一種防治煙草病毒病的核桃青皮提取物制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種防治煙草病毒病的核桃青皮提取物制備方法，能從這些被遺棄的廢物中提取出防治煙草病毒病的活性成分，不但能夠解決大量的核桃青皮堆積問題，實(shí)現(xiàn)“變廢為寶”，而且也能有效防治煙草病毒病，從而一舉兩得，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明針對(duì)煙草病毒病的防治而設(shè)計(jì)，采用提取物兌水后噴灑在煙草植物葉面上，能夠有效的防治煙草病毒病，其制作方法簡(jiǎn)單，成本低廉，具有推廣應(yīng)用的價(jià)值。
【專利說明】
一種防治煙草病毒病的核桃青皮提取物制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種植物成分提取方法，尤其涉及一種防治煙草病毒病的核桃青皮提 取物制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 核桃為胡桃科核桃屬落葉喬木，核桃青皮，又名青龍衣，為未成熟的核桃最外層的 一層青皮切制而成，核桃青皮為核桃未成熟時(shí)外部的一層厚厚的綠色果皮，其味苦、澀、微 寒、有毒?！侗静菥V目》記載著核桃青皮具有止痛作用;《山東中草藥手冊(cè)》中有"解毒消腫"的 說法;在《陜西中草藥》中亦有"治牛皮癬、魚鱗癬、荷葉癬及禿瘡等癥"的記載?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研 究表明，核桃青皮提取物對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌有抑制作用，對(duì)朱砂葉螨、板栗 葉螨有較強(qiáng)殺螨活性，對(duì)小麥赤霉病菌等有抑制作用。除了上述作用之外，核桃青皮還具有 抗菌和抗病毒活性。而商洛作為全國知名的核桃之鄉(xiāng)，每年都有大量的核桃青皮被倒入田 野、河流或者田地，這在一定程度上不僅污染了河流也帶來了較大的環(huán)境問題。如果能從這 些被遺棄的廢物中提取出防治煙草病毒病的活性成分，不但能夠解決大量的核桃青皮堆積 問題，實(shí)現(xiàn)"變廢為寶"，而且也能有效防治煙草病毒病，從而一舉兩得。另外，已有研究中， 具有多種方法能夠制備核桃青皮的提取物，然而，不同提取工藝制備的核桃青皮提取物的 作用不盡相同?，F(xiàn)有技術(shù)中，對(duì)于核桃青皮提取物防治煙草病毒的技術(shù)，并未出現(xiàn)相關(guān)報(bào) 道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的就在于為了解決上述問題而提供一種防治煙草病毒病的核桃青皮 提取物制備方法。
[0004] 本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)上述目的：
[0005] 本發(fā)明包括以下步驟：
[0006] (1)取7~9月份的青皮核桃并將其青皮剝離，將核桃青皮置于烘箱內(nèi)烘干并粉碎， 過80~100目篩，稱取一定量的核桃青皮粉末以石油醚在50°C下回流提取2h，過濾，濾液濃 縮回收其中的乙醚，濃縮后的膏體即為核桃青皮提取物I;
[0007] (2)取步驟（1)中核桃青皮濾渣若干，加入95 %乙醇，而后放入離心罐中浸取3次， 每次靜置24h小時(shí)，再離心15min，而后濃縮至膏體備用，即為核桃青皮提取物II;
[0008] (3)取步驟（1)中核桃青皮濾渣若干，加入丙酮，而后放入離心罐中浸取3次，每次 靜置24h小時(shí)，再離心15min，而后濃縮至膏體備用，即為核桃青皮提取物III;
[0009] (4)取步驟（1)中核桃青皮濾渣若干，加入乙酸乙酯，而后放入離心罐中浸取3次， 每次靜置24h小時(shí)，再離心15min，而后濃縮至膏體備用，即為核桃青皮提取物IV;
[0010] (5)將步驟（1)、步驟(2)、步驟(3)、步驟(4)中所得浸膏混合至攪拌機(jī)中攪拌至充 分混合，然后用等質(zhì)量的丙酮水溶解至100mg/mL，然后再用等體積的石油醚萃取而獲得萃 取物為核桃青皮提取物V。
[0011]具體地，所述步驟（1)中的核桃青皮粉末與石油醚的比例為1:2.5;所述步驟(2) (3)(4)中的核桃青皮粉末與相應(yīng)溶劑的比例為1:5。
[0012]本發(fā)明的有益效果在于：
[0013] 本發(fā)明是一種防治煙草病毒病的核桃青皮提取物制備方法，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本 發(fā)明針對(duì)煙草病毒病的防治而設(shè)計(jì)，采用提取物兌水后噴灑在煙草植物葉面上，能夠有效 的防治煙草病毒病，其制作方法簡(jiǎn)單，成本低廉，具有推廣應(yīng)用的價(jià)值。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 下面對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明：
[0015] 本發(fā)明包括以下步驟：
[0016] (6)取7~9月份的青皮核桃并將其青皮剝離，將核桃青皮置于烘箱內(nèi)烘干并粉碎， 過80~100目篩，稱取一定量的核桃青皮粉末以石油醚在50°C下回流提取2h，過濾，濾液濃 縮回收其中的乙醚，濃縮后的膏體即為核桃青皮提取物I;
[0017] (7)取步驟（1)中核桃青皮濾渣若干，加入95 %乙醇，而后放入離心罐中浸取3次， 每次靜置24h小時(shí)，再離心15min，而后濃縮至膏體備用，即為核桃青皮提取物II;
[0018] (8)取步驟（1)中核桃青皮濾渣若干，加入丙酮，而后放入離心罐中浸取3次，每次 靜置24h小時(shí)，再離心15min，而后濃縮至膏體備用，即為核桃青皮提取物III;
[0019] (9)取步驟（1)中核桃青皮濾渣若干，加入乙酸乙酯，而后放入離心罐中浸取3次， 每次靜置24h小時(shí)，再離心15min，而后濃縮至膏體備用，即為核桃青皮提取物IV;
[0020] (10)將步驟(1)、步驟(2)、步驟(3)、步驟(4)中所得浸膏混合至攪拌機(jī)中攪拌至充 分混合，然后用等質(zhì)量的丙酮水溶解至100mg/mL，然后再用等體積的石油醚萃取而獲得萃 取物為核桃青皮提取物V。
[0021] 具體地，所述步驟（1)中的核桃青皮粉末與石油醚的比例為1:2.5;所述步驟(2) (3)(4)中的核桃青皮粉末與相應(yīng)溶劑的比例為1:5。
[0022] 分別將核桃青皮提取物I、II、III、IV、V用5% DMS0溶液配制成1，5，10，15，20mg/mL 的溶液備用；
[0023] 各取感染普通煙草花葉病毒病、煙草黃瓜花葉病毒病以及煙草馬鈴薯Y病毒病的 煙草植株若干，接種前取發(fā)病的鮮葉片5g研磨、過濾、定容至100mL備用；
[0024] 在步驟（1)中制備的樣品提取液中加入步驟(2)中病毒提取液lmL，混勻，備用，同 時(shí)以5 %MDS0中加入步驟(2)中病毒提取液lmL為對(duì)照，以市售抗病毒農(nóng)藥為陽性對(duì)照；
[0025]抗病毒活性的測(cè)定:選擇健康、生長旺盛的6-8葉期心葉煙，左半葉接種步驟(3)中 樣品與病毒溶液，右半葉接種對(duì)照溶液，每處理接種8-10個(gè)葉片，重復(fù)3次，3天后分別統(tǒng)計(jì) 枯斑數(shù)目，抑制率計(jì)算公式為：
[0026] 抑制率（％ )=(對(duì)照平均每葉枯斑數(shù)-處理每葉枯斑數(shù))/對(duì)照平均每葉枯斑數(shù)X 100%
[0027] 不同提取物抗病毒試驗(yàn)結(jié)果如下：
[0028] 表1不同溶劑的核桃青皮提取物對(duì)煙草花葉病毒的抑制率
[0030]表2不同溶劑的核桃青皮提取物對(duì)煙草黃瓜花葉病毒的抑制率
[0033]表3不同溶劑的核桃青皮提取物對(duì)煙草煙草馬鈴薯Y病毒的抑制率
[0035]有上述表中實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，提取物IV對(duì)三種病毒的作用效果最明顯，提取物I作用 最弱;對(duì)煙草花葉病毒作用最強(qiáng)，煙草馬鈴薯Y病毒作用最弱?？傮w來說，制備的核桃青皮不 同溶劑提取物對(duì)煙草花葉病毒、煙草黃瓜花葉病毒以及煙草馬鈴薯Y病毒均有不同程度的 抑制作用。
[0036]以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征及本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù) 人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本 發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變 化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其 等效物界定。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種防治煙草病毒病的核桃青皮提取物制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 取7~9月份的青皮核桃并將其青皮剝離，將核桃青皮置于烘箱內(nèi)烘干并粉碎，過80 ~100目篩，稱取一定量的核桃青皮粉末以石油醚在50°C下回流提取2h，過濾，濾液濃縮回 收其中的乙醚，濃縮后的膏體即為核桃青皮提取物I; (2) 取步驟（1)中核桃青皮濾渣若干，加入95%乙醇，而后放入離心罐中浸取3次，每次 靜置24h小時(shí)，再離心15min，而后濃縮至膏體備用，即為核桃青皮提取物II; (3) 取步驟（1)中核桃青皮濾渣若干，加入丙酮，而后放入離心罐中浸取3次，每次靜置 24h小時(shí)，再離心15min，而后濃縮至膏體備用，即為核桃青皮提取物III; (4) 取步驟（1)中核桃青皮濾渣若干，加入乙酸乙酯，而后放入離心罐中浸取3次，每次 靜置24h小時(shí)，再離心15min，而后濃縮至膏體備用，即為核桃青皮提取物IV; (5) 將步驟（1)、步驟(2)、步驟(3)、步驟(4)中所得浸膏混合至攪拌機(jī)中攪拌至充分混 合，然后用等質(zhì)量的丙酮水溶解至100mg/mL，然后再用等體積的石油醚萃取而獲得萃取物 為核桃青皮提取物V。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的防治煙草病毒病的核桃青皮提取物制備方法，其特征在于:所 述步驟（1)中的核桃青皮粉末與石油醚的比例為1:2.5;所述步驟(2)(3)(4)中的核桃青皮 粉末與相應(yīng)溶劑的比例為1:5。
【文檔編號(hào)】A01P1/00GK105851064SQ201610211028
【公開日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年4月6日
【發(fā)明人】穆耀輝, 何念武, 陳明山, 黃金輝, 趙艷艷, 李堆淑, 王學(xué)軍
【申請(qǐng)人】陜西省煙草公司商洛市公司, 商洛學(xué)院