培養(yǎng)成熟的浸種菌劑分別稀釋100倍、150倍、200倍和300倍，在芽苗 菜培育過程中分別使用不同稀釋倍數(shù)的菌劑浸泡小麥種子和豌豆種子，以使用井水浸泡種 子為空白對(duì)照。采用輕質(zhì)塑料育苗盆栽培，每盒使用相同質(zhì)量的同一批種子，每組設(shè)置至少 二盒重復(fù)。
[0043] 結(jié)果表明不同稀釋倍數(shù)的浸種菌劑均能夠抑制小麥苗和豌豆苗生長(zhǎng)過程中霉菌、 病菌等有害微生物生長(zhǎng)，達(dá)到防治病蟲害，提高出芽率的效果，且該方法培育的芽苗菜生長(zhǎng) 整齊、商品性高(表3和表4)。其中，稀釋300倍菌劑對(duì)芽苗菜生長(zhǎng)促進(jìn)和抑制蟲害的效果與 稀釋其它倍數(shù)的菌劑相比相對(duì)較弱，同時(shí)為節(jié)約成本，優(yōu)選菌劑稀釋倍數(shù)為150~200倍。
[0044] 表3不同稀釋倍數(shù)的菌劑對(duì)小麥苗生長(zhǎng)的影響
[0045]
[0046] 表4不同稀釋倍數(shù)的菌劑對(duì)豌豆苗生長(zhǎng)的影響
[0047]
[0048] 注:+表示發(fā)霉生蟲程度，-表示沒有發(fā)霉;+小麥苗生長(zhǎng)的整齊度。
[0049] 雖然本發(fā)明已以較佳實(shí)施例公開如上，但其并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉此技 術(shù)的人，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，都可做各種的改動(dòng)與修飾，因此本發(fā)明的保護(hù)范 圍應(yīng)該以權(quán)利要求書所界定的為準(zhǔn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種芽苗菜浸種菌劑，其特征在于，所述菌劑為活性生物制品，其活性成分由干酪乳 桿菌、沼澤紅假單胞菌、蘇云金芽孢桿菌組成。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的芽苗菜浸種菌劑，其特征在于，將干酪乳桿菌、沼澤紅假單胞 菌、蘇云金芽孢桿菌分別按照5%~10%的接種量共同接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種后將培養(yǎng) 基密封置于37°C，靜置發(fā)酵5~7天，直至打開發(fā)酵容器，聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~ 4.5之間，獲得培養(yǎng)成熟的菌液，即為芽苗菜浸種菌劑;所述發(fā)酵培養(yǎng)基成分為工業(yè)紅糖6 % ~8%、玉米漿0.8%~1.5%、尿素0.4%~1.0%、食鹽1 %~2%。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的芽苗菜浸種菌劑，其特征在于，還經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)，所述擴(kuò)大培 養(yǎng)的步驟如下:將培養(yǎng)成熟的菌液直接接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種量為20%~30%，37°C密 封發(fā)酵5~7天，直至打開發(fā)酵容器，聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā)酵成 熟;如果發(fā)酵溫度不能維持37°C，適當(dāng)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間直至發(fā)酵成熟。4. 一種權(quán)利要求1或2所述芽苗菜浸種菌劑的制備方法，其特征在于，是將干酪乳桿菌、 沼澤紅假單胞菌、蘇云金芽孢桿菌共同接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種后將培養(yǎng)基密封置于37 °C，靜置發(fā)酵5~7天，打開發(fā)酵容器，聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā)酵成 熟，得到所述芽苗菜浸種菌劑。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的芽苗菜浸種菌劑的制備方法，其特征在于，接種量分別為5% ~10%〇6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的芽苗菜浸種菌劑的制備方法，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)基成分如 下:工業(yè)紅糖6%~8%、玉米漿0.8%~1.5%、尿素0.4%~1.0%、食鹽1 %~2%;發(fā)酵培養(yǎng) 基的配制方法為:使用煮沸的井水溶解各成分，并繼續(xù)煮沸5~lOmin，冷卻后pH使用石灰乳 調(diào)至6.5~7.5。7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的芽苗菜浸種菌劑的制備方法，其特征在于，還包括菌劑的擴(kuò)大 培養(yǎng)，的步驟如下:將培養(yǎng)成熟的菌液直接接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種量為20 %~30 %，37 °(：密封發(fā)酵5~7天，直至打開發(fā)酵容器，聞到酸甜氣味，pH試紙檢測(cè)在3.5~4.5之間，即發(fā) 酵成熟;如果發(fā)酵溫度不能維持37°C，適當(dāng)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間直至發(fā)酵成熟。8. 權(quán)利要求1-3任一所述的芽苗菜浸種菌劑在芽苗菜浸種中的應(yīng)用。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，在芽苗菜培育過程中分別使用不同稀釋倍 數(shù)的菌劑浸泡小麥種子或豌豆種子。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，菌劑稀釋倍數(shù)150~200倍。
【文檔編號(hào)】A01C1/06GK105831162SQ201610278286
【公開日】2016年8月10日
【申請(qǐng)日】2016年4月28日
【發(fā)明人】劉立明, 劉佳, 華東明, 羅秋玲, 陳修來
【申請(qǐng)人】江南大學(xué), 無錫蘇芽食品有限公司